微生物限度检查-教案2

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1、深圳技师学院一体化课程教案(首页)共3页科目微生物限度检查项目一:需氧菌总数计数任务1麦芽糖需氧菌总数计数(接种)任务2甘油(注射用)需氧菌总数计数(准备)课期授日年月曰甞4班级授课方式项目引领,任务驱动。作业题数拟用时间教学目的能力目标:1、能按规定确定取样点和取样量并正确取样;2、能按规定方法对麦芽糖进行稀释、接种、培养、观察和记录;3、能参照需氧菌总数计数操作方法完成甘油(注射用)需氧菌总数计数操作准备;4、会使用各种灭菌设备。知识目标:1、熟悉取样SOP;2、熟悉需氧菌总数计数检验SOP

2、;3、了解需氧菌总数计数计数的意义;;4、熟悉需氧菌总数计数常规方法和适用范围;选用教学媒体实训室:准备间、仪器室、加热室等・设k天皐、微波炉、灭菌器等;器皿:平皿、三角瓶、量筒、移液管等;多媒体重点学会正确取样、需氧菌总数计数接种、培养操作难占八、、需氧菌总数计数接种。教学回顾说明审阅签名:教学过程(代号A—4)第2页教学环节教学内容教学过程时间min课前准备1、各种参考文件、资料、记录表格等;2、备料单:含场地、设备、器皿和试剂、供试品等提前1-2天准备;3、着装:穿工服教师设计、并与实验员

3、共同执行课堂导入导入:本次课程内容:项目一:需氧菌总数计数任务1麦芽糖需氧菌总数计数(取样、接种、培养)任务2甘油(注射用)需氧菌总数计数(备料)教师:讲解、说明、展示等,示范、答疑;学生:听讲,笔记、提问。3项目一:需氧菌总数计数讨论:工作进度计划表依据:2015年版《中华人民共和国药典》通则1105、1106教师:再次展示工作进度计划表;学生:分组细化2实施检验操作实施检验操作:任务1需氧菌总数计数(检查上次课程完成情况)1•供试液制备根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试

4、液。供试液制备若盅加温时,应均匀加热,且温度不应超过45°Co供试液从制备至加入检验用培养基,不得超过1小时。常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用,应建立其他适宜的方法。⑴水溶性供试品取供试品,用P1I7.0无菌氯化钠-蛋白月东缓冲液,或PH7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪人豆月东液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液。若需要,调节供试液pH值至6〜8。必要时,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。强调:检验量即一次试验所用

5、的供试品量(g、ml或cm2)o教师:检查衔接情况;操作示范、解答疑问;学生:认真观察、不懂时提问。85除另有规定外,一般供试品的检验量为10g或10ml;膜剂为100cm2;贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。检验时,应从2个以上最小包装单位屮抽取供试品,大蜜丸还不得少于4丸,膜剂还不得少于4片。一般应随机抽取供试品,取规定容器数,混合,取规定量供试品进行检验。2•倾注法取照“供试液的制备”、“接种和稀释”和“抑菌活性的中和或消除”制备的供试液1ml,置直径90rmn的无菌平皿中,注入15

6、〜20ml温度不超过45°C熔化的胰酪人豆月东琼脂或沙氏葡萄糖琼脂培养基,混匀,凝固,倒置培养。本次操作要点:1、取样:操作要点、注意事项2、人员净化程序:更鞋、脱外衣、穿洁净服、洗手、手消毒;3、物料净化程序:去(清洁)外包、进传递窗(紫外?)、内侧取出;4、供试液的制备(液体供试品):稀释剂(pH7.0无菌氯化钠■蛋白腺缓冲液);接种(平板):样品3个稀释级別各2-3皿、阴性对照2皿;接种量lmL,标记;培养(30-359,3-5天h、倒置);学生分组进入洁净区完成操作及记录;老师指导、记录

7、1.学生实训,2人/组分组进入洁净区注意:无菌操作耍求2.教师指导教学过程(代号A—4)第3页教学环节教学内容教学过程时间min实施检验操作任务2甘油(注射用)需氧菌总数计数(取样和接种的准备)1、对比任务1和任务2的异同2、备料单备料后按规定程序灭菌取样用:三角瓶、酒精棉球检验用:移液管1ml(4个)、10ml(2支)、试管2、平皿8-1K胰酪大豆腺琼脂培养基105-150mk稀释剂150ml;(PH7.0无菌氯化钠-蛋白月东缓冲液:取磷酸二氢钾3.56g,磷酸氢二钠7.23g,氯化钠4.30

8、g,蛋白淼l.Og,加水1000ml,微温溶解,分装,过滤,灭菌。)教师:引导对比;学生:记要点、写备料单。30技能训练设备操作程序和注意事项:1、微波炉:操作程序:开机■定时■启动;注意事项:容器耐热、加热宜短时多次;2、手提式灭菌器:操作程序:加水■放入■加盖■放气阀■加热■计时・降压■开盖;3、立式全自动灭菌器:操作程序:加水-放入-加盖-调节电子面板(压力、时间等)-加热■计时■降压■开盖;2・3注意事项:隔层水位、开盖前确认压力为0;教师:示范、讲解;学生:轮流操作。25总结教师作本次

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