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《注射用克林霉素磷酸酯无菌检查的方法验证(1)03g》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、注射用克林霉素磷酸酯无菌检查的方法验证（l）0.3g注射用克林霉素磷酸酯无菌检查方法及其验证报告为保证新生产的注射用克林霉素磷酸酯无菌检查的结果的准确可靠,现特对注射用克林霉素磷酸酯进行了无菌检查方法的修订及验证工作。新拟定的检查方法及验证结果如下：1＞实验用品：供试品：注射用克林霉素磷酸酯（批号：规格：0.3g/支）样品来源：仪器、滤器和设备：HTY-III型智能集菌仪、全封闭集菌培养器KDGB220KDGB330,均由杭州高得泰林医疗器械有限公司制造。HNZ-1-1垂直流形超净工作台（南通沪
2、南科学仪器冇限公司）；YXQ-SG41.280电热手提式压力蒸汽消毒器（上海医用核子仪器厂）；HH•B11•500电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂）；HP250MJ-B霉菌培养箱（武汉瑞华仪器设备有限责任公司）；DGH140-B型电热鼓风干燥箱（武汉瑞华仪器设备有限责任公司）等。培养基：硫乙醇酸盐培养基，批号：091020；改良马丁培养基,批号:090911；营养肉汤培养基，批号：090922；营养琼脂培养基，批号：091102；玫瑰红钠琼脂培养基，批号：090601；蛋白月东，批号：0801
3、21；上述培养基均來源于北京三药科技开发公司o均按照《中国药典》2010年版二部附录XIH无菌检查法项下耍求配制。冲洗液：0.1%蛋白腺水溶液，按照《中国药典》2010年版二部附录XIH无菌检查法项下要求配制。验证试验用菌种：枯草芽砲杆菌[CMCC(B)63501]金黄色葡萄球菌[CMC(B)26003]1大肠埃希菌[CMCC(B)44102]生抱梭菌[CMCC(B)64941]黑曲霉菌[CMCC(F)98003]白色念珠菌[CMCC(F)98001]上述菌种均来自湖北省药检所。均符合中国药典》
4、2010年版二部附录XIH无菌检查法项下要求。2、预试验小结：检查方法选择：根据《中国药典》2010年版二部附录XIH无菌检查法方法耍求首选薄膜过滤法。取样量的确定：本詁规格中0.3g/支，根据《中国药典》2010年版二部附录XIH无菌检查法方法要求，确定取样量应为：30支。阳性对照菌的选择：本品为有特定抗菌谱的抗生素类药物，主要是抗革兰氏阳性菌及厌氧菌，故阳性对照菌首选金黄色葡萄球菌。供试品处理方法草案：本品为有特定抗菌谱的抗生素类药物，以0.1%无菌蛋白月东水溶液5ml溶解，再以0.1%无菌
5、蛋白月东水溶液作为冲洗液，冲洗液总量为300ml,冲洗1次，阳性对照菌能良好生长，据此拟定本品的无菌检查方法草案如下：无菌检查方法草案：取本品30支,分别加0.1%无菌蛋白腺水溶液5ml溶解，用封闭式薄膜过滤器（三联），全部过滤，以0.1%无菌蛋白陈水溶液作为冲洗液，当冲洗总量为300ml,冲洗1次，以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依法检查（中国药典2010年版二部附录XIH无菌检查法方法中薄膜过滤法）。3、方法学验证：按照《中国药典》2010年版二部附录XIH无菌检查法方法要求对上述方法草案进行
6、验证。3.1、菌液制备：接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌与枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至营养肉汤中，置30°C~35°C培养18小时~24小时，取此培养液lml,加入0.9%无菌氯化钠溶液9ml,10倍递增稀释至约为10-5^10-8,使菌液浓度为50~100cfu/ml的菌悬液备用。接种生砲梭菌的新鲜培养物至在50ml硫乙醇酸盐液体培养基屮，置30°C-35°C培养18小时~24小时，取此培养液lml,加入0.9%无菌氯化钠溶液9ml,10倍递增稀释至约为10-5^10-7,使菌液浓度为50^100
7、cfu/ml的菌悬液备用。接种白色念珠菌的新鲜培养物至10ml改良马丁培养基中，置23°C-28°C培养24小时~482小时，取此培养液lml,加入0.9%无菌氯化钠溶液9ml,10倍递增稀释至约为10-5^10-7,使菌液浓度为50^100cfu/ml的菌悬液备用。接种黑曲霉菌斜面新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，置23°C~28°C培养5~7天后，加入3~5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将砲子洗脫。然后，吸出抱子悬液至无菌试管内作为菌原液，取此菌原液
8、0.1ml,加入到含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%氯化钠溶液9.9ml屮，10倍递增稀释至10-5-10-7,制成每lml约含范子数50^100cfu/ml的孑包了悬液备用。3.2、菌落计数：分别取上述金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌与枯草芽孑包杆菌各lml,置90mm的无菌培养1111中，注入15~20ml营养琼脂培养基，摇匀，待凝固后，置30°C-35°C培养48小吋，菌落计数；取生孑包梭菌菌液lml,注入200ml硫乙醇酸盐液体培养基厌氧区中30°C-35°C培养18小时~24小
