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《豇豆根腐病病原分离鉴定及其核糖体rDNAITS序列分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、直豆根腐病病原分离鉴定及其核糖体rDNA-ITS序列分析摘要：采用形态学及分子生物学的方法对采集自武汉的EL豆根腐病分离物进行形态学和分子生物学鉴定O结果表明,菌株jgf形态学上为茄腐皮镰砲菌；对jgf菌株的核糖体rna基因内转录间隔区(rdna—its)进行了pcr扩增和序列测定，并在genbank中进行了blast搜索和比对分析，根据rdna—its序列分析结果结合RL豆病株症状和病菌的形态学特征，认为武汉地区豆［豆根腐病的病原菌为茄腐皮镰砲菌(fusariumso1anisch1.)关键词：
2、肛豆根腐病；形态学；分子鉴定；rdna-its分析；fusariumso1anisch1・pathogenyisolationandidentificationofcowpearootrotdiseaseandsequencingofribosomalrdna-itswuren—fengl,yangshao—1i1,wanpeng2,huangwei2(1.wuhaninstituteofvegetab1esciences,wuhan430065,china2.instituteofplantpr
3、otectionandsoilscience,hubeiacademyofagriculturalsciences,wuhan430064,china)abstract：thefungalisolatejgffromcowpearootrotdisease,whichwerecol1ectedfromwuhan,werestudiedmorphologicallyandmo1ecu1ar1y.theresultsshowedthattheisolatejgfweremorpho1ogica1fus
4、ariumsolanisch1.therdna—itsgenesofiso1atejgfwereamplifiedandsequenced.basedontheblastsearchandthealignmentana1ysisingenbankdatabasecombinedwithmorphologicalcharacters,thepathogenofcowpearootrotdiseasewasidentifiedasfusariumsolanisch1.keywords：cowpearo
5、otrotdisease；morphology；molecularidentification；rdna—itssequenceana1ysis；fusariumsolanisch1麻豆是我国主要蔬菜作物之一，其多季节、多模式、多花色和短周期栽培成为农民增收的主导性蔬菜。湖北常年种植面积4万hm2,武汉市麻豆种植面积约0.67万hm2,作为“旌豆之乡”的武汉市新洲区双柳街，年种植约0・4万hm2次。但是生产中,常因栽培管理不当或环境条件的影响，造成病害的流行，特别是土传病害。直豆根腐病（cowpe
6、aroot）［1］是濟豆的一种典型的土传病害，随盒豆种植年数的增加、面积的扩人、品种的变化等，已成为臥豆上发病最重、危害最大、防治最困难的病害。本研究从武汉地区尬豆种植区采集并分离发病班豆根腐病病菌，并进行鉴定，为后续的研究提供基础材料和条件。1材料与方法1・1标本来源与病原菌的分离纯化标样于2009年采自武汉市蔬菜科学研究所试验基地。病原真菌的分离方法参照方中达［2］的植病研究方法有关介绍，选取新发病豆［豆植株茎基部的根颈作为分离材料，进行常规组织分离，经单抱纯化、培养获得单抱菌株。1・2致病性
7、测定采用k0chpS法将发病组织上分离到的病原菌纯培养物（鞄子）制成悬浮液（105〜106个抱子/m1）o采用自然伤根浸砲子液接种植株。取生长良好的无病班豆苗，用无菌水将根颈部表面冲洗干净，然后使根完全浸在抱子悬浮液屮30min,接种后植株定植于装有灭菌沙土的花盆中。每个菌株接种8株苗，3次重复，以无菌水为对照。植株置于25°C下光照培养箱中，接种后每隔1〜2d观察1次。发病后，从病斑处再次分离病原菌，确认致病菌。1・3病原菌形态学鉴定1・3.1pda上的病菌形态特征观察将供试菌株接种到Pda培养
8、基上，25°C恒温培养。7d后观察培养基上的菌落形态，制作玻片，光学显微镜下观察分生抱子及分生砲子梗的形态特征，并测量分生抱了的大小。1・3・2产抱表型观察产抱表型的观察采用滤纸片法。参照张天宇［3］的方法，取滤纸剪成比载玻片稍小的长方形，将中心挖一边长约10mm的方孔，灭菌后用无菌水润湿放于无菌载玻片上。挑取少量活化的菌丝块均匀涂于滤纸中央方孔的边缘，然后将载玻片置于铺有湿润滤纸的灭菌培养皿中，25°C恒温培养。48h后显微镜下观察产抱表型。1・3・3形态学鉴定依据根据菌落形态、
