槐耳浸膏实验探究及临床应用进展

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1、槐耳浸膏实验探究及临床应用进展作者：李立新叶胜龙王艳红汤钊猷【摘要】槐耳颗粒目前在临床肿瘤治疗中运用较为广泛。全文对槐耳的菌质制备、化学研究、作用机制、药理及毒理研究、临床应用等方面作一综述，旨在为槐耳的进一步研究提供帮助。【关键词】槐耳浸膏实验研究临床应用槐耳是我国民间重要的药用真菌。其学名为trametesrobiniophilamurr,中药名为槐栓菌［1］。它是生长在槐及洋槐、青檀等树干上的高等真菌子实体。按Ainsworth等1973年真菌分类系统，属于真菌门Eumycota,担子菌亚门Bisidiomycotin

2、a,层菌纲Hymenomycetes,非褶菌目Aphyllophoral.es,多孔菌科Polyporaceae,栓菌属Trametes［2］。现代不少文献误认为它是槐树上的黑木耳，以致对其认识较为混乱。经考证：槐耳的入药史最早可追溯到公元3世纪（1600年前）葛洪的《肘后方》到明朝的《本草纲目》等有关草本均有记载。其别名有“槐菌”、'‘槐蛾”、“槐鸡”、“槐鹅”等。现已确证槐耳就是槐栓菌［2］。它味苦辛，性平无毒，有“治风”、"破血”、“益力”的功效［3］。1槐耳菌质的制备由于槐耳的生长条件要求严格，生长周期很长，生物效应

3、较低，难以满足药用需要。目前已采用固体发酵工艺来生产槐耳菌质，即药用真菌在农副产品组成的固体营养基质上生长，分解基质，吸取营养，生长菌体供药用。在0〜100天的发酵过程中，随着发酵时间的延长，基质转化为菌质，产品中多糖含量迅速下降，蛋白质含量逐步上升。当发酵周期达45天左右时，多糖与蛋白质含量渐趋稳定，这时期菌质中提取成分的抑瘤率最高，也是菌质中槐耳菌丝体由营养生长转向生殖生长的阶段。现已知道多糖蛋白（PS-T）是槐耳菌质的重要有效成分，因此测定多糖与蛋白质的含量可作为发酵质量的监控指标和判定菌质的发酵终点，也是药品的重要质

4、量标准［4］。近来也有作者改用双向发酵工程来生产菌质。即由以往仅用富含碳、氮等营养的农副产品作为营养基质，改为采用具有一定活性成分的中药材作为药性基质，它既能提供真菌成长所需的营养，又因真菌的酶而被改变组织成分，从而产生新的性味功能。实验证实：由黄英作为基质发酵槐耳菌而产生的菌质，其药效明显超过槐耳菌质［5］。2槐耳的基础研究2.1化学研究槐耳菌质得精致槐耳多糖蛋白，简称PS-To经小鼠肉瘤S180抑瘤试验，抑瘤率达40%~47%,说明PS-T具有抗癌活性，是槐耳菌质和槐耳清膏的有效作用部位［6］。槐耳多糖蛋白是一种棕褐色粉

5、末，没有明显的熔点，在28CTC时变黑，易溶于热水，稍溶于低浓度乙醇，不溶于高浓度乙醇、丙酮、乙瞇、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂。其水溶液透明呈黏稠状，pH值为5.5,无旋光性［7］。经高效液相色谱和电泳分析表明其主成分基本为均一多糖，并由光谱和气相层析方法证明槐耳多糖为一蛋白结合杂多糖，其具体组成为：6种单糖（含量为41.53%）和18种氨基酸（含量为12.93%）O该多糖蛋白的分子量为30000,其多糖分子糖昔键构型主要为B型［7~10］。2.2作用机制2.2.1促进巨噬细胞功能槐耳多糖蛋白（PS-T）能激活巨噬细胞，增强

6、巨噬细胞的吞噬功能，使之直接杀伤肿瘤细胞并处理、递呈肿瘤抗原,进而激活T细胞产生抗肿瘤效应。巨噬细胞还可释放TNF-a、IL-1、IFN-a等细胞因子来调节抗肿瘤效应。经槐耳多糖蛋白作用后的小鼠，其血清中溶菌酶活性也明显增加［11］。2.2.2诱导细胞因子槐耳多糖蛋白能明显诱生a、Y干扰素，对«干扰素促进NK细胞活性有协同作用，后者又可产生IFN-V.IL-2等。IL-2可刺激T、B淋巴细胞增殖活化。活化的巨噬细胞也可产生IFN-a、ILT、CSF等细胞因子。在这些细胞因子的协同作用下增强T细胞、巨噬细胞、NK细胞等对肿瘤细

7、胞的杀伤能力［6,11］。2.2.3促进细胞免疫功能槐耳多糖蛋白对脐血EaRF（活性花环）及GVHR（移植物抗宿主反应）有增强作用。另外在干扰素尤其是IFN-Y的协同作用下可使NK细胞活性增强，提高CTL对肿瘤的杀伤作用［6］。陈慎宝等［11］用槐耳多糖给小鼠腹腔注射，10天后取血测定淋巴细胞转化率均高于生理盐水对照组。陆鹏等［12］应用二乙基亚硝胺制备大鼠肝癌模型，同时给大鼠灌服槐耳浸膏，20周后取肝用免疫组化检测IL-2R阳性细胞，证明槐耳浸膏能增加肝内IL-2R阳性细胞数，从而增强体内细胞免疫功能。2.2.4提高体液免

8、疫作用陈慎宝等［11］通过动物实验表明槐耳多糖蛋白可明显提高机体产生抗体的水平。在特异性抗体的作用下，可增加吞噬细胞的调理吞噬作用及发挥ADCC作用，进而杀伤、吞噬或溶解肿瘤细胞。2.2.5抑制肿瘤血管生成陈大兴等［13］用不同浓度的槐耳浸膏作用于人胎脐静脉血管内皮细胞，观察其对细胞的增殖