组织培养技术实践实训指导书

《组织培养技术实践实训指导书》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、刖s实训项目一组织培养实训室设计及常用的仪器设备1实训项目二实训器材的清洗、包装和灭菌技术2实训项目三自然界中微生物的检查4实训项目四基本培养基母液和植物生长物质母液的配制技术4实训项冃五培养基的配制与灭菌技术6实训项目六外植体灭菌与无菌操作技术7实训项目七胡萝卜块根愈伤组织诱导技术8实训项目八月季的茎段培养技术9实训项目九山芋良种的脱毒苗培养技术10实训项目十试管苗的继代培养技术11实训项冃十一试管苗的驯化和移栽技术12-XX.—1—刖吞《组织培养技术》是一门理论性、技术性和实践性强的的课程，通过本课程的学习，要求学生掌握植物组织培养基础知

2、识、基本理论和基本技术。重点是植物的快速繁殖和脱毒技术以及组培苗工厂化生产技术。并紧紧围绕培养高等应用型技术人才，以强化技术应用能力培养为主线，着眼于培养学生应职岗位综合能力和创新精神，提高学生实践动手能力、科学实验能力、技术推广与市场开拓能力和组培苗工厂化生产经营与组织管理能力。本课程的实训方式是改变传统实践教学模式，以职业技能培养为目标，以综合性职业技能项目为载体，减少验证性实训，加大职业技能训练，把实训落到实处。实训项目一组织培养实训室设计及常用的仪器设备一、实训目的：了解组培实训室的设计；掌握准备室、接种室、培养室等的功能与基本要求；

3、了解常用仪器的使用方法、注意事项和保养方法。二、实训原理：各种仪器设备的使用原理。1.超净工作台：优点是操作方便自如，比较舒适，工作效率高，准备时间短。开机10-20分钟即可操作，可进行长时间使用。在工厂化生产中，接种工作量很大，需要经常氏久地工作时，超净台是很理想的设备。超净台功率在145-260W左右，它装有小型鼓风机，使空气穿过一个前置过滤器，在这里把大部分空气尘埃先过滤掉，然后再使空气穿过一个细致的高效过滤器，它除去了大于0.3pm的尘埃、细菌和真菌他子等，最后以较洁净的气流吹到工作台面。超净空气的流速为每分钟24-30m,这已足够防

4、止附近空气袭扰而引起的污染，这样的流速也不会妨碍采用酒精灯对器械等的灼烧消毒。在这样的无菌条件下操作，就可以保证无菌材料在转移接种过程中不受污染。超净台分水平式和垂直式二种型号。2.高压蒸汽灭菌锅：高压蒸汽灭菌法是依靠高压蒸汽灭菌器装置严密，蒸汽不外逸，温度随蒸汽压力增高而升高，当压力增至1.05kPa时，湿度可达121cCo高压蒸汽灭菌法就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌，为目前可靠而有效的灭菌方法。适用于耐高温、高压,不怕潮湿的物品，如敷料、手术器械、•药品、细菌培养基等。高压蒸汽灭菌锅使用注意事项：（1）高压灭菌锅使用前要水加到水位线

5、；（2）关闭锅盖时要对角线拧紧固定螺丝，以防漏气。（3）注意使锅内的冷空气全部排出。（4）达到规定的灭菌时间后，关闭电源，当压力指针降至0时，方可开启锅盖。（5）汽未放尽前，不得开启高压锅；压力表指针在0.05MPa以上时，不能过快放汽，以防止压力急速下降，液体滚沸，从培养容器中溢出。（6）、操作过程，请注意安全，小心烫伤。三、仪器药品：组织培养实训室中的常规仪器设备，如超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、培养箱、体视显微镜、接种工具、培养用具等。四、实训步骤：由准备室、洗涤室、接种室、培养室的顺序讲解仪器设备的使用方法、注意事项和保养方法。五、实训

6、报告：因地制宜建座组织培养实训室需哪些分室，有哪些仪器设备？实训项目二实训器材的清洗、包装和灭菌技术一、实训目的：掌握组培常用实训器材的清洗要求、步骤及灭菌方法；掌握高压湿热灭菌及电热烘干灭菌的方法及操作注意事项。二、实训原理：防止污染的有效方法是将所有与培养有关的器血，用具等进行清洗、包扎和灭菌。三、仪器药品：各种常用玻璃仪器等、棉花、纱布、皮筋、报纸、记号笔、高压蒸汽灭菌锅等。四、实训步騎（一）玻璃器皿的洗涤:1.新购置的玻璃器血的洗涤因有游离碱性物质，使用前先用1%稀盐酸浸泡一夜，然后用肥皂水洗净，清水冲洗，最后用蒸憾水冲洗一次，干后备

7、用。1.已用过玻璃器皿先将残渣除去；用清水洗净，再用热肥皂水或洗衣粉洗净，清水冲洗干净，最后用蒸憾水冲洗一次，干后备用。2.对一些不宜刷洗的玻璃器血如：吸管，滴管及较脏的器皿等先用去污粉和去油剂刷洗，口来水冲干净后，晾干，再浸入硫酸一重洛酸钾洗液中浸泡若干小时，用夹子取出在口来水冲洗干净，再用蒸憾水冲洗1—3遍，稍晾不滴水后置于干燥箱内烘干备用。3.对带有凡士林，石蜡，或胶布的器皿选用特殊方法处理后，再用常规方法洗涤。带有凡士林的器皿须先用废纸把凡士林擦去，再用汽油擦洗干净，然后用热肥皂水煮沸半小时，刷洗后，自来水冲干净。若带有石蜡，可在玻璃

8、器血下垫儿层废纸，放入60—70°C温箱中1加热一2小时，待石蜡融化后，再用废纸反复擦2—3次即去石蜡再泡入洗衣粉的热水中洗干净最后用自来水冲洗，蒸憾水冲洗干净若有