食品微生物快速及自动化检测方法进展探究

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1、食品微生物快速及自动化检测方法进展探

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3、“民以食为天”，食品安全问题一直是人们所关注的热点问题。在日常生活中，我们经常会面对化学物质的污染及食源性致病菌的威胁，根据世界卫生组织的估计，全球每年有数十亿人感染食源性疾病。发达国家（包括美国）发生食源性疾病的概率也相当高，平均每年有1/3的人群感染「苏丹红”、

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5、“三聚氧胺”等化学污染物固然可怕，可食品安全的头号问题却是曲致病微生物引起的食源性疾病”。于2009年6月1日正式实施的《中华人民共和国食品安全法》是我们国家保证食品安全、保障公众身体健康和生命l=l安全的法律基础。《食品安全法》对食品安全的各个环节

6、包括食品安全标准，食品生产经营及食品□验等都有了明确的规定，在此基础上各个部门都围绕食品颁布了相关细则，其中近期由国家质□总局颁布的《企业生产乳制品许可条件审查细则》（2010版）及《企业生产婴幼儿配方乳粉许可条件审查细则》（2010版）引起了广泛的关注，此审查细则中明确规定了乳制品生产企业必须自□的项目，尤其是微生物□验项目。食品中微生物□测项目主要包括：食源性致病菌□测、卫生指标菌的计数及针对特殊产品（如UHT（超高温消毒奶））进行的商业无菌□测等。相对理化□测而言，微生物□测具有耗时长（我们要□测的目标微生物通常以数量极低的状态存在，为达到□测限度需要

7、长时间的增菌过程）、□测过程复杂（食品种类总多，菌群组成不同，杂菌影响目标菌□测，且需要鉴定是否是我们要□测的目标菌），方法传统、自动化程度低等特点。近年来，针对上述特点，国内外关于微生物快速,自动化□测的研究突飞猛进，相关的产品层出不穷，在=1此,本文对食品微生物快速自动化□测方法研究进展情况做简单概述。食源性致病菌□测目前□测比较常见的食源性致病菌主要包括沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌0157:H7、单增李斯特菌等,针对这些致病菌的□测以样品中是否有该致病菌存在来定性表示，如果有的话，还需要做进一步的鉴定及分型试验。对于食源性致病菌□测，目前常见的方

8、法有：国标规定的传统平板□测法、稳定的免疫学□测方法及现代分子生物学□测方法等。结合这些□测方法，国内外不断涌现各种新型食源性致病菌□测产品，其特点倾向于快速，准确及自动的时间进行定性□测，而采用新的选择性增菌技术如美国以沙门氏□测为例，传统国标□测方法需要4天左右GDS的Pickpen免疫磁珠分离技术結合PCR-Rotor-Gene分子生物□测技术，可以在1天的时间内完成对沙门氏菌的定性□测。法国生物梅里埃的VIDAS系统是依托免疫学方法研制的致病菌□测系统，特点为□测稳定，自动化程度高，该系统也是致病菌□测中的常用方法。金标□测条同样也采用了抗原抗体免疫

9、□测的原理，近年来的技术发展已经克服了□测结果不稳定等缺点，如美国SDI及杜邦快力康的金标□测条，采用了最先进的噬菌体技术，将噬菌体做成抗体来□测指标菌抗原，具有□测快，结果灵敏度特异性高、不需仪器等特点，适用于紧急条件下的快速口测。同时，由于很多□测机构都配备有酶标仪，因此96孔板□测方法以其结果稳定，处理通量大等特点被大量应用。此外，最近国外出现了一种新的超快速食源性病原□测技术，它结合了生物芯片，分子生物学，微射流和微电子技术,可在一张芯片上□测18种食源性病原，包括常见食源性指标菌及诺如病毒，轮状病毒等常见病毒，相信在不久的将来该技术可以大量应用。对

10、于致病菌□测而言，当其定性□测的结果呈阳性时,需要对其进行鉴定试验，法国梅里埃的微生物生化鉴定试剂条API和全自动微生物生化鉴定系统Vitek2Compact是微生物鉴定的拳头产品另外美国BD公司的Crystal和凤凰100也都是依据伯杰氏手册原理研制而成的微生物生化鉴定系统。美国Biolog微生物生化鉴定系统采用碳源同化反应原理,也可用于微生物鉴定工作。卫生指标菌□测食品中常见的卫生指标菌虽然不会引起食品风险，却能

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14、够很好地反映出食品的清洁度，随着我们食品工业的发展,对于快速、准确，直接的指标菌计数方法的需求日益迫切。法国梅里埃的Tempo全自动

15、微生物定量分析系统，采用MPN方法，可以自动对菌落总数等进行分析，但在分析时间及单次分析成本上需要改进；法国AES公司的全自动化系统可很好地满足对牛奶、发酵奶制品和果汁等的□测需求，并且该技术可逐个□测样品中的活细胞，几分钟内就可以得到定量的□测结果。另外美国BioContrel公司的Simplate在国外也常用卫生指标菌□测，该技术采用改良MPN技术，将传统的MPN方法中的9管换成84孔□测板，并利用特制显色培养基使阳性孔呈现出特殊颜色，定量地□测常规微生物。当然，对于卫生指标菌的定量□测不可不提美国3M公司，其Petrifilm产品已在我国使用近10年，

16、最近很多公司都有类似产品出现，尤其日本公司居多。从产