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1、运脾方对小鼠血清溶血素抗体生成作用的影响论文.freelL/kg运脾方糖浆制剂,连续给药7d。第7日给每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞(CRBC)混悬液0.2mL进行免疫,连续7d。检测血清溶血光密度值。结果运脾方大、中、小剂量组分别与正常对照组比较,小鼠的血清溶血光密度值明显增加(P<0.001)。结论运脾方提高免疫功能的作用机理与增加血清溶血素抗体水平密切相关。【关键词】运脾方;血清溶血素抗体;小鼠Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofYun-PiPrescriptiononhemolys
2、inantibody,andapproachitsmechanismofregulatingimmunefunction.MethodsForty-eightKMmicelydividedintohigh,mediumandloL/kgYun-PiPrescriptionrespectively,andonecontrolgrouptheseventhday,allgroupshemolyticopticaldensityeasuredinallgroups.ResultsparedhemolyticopticaldensityinYu
3、n-PiPrescriptiongroupsincreasedsignificantly(P<0.001).ConclusionYun-PiPrescriptionremarkablyenhancedimmunefunction,icelevelsofserumhemolysinantibody.Keyhemolysinantibody;mice运脾方是孙远岭教授治疗儿童厌食症、反复呼吸道感染复感儿的有效验方,能显著增强食欲,提高患儿进食量,同时可以减少患儿呼吸道感染的次数,缩短呼吸道感染的持续时间。本研究通过观察运脾方对小鼠溶血素抗体
4、生成作用的影响,探讨其增强免疫功能的作用机理。1实验材料1.1动物健康KM小鼠48只,雄性,体重(22±2)g,SPF级,动物质量合格证号:SCXK(沪)2002-2003,上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供,检疫后备用。1.2药物及试剂运脾方由黄芪10g、苍术10g、白术10g、当归10g、煅龙骨15g、焦山楂15g、炒麦芽15g等组成,饮片购自上海市药材公司,由本院制剂室按国家药典规定加工成糖浆制剂,批号:沪卫药剂S(98)-001-(新华)。5%鸡红细胞生理盐水悬液,自行配置。补体(豚鼠血清)冻干,0.3g/支,购于中国药品生物
5、制品检定所。1.3主要仪器分光光度计LG721,山东高密电子仪器厂;离心机,IECCentraCL2;37℃恒温箱,NAPCO5410。2实验方法2.1分组及给药随机分成正常对照组及运脾方大、中、小剂量组,每组12只。正常组灌服蒸馏水,运脾方大、中、小剂量组灌服运脾方糖浆制剂(大、中、小剂量组分别灌服20、10、5mL/kg),连续给药7d。第7日给每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞混悬液0.2mL进行免疫,连续7d。2.2标本采集末次给药后40min,摘取眼球取血,3000r/min离心5min。2.3血清溶血光密度值测定血清用生理盐水稀释
6、100倍,取稀释血清1mL于0.5mL5%鸡红细胞悬液和0.5mL10%补体(豚鼠血清)混合,在37℃恒温箱中保温30min后,置0℃冰箱30min中止反应。离心,取上清液,于分光光度计540nm处比色,测光密度值。另设生理盐水做空白对照,取其上清作为比色时调零。计算各组小鼠溶血光密度值。3统计学方法数据用x±s表示,采用方差分析,用SPSS11.5进行统计分析。4结果(见表1)表1运脾方对小鼠血清溶血素抗体生成的影响(略)注:与正常对照组比较,***P<0.0015讨论现代研究显示,中医“脾”的概念不仅职司消化吸收,且与机体免疫功能密
7、切相关。中医学的“脾”容涵着免疫学的内容。脾虚证与免疫器官、非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫、细胞因子、分子免疫以及免疫遗传学等方面异常改变均有极为显著的相关性1。《脾胃论》曰:“脾胃虚则肺最受病。”脾与肺是母子关系,而卫气根源于下焦,滋养于中焦,卫气强弱直接受中焦脾胃的影响。脾气旺盛,运化有力,气血充足上盈于肺,卫气发挥其充皮肤、实腠理、司开合的作用,邪不得入。脾胃虚弱,肺卫失养,肺卫不足,营阴不能内守则多汗,腠理疏松,卫外失固,稍有风寒、风热即侵入机体,表现为反复外感。运脾方由黄芪、白术、煅龙骨、炒麦芽等中药组成,具有健脾益气、培土
8、生金之功效,用于治疗儿童厌食症、反复呼吸道感染效果显著2-3。鸡红细胞对鼠类是一种较强的抗原性异物,当其被注入小鼠腹腔后其淋巴细胞便产生相应的抗体——溶血素,并释放至外周血。分离致敏动物的血清,与鸡红细胞一