选修细胞工程基础知识过关)》

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1、细胞工程（-）植物细胞工程1.理论基础（原理）：细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵〉生殖细胞〉干细胞＞体细胞;植物细胞〉动物细胞2.植物组织培养技术（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞一一愈伤组织一一试管苗一一植物体（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。（3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后•道工序。3.植物细胞培养（苏教版）（1）概念：在实验室工厂化生产的条件下，将组织培养过程中形成的愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基屮，进行悬浮培养,得到分散游离的悬浮细胞，通过继代培

2、养使细胞增殖,从而获得大量的细胞群体的一种技术。（2）与植物组织培养的关系①植物组织培养是基础。②目的不同：植物组织培养的目的是得到更多的植物体,植物细胞培养的目的是获得人类所需的细胞（3）实例：成功地培养红豆杉的细胞,从中提取出重婆的抗肿瘤药物——紫杉醇。4.植物体细胞杂交技术（1）过程：才it物细絶A植畅细胞B原生质休A©原生质体B歸郦单融体甲植物毓乙•趕皿生鹼乙蟲屈W脱叫愈伤组级再地（2）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。（-）动物细胞工程1.动物

3、细胞培养（1）杂升细胞(2)(3)概念：动物细胞培养就是从动物机体小取出相关的组级，将它分散成单个细胞,养基中,让这些细胞生长和繁殖。动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）f剪碎f川胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞f制成细胞悬液f转入培养瓶中进行竝培养一贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。细胞贴樂和接触抑制：悬液小分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数日不断增多,当贴壁细胞分裂宀长到农面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制.动物细胞培养需要满足以

4、下条件然后放在适宜的培（4）①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还耍在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养:合成培养棊成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度:适宜温度：哺乳动物多是36・5°C+0.5°C；pH：7.2〜7.4。④气体环境:95%空气+5%C02。①是细胞代谢所必需的，CO?的主要作用是维持培养液的pH。（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细

5、胞。童纽细Jife电脉冲利芨I⑥胚胎移植坊一头母年羊的于宫］-生克降绵羊•多利"①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育;②保护濒危物种，增大存活数量;2.动物组织培养（苏教版）：动物细胞培养与动物纽织培养方法类似，主要区别是动物细胞培养过程小需要川胰蛋缠等使纽织块中的细胞离散,而动物组织培养过程中不需要使用胰蛋自陵等。3.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选丿IJ去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易操作;卵（母）细胞细胞质多，营养丰富。（3）体细胞核移植的大

6、致过程是：选择供体母牛受体障牛圖期发情处璞越级排卵I洪体公年一氏嚳I冲卵质■橙査.培界f胚船移拉・I飪厳枪査I分規（胚暗繆橫的樓牛）（4）体细胞核移植技术的应用:④作为异种移植的供体;③生产珍贵的医用蛋白；⑤用于组织器官的移植等°（5）体细胞核移植技术存在的问题:克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。2.动物细胞融合（1）动物细腕融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原來两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。（2）动物细胞融合与植物原牛:质体融合的原理基木相同，诱导动物细胞融合的方法与植物

7、原半质体融合的方法类似，常用的诱导因素白聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。（3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的币;婆手段。（4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:比较项冃细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁麻诱导原牛质体触合离心、电刺激、振动，聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交的不亲和性，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，再加灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术Z—5单克隆抗体（1）抗体：一

8、个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。（2）单克隆抗体的制备过程：