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时间:2019-11-26
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1、异常白细胞检查(显微镜检查法)1.实验原理用瑞氏染色法,对制备好的血涂片进行染色,然后在显微镜下进行形态检查。2.标本釆集:2.1标本种类:新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2标木要求:2.2.1抗凝剂采用EDTAK2抗凝。2.2.2用手指末梢血作白细胞检验时,如手指有冻疮,则主张采用耳垂血。3.标本储存:取材后应立即推制成血涂片,并尽快送检。4.标本运输:保持干燥,室温运输。5.标本拒收标准:污染,凝固标本不能作测定。6.实验材料:瑞氏血细胞染色液,生产厂家:(台资)珠海贝索牛物技术有限公司。7.实验仪器:7.1仪器名称:OLYMPUS显微镜7.2仪器厂家:OLYMPUS7.3
2、仪器型号:OLYMPUSCH308.操作步骤8.1采血后推制厚薄适宜的的血膜片,血膜应呈舌状,头、体、尾清晰可分。8.2瑞氏染色:将制好的干燥血涂片平置于染色架上,滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其迅速盖满血膜,然后加瑞氏染色B液3-5滴,轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀,染色1-2分钟(气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间),用白來水冲去染液,待T。8.3高倍镜(必要时汕镜)观察口细胞形态。8.结果判断与分析9.1核象变化。(1)核左移:说明外周血中幼稚或杆状核粒细胞增多,见于急性白血病,急性化脓性细菌感染,急性中毒,急性溶血。正常妊娠、缺氧及低血压也可出现细胞核左
3、移现象。(2)核右移:说明中性粒细胞核分叶过多,见于巨幼细胞性贫血,恶性贫血,化疗及炎症恢复期,遗传性中性粒细胞分叶过多,尿毒症等。巨多核中性粒细胞:成熟中性细胞胞体增大,核分叶过多,常为5-9叶,甚至12-15叶。各叶大小差别很大,常见于巨幼细胞性贫血。此外,在疾病进行期突然出现核右移,表示预后不良。(3)分叶过少:乳酸缺乏症,假性pelger-huet异常等。9.2英他核界常环形或面包圈型核:见于慢粒,慢性粒细胞白血病,骨髓异常增生综合征等。中性粒细胞形态变化2.3中性粒细胞的毒性变化:1)细胞大小不均:为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。2)中毒颗粒:比正常中性颗
4、粒粗大,大小不等,分布不均匀,染色较深,呈黑色或紫黑色。有时颗粒很粗大,与嗜碱粒细胞易混淆;有时小而稀•少,散朵在正常中性颗粒之中。含中毒颗粒的中性粒细胞应与嗜碱粒细胞区别,•其要点:嗜碱粒细胞核较少分叶、染色较浅、颗粒较人、大小不均、着色更深、细胞边缘处常分布较多,可分布于核上,胞浆中常见小空泡。在血片染色偏碱或染色吋间过长时,易将中性颗粒误认为中毒颗粒。但只耍注意全片各种细胞的染色情况,则不难区别。含屮毒颗粒细胞在中性细胞屮所占比值称为毒性指数。毒性指数愈人,提示屮毒变性结果。3)空泡:可为单个,但常为多个。大小不等,亦可在核中出现。被认为是细胞脂肪变性的结果。4)Dohl
5、e体:是屮性粒细胞胞浆内因毒性变而保留的嗜碱性区域。呈圆形、梨形或云雾状。界限不清,染成灰蓝色,直径为1-2pm,是胞质局部不成熟,即核与胞质发育不平衡的表现。Dohle小体亦可见于单核细胞中,其意义和同。5)退行性变:常见者有胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀和核溶解(染色质模糊、疏松)等等。如胞质破裂后消失,只剩胞膜,则成裸核或蓝状细胞,退行性变亦可见于衰老细胞,在正常情况下为数极少。这些毒性变化可单独出现,亦可同时出现。观察中性粒细胞的毒性的变化,对估计疾病的预后有一定帮助。7.4其它异常口细胞:1)Pelger-Huet畸形:表现为成熟中性粒细胞核分叶能力减
6、弱。常为杆状和分两叶(其间难成细丝)。呈肾形或哑铃形。染色质聚集成小块或条索网状,其间有空折间隙。为常染色体显性遗传异常,一般无临床症状。但也町继发于某些严重感染、白血病、骨髓增生异常综合征、肿瘤转移和某些药物(如水仙胺、磺基二甲基异恶哇)治疗后。2)Chediak-Higashi畸形:在Chediak-Higashi综合征患者骨髄和血液各期粒细胞中,含数个至数I•个直径2-5Mm的包涵体,即异常巨大的紫蓝或紫红色颗粒。电镜观察和细胞化学显示,巨大颗粒为界常溶酶体。患者容易感染,常伴白化病。为常染色体显性遗传,此弄常颗粒也偶见于单核细胞、淋巴细胞中。3)Alder-Reilly
7、畸形:其特点是在中性粒细胞中含巨大深染的嗜天青颗粒,染深紫色。此异常颗粒与中毒颗粒的区别是颗粒较大,不伴有白细胞数增高、核彖左移和空泡等其它毒性变化。患者常伴有脂肪软骨营养不良或的遗传性粘多糖代谢障碍。类似颗粒亦可见于其它口细胞小。4)May-Hegglin畸形:患者粒细胞终身含有淡蓝色包涵体。实验证明这种包涵体与前述常见于严重感染、中毒等所见Dohle体相同,但常较大而圆。除中性粒细胞外,其他粒细胞甚至巨核细胞内亦对见到。7.5淋巴细胞形态学变化(1)界型淋巴细胞:在传染性单核增多症、病毒
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