精液品质检查

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1、精液品质检查2012-01-1613:38:54來源：牛业科技Z光浏览：1次冃前在全世界范围内，牛的人工授精已普遍采用冷冻精液输精。因此，在奶牛人工授精中的精液品质检查，主要是指在输精前后，対解冻后的精液进行检查。国内外公牛的冷冻精液都有严格的质量标准，用户对具质量的检查主要是进一步核实具质量，了解或发现操作中的问题。一、精子解冻活率检查（一）颗粒冷冻精液取消毒并封装于安甑内的稀释液（一般为2.9%柠檬酸钠1毫升）,放于40°C的温水屮，待具温度接近40°C时，打开安瓶放入颗粒冷冻精液1粒，轻轻摇动,使其融化，即町取样在高倍显微镜卜•观察其活率。检查时显微载物

2、台的温度应保持在37°C左右。在评定活率时，要注意上、中、下三个层次精子活率的变化，左、右、上、下四个方位视野的差界，才能做出较准确的判断。活率在0.3以上即为合格精液。（二）细管冷冻精液可肓接投入40°C温水屮，待其融化后，立即取出，剪去棉塞一端，取样检查。二、死活精了比例检查先将精了死活染色液分装于容量为0.5毫升左右的指形玻璃小管中，染色液为伊红。苯胺黑溶液（含5%水溶性伊红和1%苯胺黑溶液），染色前先放入37°C恒温箱或水浴箱中预热，滴入解冻精液2〜3滴，混匀后再放入温箱，3分钟后即可制做抹片，待抹片风干革命后在汕镜下观察。死精子为红色，活精子不着色或

3、只在头部的核环处呈淡红色。随机观察200个精子并计算出死、活精子的比例。用这种方法所得到的活精子百分数要高于精子的活率。对于活率观察，技术熟练、估计准确的人员可不做精子死活染色的检杳。三、密度检查对精子密度检查的最简单方法是,取1滴解冻精液在低倍显微镜下凭经验粗略地估计其密度是否符合输精的要求。较精确的方法是釆用血球计数装置，进行精确的计算，具体方法在这里不作介绍。以此为基础建立起来的光电比色法测定精液小精子密度,己经被人型公牛站广泛应用。通过密度的检查可以计算出被检精液每毫升所含的精子数，再根据解冻后的活率可得每毫升精液屮的有效精子数（即呈直线前进运动的精子

4、数），最后乘以输精剂量（颗粒冷冻精液为0.1±0.01毫升；细管冷冻精液为0.5毫升或0.25毫升）计算出每个输精剂虽的冇效精了数（颗粒冷冻精液为1200万以上；细竹冷冻精液为1000万以上）。四、其他方而的检查包括畸形精子的比例、顶体完整率、生存指数等方而的检杳。在一般生产条件下是不进行的，只有在输精后母牛的受胎率明显下降乂很难找到确切的原因时，才送交有关实验室进行这些项冃的检查。第三节奶牛精液的冷冻保存到H前为止，在各种家畜中，牛的精液冷冻保存技术最为成功，已形成一套完整定型的工艺流程。（一）、冷冻稀释液的选择和配制（1）稀释液的选择牛冷冻精液稀释液的种类

5、较多，可根据H身的经验和条件选用并固泄1〜2个最适宜的稀释液配方。（2）稀释液的配制原则笫一，配制稀释液所使用的一切用貝，必须经认真清洗和严格消毒。笫二，稀释液要现用现配，保持新鲜，经密封、消毒的稀释液，允许在0〜5°C的冰箱中保存1周。但卵黄、抗生素、輛、激素等有生物活性的物质，必须在用前临时添加。笫三，稀释用水应为蒸憎水或重蒸傑水，要求保持新鲜、中性。笫四，配制稀释液所用的化学制剂要纯净，一般要求化学纯或分析纯；称量要准确无误，经充分溶解、过滤后进行消毒（隔水煮沸或蒸气消毒）。第五、卵黄和奶类成分要求新鲜、无污染、无杂质。第六,抗生素等冇生物活性的物质，必

6、须在稀释液冷却至室温时加入，以免失去活性。（二）、精液的稀释（1）稀释倍数的确定对原裕液的稀释倍数主要依据精液的精子密度和活率，以及精子解冻示的活率来确定，虽无具体规定，但必须保证每个输精剂量中，在解冻后所含的有效精了（宜线前进运动的精了）数达到规定的标准。例如，60年代，国外冷冻精液的稀释倍数只有一个人致的范围，英国不超过50倍，爱尔兰10倍左右，法国9〜23倍，前苏联10〜25倍，美国为30〜50倍，保证每个输精剂量有1500万有效精子。我国当前在颗粒冷冻精液的生产小，由于颗粒体积的缩小和解冻后的再稀释，一般按原精液做仁2〜4倍稀释。滴冻颗粒为0.1毫升，

7、解冻时每毫升的解冻液加入一•粒，即为一•个输精剂量。其屮含冇效精子不少于1000万，仍可获得理想的受胎效果。实际上，其最终稀释倍数是30倍左右。（2）稀释方法廿汕是牛精液冷冻保存的重要保护剂，但它对精子同时也具有性。为减低甘汕对精子的有害作用，多采用两次稀禅，即采精后先用不含廿汕的第一液稀释到最终稀释借数的一半，经缓慢降温（不少于60分钟）至4〜5°C的温度下，再加入同温等量含LT油的第二液。第二液的加入方法有一次或多次加入，以及缓慢滴入等方法。Lh由的最终浓度通常为7%。近年来，在试验的基础上，我国有的采用一次稀释的方法。即采精后用同温的含甘汕稀释液一次稀释

8、完成，也取得了良好的冷冻保存效果。（三