实验7 荧光法测定硫酸奎宁含量(2014-4-30)

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1、实验七荧光法测定硫酸奎宁溶液的含量2014.5.5实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题Experimentalpurposesandrequirements1.掌握荧光法的原理与定量分析方法（标准曲线法）；2.熟悉荧光光度计的使用方法；3.掌握移液枪的使用方法。实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple物质分子接受光子能量被激发后，从第一激发单重态的最低振动能级返回基态时发射出的光即为荧光。由于各种去活化过程的存在，荧光辐射能通常要比激发能量低，或者说，荧光波长大于激发波长（Stokes效应）。实验目的与要求实验原理实

2、验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple荧光仪器1）光源：氙灯、高压激发单色器样品池汞灯、激光；光源2）样品池：石英（低荧光材料）；发射3）两个单色器：激发单色和发射；指示器·器4）检测系统：检测器放大器检测器和放大器（PMT）。记录器实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple1）激发光谱（excitationspectrum，即EX）将激发光的光源用激发单色器分光，使不同波长的入射光激发荧光体，然后让所产生的荧光通过固定波长的发射单色器而照到检测器上，测定不同波长光照射下荧光强度的变化，以激发波长为横坐

3、标，荧光强度为纵坐标，可得荧光物质的激发光谱。激发光谱可用于鉴别荧光物质；在定量时，用于选择最适宜的激发波长。实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple2）发射光谱激发光谱荧光光谱（emissionspectrum，即EM）磷光光谱固定激发光波长为最大激发波长，而让荧光物质发射的荧光通过发射单色器分光扫描并检测不同波长下的荧光强度，以发射波长为横坐标，荧光强度为纵坐标作图，得到物质的荧光光谱。实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple定量分析方法优点1.灵敏度高比紫外-可见分光光度

4、法高2～4个数量级；检测下限：0.1～0.001g/mL；2.选择性强既可依据发射光谱特征，又可根据激发光谱特征；3.试样量少和方法简单缺点应用范围小。实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple校正曲线法步骤：F1.配制不同浓度的标准FX溶液；2.做F～C关系曲线；3.求得样品浓度。CXC注意：固定仪器和测定条件；校正曲线试样浓度在线性范围内实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple移液器的使用移液器体积：大体积→小体积逆时针小体积→大体积顺时针超过设定刻度，再回

5、调。保证最佳的精确度。实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple移液器的使用安装吸头：吸取不同液体时必须更换吸头，将移液器端垂直插入吸头，左右微微转动，上紧即可；实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple移液器的使用吸液：先将四指并拢握住移液器上部，用拇指按住塞杆顶端的按钮，向下按到第一停点垂直吸液，枪头尖端需浸入液面2-4mm以下；枪头预润湿-在安装了新的吸头或增大了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放2-3次，确保移液工作的精度和准度；将移液枪提离液面，停约1s，观察

6、是否有漏液；实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple移液器的使用放液：将吸液嘴贴到容器内壁并保持微小倾斜；平稳地把按钮压到第一停点，停1-2s（粘性大的液体要加长停留时间）后，继续按压到第二停点，排出残余液体，然后将吸头沿着内壁向上移开；松开按钮；吸取不同液体时必须更换吸头，按弹射器除去吸头；实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题ExperimentalPrinciple使用注意如长时间不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度；定期清洁移液枪外壁，可以用95%酒精或60%的异丙醇，再用蒸馏水擦拭，自然晾干；

7、慢吸慢放；当移液器吸头内有液体时，严禁将移液器水平或倒置，以防液体倒流腐蚀移液器；在设定容量值的过程中，禁止将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏；移液枪不得移取有腐蚀性的溶液，如强酸、强碱等；实验目的与要求实验原理实验操作仪器与注意事项思考题Proceduresandmethods硫酸奎宁标准溶移液器吸取液（50g/mL）200L-1000L25mL量瓶硫酸奎宁样品溶移液器吸取液（？g/mL）150L硫酸溶液比色皿光路定容测定0.05moL/