实验用培养基适用性检查标准操作规程

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1、起单人Preparedby:起草H期Date:QC审核H期Date:市核人Reviewedby:QC审核口期Date:审核人Reviewedby:QA批准H期Date:扌烯人Approvedby:质量部QD颁发部门IssuedbyQC执行口期EffectiveDate臟文件ReplacedR)rSOP-QC-562-02实辦瞬基iO性检杏标磁作删•复审口期ReviewDate分发部门：DistributedtoQA,QC分发号DistributionNo.:目的Purpose为保障微生物检验的准确磁相关工作特制定本规定。范围Scope本程序适用于微&物限度测定培养基的适用性检査及相关丁

2、作。Responsibility分析员：严格按照木操作规程执行。及时完成各类相关拆。在上管的指导下进行任何可能的00S及偏并调杳。主管：监督本操作规程的执行。对检验员进行必要的培训。指导任何町能的00S和偏外调查。内容procedure1检验员应根据培养基配伟耀序或培养基各自的说明书配删养基。2'謂釧菌种及培养基2.1菌种：2.1.1培养基貝敏度测试所川的菌株传代次数吋J超过5代，从国家药检所或菌种俪中心购买。2.1.2枯草芽f包杆菌(Bacillussubtilis)[ATCC6633]2.1.3人肠埃希菌(Escherichiacoli)[ATCC8739]2.1.4金黄色葡萄球菌

3、(Staphylococcusaureus)[ATCC6538]2.1.5白色斜菌(Candidaalbicans)[ATCC10231]2.1.6黑曲霉(Aspergillusniger)[ATCC164O4J2.1.7伤寒沙门菌(Salmonella)[ATCC14()2812.1.8铜绿假小•胞菌(Pseudomonasaeniginosa)[ATCC9027]2.2培养基2.2.1按照培养基说明书进行配制灭菌。2.2.2人b.酪蛋口消化肉汤Soybean-CaseinDigestBroth2.2.3酪蛋白消彳曲月旨Soybean-CaseinDigestAgar2.2.4沙氏葡

4、萄糖琼脂SabouraudDextroseAgar2.2.5肠道菌增菌肉汤EntembacteriaEnrichmentBrothMossel2.2.6紫红刨驸匍萄糖琼U旨VioletRedBileGlucoseAgar2.2.7麦愿几肉汤MacConkeyBroth2.2.8麦/拗麻脂MacConkeyAgar2.2.8RV沙门氏菌富集肉汤RappaportVassiliadisSalmonellaEnrichmentBmth2.2.9木Wi赖氨酸脱氧胆盐琼脂XyloseLysineDeoxycholateAgar2.2.10LT霧醇氯化钠琼丿曲饼基MannitolSaltAgar2

5、.3微生物iI•数培养基的适用性检査2.3.1微生物计数用的成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均丿、'、/进行培养基适用性检杳。232菌悬液的制备名称金黄色葡萄球菌ATCC6538瞬假单胞菌ATCC9027菌删备人豆酪蛋门消化肉汤或人豆酪蛋门消化琼D旨人豆酪蛋门消化肉汤或人豆酪蛋门消化琼J］旨30°C・35°C,18-24小时30°C-35°C,18-24小时名称枯草菌ATCC6633白色念珠菌ATCC10231菌株制备大戸酪蛋白消化肉汤或大戸酪蛋H消化，刺旨沙氏衙萄糖琼脂30°C-35°C,18-24小吋20°C-25°C,2-3天名称黑曲霉ATCC16404菌删备沙氏荷萄

6、臟脂20°C-25°C,5・7天或者宜到形成良好僦了状态2.3.3I谜培养物用0.9%无菌氯化钠溶沁pH7.2臓盐缓冲液制成每linl含菌数不大J■-lOOcfii的菌悬液,制备黑曲每他子悬浮液时，添加3-5ml含0.05%（ml/nil）聚山梨酯％）的0.9%无菌氯化钠溶液或pH7.2磷酸盐缓冲液，将砲子洗脱。然后，用适宜加去吸岀砲子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%菌氯化钠溶液或pH7.2磷酸盐缓河液制成每lml含孑包了数不人于lOOcfii的他侶液。菌悬液在室温下放直应在2小时内使用，若保存在2〜8°C可在24小时内使用。黑

7、11

8、霉他了悬液町保

9、存在2-8°C,在验讦过的贮存期内例IJo2.4大9酪蛋白消化肉汤促生氏试验2.4.1取以I•.前3利「菌悬液各0.1ml（不大JTOOcfu）,分另入灭过菌的含有10ml大豆酪蛋白消化肉汤的试管屮，于30°C-35°C培养不超过3天。同时用相应的上一批通过促住知滋的培养基替代被检培养基进行上述试验。培养结束后进行观察，如果肉眼能淸晰看到的微牛•物的牛长与上—批通过促牛:长试验的培养基的牛长情形基本致贝IJ判定此^养基通过促牛长试验。反之则判定