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1、运脾方对小鼠淋巴细胞转化作用探究摘要:目的:研究儿童厌食症的有效治疗方药运脾方不同剂量对正常小鼠淋巴细胞转化作用的影响,探讨运脾方增强免疫功能的作用机理。方法:选取60只正常小鼠,分为正常组、模型组、阳性对照组(消食健儿糖浆组)、运脾方大、中、小剂量组,测定小鼠PHA刺激淋巴细胞转化率。结果:运脾方大、中、小剂量组小鼠PHA刺激淋巴细胞转化率与正常组比较有显著或极显著增强。结论:运脾方对小鼠的免疫功能有上调作用。关键词:运脾方;儿童;厌食症;小鼠;淋巴细胞转化;动物实验❷中图分类号:R2-03文献标识码:A文章编号:1673-7717(2010)04-0739-02Study
2、onEffectofYun~PiPrescriptioninDifferentDoseontheBlastisationofLymphocyteinMiceZHANGCui,SUNYuan❷ling,ZHOUWei,YANGZhen(ShanghaiChildren^sMedicalCenteraffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200127,China)Abstract:令0bjective:❷ToobservetheeffectofYun-PiPrescriptiononregula
3、tingtheimmunefunction,andtoexplorethemechanismofYun-PiPrescriptioninenhancingimmunefunction.Methods:60normalmiceweredividedintogroups:thenormalgroup,themodelgroup,thepositivecontrolgroup(treatedwithXiaoShiJianErSyrup),andYun-PiPrescriptiontreatmentgroupincludinghigh,middleandlowdose・observe
4、thelymphocyteconversionratioofthesemiceafterPHAirritation.ResuIts:Thehigh,middleandlowdoseofYun-PiPrescriptioncanobviouslyelevatelymphocyteconversionratioofthemiceafterPHAirritation.Conclusion:Yun-PiPrescriptionhasanup-regulationeffectonimmunefunction.省略。通讯作者:孙远岭(1957-),男,教授,博士研究生导师,博士,研究方向
5、:中西医结合对儿童营养性疾病的研究。Tel:021❷38626161-6388。运脾方是导师孙远岭教授治疗儿童厌食症的有效验方,主要由黄英、当归、苍术、白术、浮小麦等药组成,具有益气健中、运脾和胃之功效。临床应用治疗儿童厌食症、儿童反复呼吸道感染等,能显著提高患儿食量,增进食欲,增强免疫力,减少呼吸道感染次数及天数,减轻感染程度。本研究通过测定正常小鼠灌胃后PHA刺激淋巴细胞转化率,探讨运脾方提高机体免疫功能的机理,为其临床应用提供理论依据。1材料1.1动物❷KM小鼠,雄性,体重(22土2)g,SPF级,由中科院上海实验动物中心提供,检疫后备用。1.2药物❷受试药物:运脾方按
6、国家药典规定加工为糖浆制剂,由本院制剂室提供。临床日服剂量按1mL/kg计,设大、中、小3个剂量组,相当于临床日用量的20、10、5倍。❷阳性对照药物:消食健儿糖浆,由四川豪运药业股份有限公司生产。临床日服剂量按1mL/kg计,试验时给药剂量为20mL/kg(相当于临床日服剂量的20倍)o1.3试剂❷PHA溶液:将广东红花云豆(PhaseolusVulgaris)研磨成粉末,取10g粉末加生理盐水lOOmL,放置49冰箱浸泡48h,每隔4h稍加搅拌。取出后用滤纸过滤或在离心(2500r/min)30min。取滤液或上清液加生理盐水补足至lOOmL,继而经细菌滤过滤,无菌分装小
7、瓶,冰冻保存。临用前加10倍生理盐水配成1%浓度,并进行效力测定,实验按每毫升培养液加入50U/mL的PHAO.ImLo令小牛血清:未进食的新生小公牛,以无菌手续从颈动脉放血分离血清,分装后,56工30min灭活,无菌试验阴性,冰冻保存长期备用。❷肝素:取粉末状肝素用HanK's(PH7.4)配成126U/mL,8磅lOmin灭菌,41冰箱中保存,用时按ImL血液加入0.ImL肝素。❷0.5%水解酪蛋白HanK's溶液:配制后15磅高压灭菌15mino临用前加最终浓度为20%无菌小牛血清,并加青霉素(1