急性白血病免疫分型的临床应用

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1、急性白血病免疫分型的临床应用急性白血病免疫分型的临床应用［摘要］目的研究急性白血病细胞抗原表达特点及临床意义。方法选用12种单克隆抗体，用流式细胞仪对71例临床诊断为急性白血病患者进行免疫分型。结果急性髓性白血病(AML)患者绝大部分表达两种以上的髓系抗原，其中部分表达淋系抗原(CD7)o急性淋巴细胞白血病(ALL)患者均表达淋系抗原，并且将ALL分为T-ALL和B-ALL,两系抗原互不交叉表达，部分表达一种或两种髓系抗原。单核细胞白血病M5种，M5aCD14表达平均值为21.01%,M5bCD14表达平均值为62.61%。4例由慢粒急变为ALL患者均表达髓系

2、抗原。在AML中，CD34表达阳性率为55.2%(21/38),在ALL中表达阳性率为35.7%(10/28)o结论在AML中，免疫分型是对传统的形态学分型较有价值的补充，在对混合性白血病的诊断中有确诊的价值，在表示ALL的分型中的价值优于传统的形态学分型。关键词：流式细胞仪急性白血病免疫分型中图分类号:R557文献标示码:B文章编号:1005-0019(2008)4-0006-03传统的白血病分型都是以形态学为基础的，随着免疫学及流式细胞术的进展，对急性白血病患者的进行免疫分型可以识别白血病细胞的来源以及细胞所处的阶段。这些对于临床对白血病的诊断和预后的判断

3、都有一定的价值。，而且对丁•形态学是一种完善和补充。1材料和方法1.1标本来源为我院2004年1月〜2006年6月住院病人71例，其中成人41例(男26例,女20例)，儿童25例(男15例,女10例)。所有急性白血病患者均符合FAB分类。其中AML为38例（Ml6例、M2a11例、M35例、M44例、M5a5例、M5b3例、M64例），慢粒急淋变4例，混合性白血病1例，ALL28例，除慢粒急淋变5例患者外，均为初诊患者，所有病例均取EDTA-K2抗凝骨髓0.5mlo1.2试剂及方法仪器：流式细胞仪，FACSCalibur,Becton-Dickinson公司，

4、美国。试剂：所用单抗为IgGKCD5、CD7、CD13、CD14、CD15、CD41、CD61（异硫氧荧光素（FITC）标记），IgG2a>CD10、CD19、CD33、CD34、HLA-DR（藻红蛋白（PE）标记），CD45（PER-CP标记），溶血素，以上试剂购于么美国BD公司，Ph7.4PBS缓冲液自备。方法：①将标木用300目尼龙网过滤，取滤液，调细胞数为106/ml；②取20ul单抗+100ul标本,20°C,20min；③加溶血素100ul,20°C,15min；④加去离了水lml,20°C,lOmin；⑤上机检测。收集与分析:采用Cellques

5、t软件进行收集，每次获取20000个细胞，收集前用荧光微球进行校准,分析采用CD45与SSC设门方法进行分析。判断标准：CD34〉20%为阳性，其他标志物>30%为阳性。1.3统计学处理采用p检验。2结果2.1所有患者的免疫表型见表139例患者形态学诊断为AML,通过免疫分型检测，发现1例诊断为M4c的患者其T系、巨核系、及髓系均有表达，并但伴有CD14升高，因此诊断为混合性白血病。在其它38例AML中，有5例表达淋系抗原CD7。28例细胞学诊断为ALL的患者，通过免疫分型检测，分为T-ALL（9例）和B-ALL（18例）及T、B混合性ALL（1例）。除1例T

6、、B混合ALL外，其它T-ALL表达T系抗原而不表达B系抗原，B-ALL表达B系抗原而不表达T系抗原。9例T-ALL中，有4例表达髓系抗原，其屮2例表达两种髓系抗原，18例B-ALL屮，有4例表达一种髓系抗原，其中两例为CD13,两例为CD33O这8例髓系抗原表达的阳性率均在40%以下，而1例T、B混合性ALL表达CD33高达87.26%。4例慢粒急淋变的患者，其CD13、CD33均表达，追溯以前病史，发现其在慢粒缓慢期时，4例患者的CD13,CD33均高表达。急淋变后，其表达率较缓慢期大为减低。2.2M5a与M5b患者CD14表达率比较见表28例M5的患者中

7、，5例为M5a,3例为M5b,其CD14的平均表达率分别为25.01%和62.61%3讨论在38例AML中,CD33表达阳性例数为36例,阳性率为94.7%,CD15表达阳性例数为26例,阳性率为68.4%,CD13表达阳性例数为32例，阳性率为84.2%,可以看出对于AML的诊断的阳性率为CD33>CD13>CD15,而且在所有AML中均表达21中髓系抗原，其中36例AML表达两种或两种以上的髓系抗原，占总数的94.7%,3例表达一种髓系抗原，占总数的5.3%o5例表达淋系抗原CD7,占13.1%,低于PoteaEl］等的报道。据研究表明，CD7抗原与髓系有

8、10%的交叉反应。因此，髓系抗原CD1