耐盐产酯酵母的筛选鉴定及其特性-广东轻工职业技术学院

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1、耐盐产酯酵母的筛选、鉴定及其特性黄桂凤,童辉绍,苏诗琪,施俊博,唐敬军,叶志林,蒋敏华,马小雯,(广东轻工职业技术学院,广州,510300)摘要:为了提升高盐发酵酱类产品的风味,从自然发酵的辣椒酱中筛选高产酯的菌种。通过发酵筛选和产物分析,获得1株乙酸乙酯高产菌种DZ・3。经过形态特征、生理生化特征和18SrDNA分子生物学分析,菌种DZ-3被鉴定为皮状丝抱酵母。通过氮源和发酵条件的优选试验,确定菌种DZ-3最佳氮源是酵母膏,最佳的摇瓶发酵条件为:温度28初始pH6.0和转速200rpm,乙酸乙酯的最高产暈达3.84g/L。以含有0〜180g/L氯化钠的培养基屮进行耐盐性试验,菌种DZ-3

2、表现出较强的耐盐性。关键词:产酯酵母;耐盐;筛选;鉴定;特性Screening,IdentificationandCharacterizationofaSalt-tolerantandEster-producingYeastHUANGGui-fcng,YEZhi-lin,MAXiao-wcn,SUShi-qi,JIANGMin-hua,TANGJing-jun,SHIJun-bo,TONGHui-shao,CHENWei-xin,LIJing,DENGMao-cheng(GuangdongIndustryTechnicalCollege,Guangzhou510300)Abstract:I

3、nordertoupgradetheflavorofhigh-saltfermentationpasteproducts,highester-producingandsalt-tolerantstrainswerescreenedfromnaturalfermentationchilisauce・ThestrainDZ-3withthehighestester-producingcapabilitywasobtainedbyfermentationscreeningandproductanalysis.DZ-3wasidentifiedasTrichosporoncutaneumbyusi

4、ngthemorphologicalcharacteristics,physiologicalandbiochemicalcharacteristicsand18SrDNAsequencesanalysis.Bymeansofoptimizationtests,theoptimalnitrogenresourceforstrainDZ-3wasyeastextractandthebestfermentationconditionsforethylacctatc-producingweredetenninedastemperatureof28°C,initialpHof6.0androtat

5、ionspeedof200rpm.Thehighestyieldofethylacetatereached3.84g/Lwiththeoptimalcondition.Seriesofsalttolerancetestswereperformedinamediumcontaining0〜180g/LsodiumchlorideandstrainDZ-3showedgoodsaltresistance.Keywords:cstcr-producingyeast;salttolerant;screen;identification;characterization引言酯类是酒类、酱类的重要香气

6、物质,这些产品中常见的酯类有甲酸丁酯、乙酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸乙酯等⑴2】。产酯微生物通常有酵母菌、霉菌和细菌,酵母菌在产酯的研究及应用中较为普遍卩句。但是,由于我国酱类发酵的盐度较高,风味品质不仅要求微生物具有较高的产酯能力,还对微生物的耐盐性有很高的要求。随着高端发酵型酱类的市场需求日益扩大,耐盐产酯微生物的研究及应用逐渐成为发酵型酱类领域的热点。为了提高发酵型酱类的风味品质,木实验主要探索耐盐产酯微生物的筛选及其基本特性。1材料与方法1.1材料与主要试剂筛选材料:自然发酵的辣椒酱;无水乙醇、乙酸、乙酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯:色谱纯,市售;其它试剂:市售。1.2富集培养与平板分离富集

7、培养基:葡萄糖50g/L,乙醇10%(v/v),酵母膏10g/L,NaCl100g/L,KH2PO42.0g/L;先将乙醇以外的组分溶于纯净水,调节pH至4.5,121°C灭菌20min,冷却至室温,然后加入无水乙醇,混匀。平板培养基:葡萄糖20g/L,酵母膏10g/L,蛋引东10g/L,琼脂20g/L,pH4.5o斜面培养基的组成同平板培养基,pH7.0o称取10g自然发酵辣椒酱,接入200mL的富集培养基,置于28°

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