图书馆室内空间布局探究论文

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1、图书馆室内空间布局探究论文［摘要］口的：在外源抗原表位表达载体系统屮构建并表达乙型肝炎病毒(HBV)抗原表位，并对其诊断敏感性进行评价。方法：人工合成编码HBV“a”抗原决定簇表位中24个氨基酸(S124147)的寡核苛酸序列，克隆入外源抗原表位表达载休系统FHVRNA213位点，构建重组质粒，在原核pET系统(BL21细胞)中表达。通过ELISA和Westernblot检测表达产物的抗原性，并以表达产物为包被抗原，通过ELISA和Westernblot检测58份乙肝患者血清抗HBso结果:嵌和蛋白可与抗HBs

2、特异性结合，其ELISA检测抗HBs阳性率为77.5%,Westernblot的为68%,而对照试剂盒的为62%O结论：在外源抗原表位表达系统屮表达的HBV重组抗原表位具有良好的抗原性，有诊断应用价值。［关键词］HBV;抗原表位;抗原性;FHVRNA2载体系统StudyonAntigenicityofHBVRecombinantEpitopeAbstractObjectiveConstructionandExpressionHBVrecombinantepitopeinaforeignepitopepresen

3、tingvector,andevalutionofdignosticsensitivityforantiHBswithHBVepitope・MethodsOligonucleotidsencodedtwentyfouraminoacids(aaS124147)whichiswithin”a”antigenicdeterninantweresynthesizedandinsertedintoaforeignepitopepresentingcarTierI3site(FHVRNA2cDNA13).IIBVepit

4、opewasexpressedinaprokaryoticcellularsystem(BL21cell).TheexpressionproductwasanalyzedanditsantigenicitywasfurtherstudiedbyELISAandWsternblotmethodwithchimericproteinascoatingantigen.weusedchimericproteinascoatingantigentotestantiHBswithELISAandWsternblotin58

5、seralsamples・ResultsThechimericproteinreactedwithantiHBsseraispecially.ThedetectionpositiveratioofantiHEsis77・5%and68%respectivelybyELISAandWsternblotwithchimericproteinascoatingantigen,thecontrol'，，，swas62%・ConclusionHBVepitopeexpressedinaforeignepitopepres

6、entingcarrierpossessedgoodantigenicityanddiagnosticvalue・Keywords:HBV；Epitope；Antigenicity；FHVRNA2carriersystem乙型肝炎病毒(HBV)是乙型肝炎的病原体，并引起慢性肝炎和肝硬化，而且与肝癌的发生密切相关。迄今，对HBV感染最有力的预防和控制措施，仍是发展疫苗。FHVRNA2载体系统［1］是一个以昆虫小RNA病毒flockhousevirus外壳蛋白为载体的新型抗原表位表达载体，此系统中表达的载体蛋白可自

7、动组装成病毒样颗粒，使插入的外源抗原表位可以暴露在颗粒的表面，保持天然构象和免疫学特性。本研究拟将HBVa抗原表位插入到FHV外壳蛋白上，并对其抗原性及诊断意义进行了研究。1材料与方法1.1细胞重组质粒DNA大肠杆菌DH5ci用于重组质粒pETEDNA的克隆和扩增。大肠杆菌BL2KDE3）用于重组质粒pETEDNA的表达。质粒DNA在含200ug/ml氨节青霉素的LB或TB培育中生长,FHVRNA2载体系统即重组pETFHV构建见［llo1.2HBV抗原表位及重组pETE的构建和表达1.2.1HBV抗原表位及重

8、组pETE的构建人工合成HBV特异抗原表位E（氨基酸序列：124CTTPAQGNSMFPSCCCTKPTDGNC147）寡核昔酸序列：正向5'GATGCACGACTCCTGCTCAAGGCAACTCTATGTTTCCCTCATGTTGCTGTACAAAACCTACGGATGGAAATTGC3'；反向3'CTACGTGCTGAGGACGAGTTCCGTTGAGATACAAAGGGAGTA