微生物限度检查-教案9

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1、深圳技师学院一体化课程教案（首页）共3页科0微生物限度检查项目三：耐胆盐革兰氏阴性菌检查任务2：定量试验（预培养及增菌结果、分离接种）项冃四：口服制剂中间产品控制菌检查任务1大肠埃希菌检查（复苏准备）授课日期年月曰眷4班级授课方式项FI引领，任务驱动。作业题数用W拟咐h教学目的能力目标：1、能正确观察耐胆盐革兰氏阴性菌预培养及增菌培养并填写记录及报告；2、能熟练完成耐胆盐革兰氏阴性菌定量试验分离接种3、能熟练完成口服制剂中间产品大肠埃希菌检查复苏准备知识冃标：1、熟悉现行版本药典中药饮片卫生标准

2、；2、熟悉耐胆盐革兰氏阴性菌检查定量试验操作程序；3、口服制剂中间产品卫生标准。选用教学媒体实训室：准备1'可、仪器室、加热室、洁净区等；设备：天平、灭菌器等；器皿：平皿、三角瓶、量筒、移液管等；多媒体重点1、耐胆盐革兰氏阴性菌预培养处理；2、耐胆盐革兰氏阴性菌定量试验分离接种3、口服制剂中间产品大肠埃希菌检查复苏备料难点耐胆盐革兰氏阴性菌定量试验的结杲处理教学回顾说明审阅签名:教学过程第2页教学环节教学内容教学过程时间min、11!-1.Z.课刖准备1•各种参考文件、资料、记录表格等；2.备料

3、单：含场地、设备、器皿和试剂、供试品等提前1-2天准备；3.着装：穿工服1教师提供备料单2与实验员共同备料。20课外课堂导入导入-本次课程内容项目三：耐胆盐革兰氏阴性菌检査任务2：定量试验（预培养及增菌结果、分离接种）项目四：口服制剂中间产品控制菌检查任务1大肠埃希菌检查（复苏准备）教师：引导学牛共同确认相关项目计划进程中本次完成内容；每个小组确认成员分工5项目实施检验操作项目三：耐胆盐革兰氏阴性菌检查任务2：定量试验（预培养及增菌结果）预培养：使供试品中的细菌充分恢复但不增值，培养时间短，温度

4、低增菌：有选择性的使细菌增值培养，培养时间适宜，温度适宜增菌液体培养结果观察：1.阴性：不浑浊，澄清透明2.供试品：？3.阳性：浑浊学生观察、记录对异常情况要求讨论分析原因呼吸道吸入给药制剂供试品处理问题小结学生：完成观察记录操作教师:：指导、检查记录并引导学生进行结果分析10项目三：耐胆盐革兰氏阴性菌检查任务2：定量试验（分离接种）1、制作平板：消毒一一倾注培养基一一凝固2、接种：供试品：划线接种阴性对照：划线接种3、倒置培养：温度：30〜35°C时1'可：18・24小时注意：无菌操作学生：完

5、成接种、培养操作教师:：指导、检査记录30教学过程第3页教学环节教学内容教学过程吋间minr篥项目四：口服制剂中间产品控制菌检查任务1大肠埃希菌检查(复苏准备)大肠埃希菌备料复苏备料单：胰酪大豆腺液体培养基3瓶，研钵，烧杯，量筒、刻度吸管(10ml)、玻璃棒、消毒棉，称量纸学生按计划准备口服制剂屮间产品大肠杆菌检查，增菌培养用器皿和工具、培养基、稀释剂、对照用菌等学生完成备料操作；教师：指导、提示30讨论MPN法的局限性相同MPN值，但含义不同阳性管数MPNPmax(%)95%置信区间1ml(g

6、)x30.1ml(g)x30.01ml(g)x3100ml(g)下限上限003900.00000012900.00035030900.004172009031.9161310360MPN值非连续在的MPN表中，可见MPN值是不连续的。例如我国某些产品的大肠菌群标准为100MPN/100ml(g)或450MPN/100ml(g),但在MPN表中却没有相应的阳性管数。MPN值的准确度随Pmax的减小而减小在MPN表中，可见不同MPN值对应的Pmax值不同，且随着Pmax值的减小，MPN值的進确度也明

7、显下降，所以在《FDA细菌学手册》中已删除了极低Pmax值(<0.004%)的情况，因为这些Pmax值对应的MPN值没有实际的指导意义［2］。MPN法检测的隐性成本MPN法是一•种采用数学理论推算，用置信区间描述菌落浓度的一种间接计数法。虽然实验结果以MPN值表示，但MPN值并不能表示实际菌落数，而实际菌落数落在置信区1'可内的任何一点。学牛思考、讨论；老师引导、补充15总结教师作本次课堂总结(完成情况及存在问题)a)本次课堂完成情况；b)本次课存在的问题小结思考题：1.MPN和平皿直接计•数法

8、有何不同？1.教师：讨论总结、点评；2.学生：讨论总结、记录5作业作业：1.本次接种物按规定的参数培养，逐日观察并记录结果；2.填写本次相关记录；3.下一次课的备料单准备1.教师：讲解要求；2•学生：记录5清场清洁学生整理实训台面、仪器、器皿，教师检查整体完成情况，登记要求：1.培养物灭菌后清洗；2.玻璃器111L及试剂归位；3.灭菌备料放到指定位置；4•台面及抽屉整理干净安排学生完成培养基的灭菌，121菌20分钟1•学生：按分工完成2.教师：检查登记10