[精品][经典]人白介素24基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

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1、［经典］人白介素24基因重组腺病毒载体的构建与鉴定人白介素24基因重组腺病毒载体的构建与鉴定【摘耍】目的构建含有人白介素24(hIL-24)基因的重组腺病毒载体，为下一步病理性瘢痕的基因治疗研究奠立实验基础。方法采用基因工程技术将hIL-24基因的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,鉴定正确后在PAdEasy系统中进行细菌内同源重组,通过脂质体将正确重组体包裹并转染293A细胞以包装并扩增病毒。采用酶切及PCR方法对重组腺病毒进行鉴定。结果酶切和PCR结果证实hIL-24基因重组腺病毒载体构建成功并可在293A细胞中表达

2、，病毒滴度达107pfu/mlo结论成功构建了有较强感染能力的含hIL-24基因的重组腺病毒载体。【关键词】hIL-24；腺病毒；病理性瘢痕TheconstructionandIdentificationofRecombinantAdenovirusVectorofhIL-24LIANGJie,HEHai~tianPENGZhi,etal.DepartmentofPlasticSurgery,AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege,Zhanjiang524001,GuangdongProv

3、inceChina[Abstract]ObjectiveToconstructandidentifytherecombinantadenovirusvectorofhumanIL-24geneforfuturegenetherapyofpathologicalscartissue・MethodsThehuma.nIL~24genefragmentwasclonedintotheshuttleplasmidpAdTrack-CMVtoformthetransfervectorbythemethodofhomogenousrecombina

4、tioninbacteriaofPAdEasysystem・Thentherightrecombinantadenoviruswastransfectedinto293AcellsusingLipofectine2000.Therecombinantadenovirusvectorwasidentifiedbyrestrictionenzymedigestionandpolymerasechainreaction(PCR)・ResultsRestriction［经典］人白介素24基因重组腺病毒载体的构建与鉴定人白介素24基因重组腺病毒载

5、体的构建与鉴定【摘耍】目的构建含有人白介素24(hIL-24)基因的重组腺病毒载体，为下一步病理性瘢痕的基因治疗研究奠立实验基础。方法采用基因工程技术将hIL-24基因的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,鉴定正确后在PAdEasy系统中进行细菌内同源重组,通过脂质体将正确重组体包裹并转染293A细胞以包装并扩增病毒。采用酶切及PCR方法对重组腺病毒进行鉴定。结果酶切和PCR结果证实hIL-24基因重组腺病毒载体构建成功并可在293A细胞中表达，病毒滴度达107pfu/mlo结论成功构建了有较强感染能力的含hIL-24基

6、因的重组腺病毒载体。【关键词】hIL-24；腺病毒；病理性瘢痕TheconstructionandIdentificationofRecombinantAdenovirusVectorofhIL-24LIANGJie,HEHai~tianPENGZhi,etal.DepartmentofPlasticSurgery,AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege,Zhanjiang524001,GuangdongProvinceChina[Abstract]ObjectiveToconstruct

7、andidentifytherecombinantadenovirusvectorofhumanIL-24geneforfuturegenetherapyofpathologicalscartissue・MethodsThehuma.nIL~24genefragmentwasclonedintotheshuttleplasmidpAdTrack-CMVtoformthetransfervectorbythemethodofhomogenousrecombinationinbacteriaofPAdEasysystem・Thentheri

8、ghtrecombinantadenoviruswastransfectedinto293AcellsusingLipofectine2000.Therecombinantadenovirusvectorw