细胞工程基础过关

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1、细胞工程基础过关（-）植物细胞工程1.理论基础（原理）:细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵〉生殖细胞〉干细胞＞体细胞;植物细胞〉动物细胞2.植物组织培养技术（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞一〜愈伤组织一〜试管苗一〜植物体（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。（3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。3.植物细胞培养（苏教版）（1）概念：在实验室工厂化生产的条件下，将组织培养过程中形成的愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中，进

2、行悬浮培养,得到分散游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖,从而获得大量的细胞群体的一种技术。（2）与植物组织培养的关系①植物组织培养是基础。②目的不同：植物组织培养的目的是得到更多的植物佐，植物细胞培养的目的是获得人类所需的细胞（3）实例：成功地培养红豆杉的细胞,从中提取出重要的抗肿瘤药物一一紫杉醇。4.植物体细胞杂交技术（1）过程：植物細絶A植畅细胞B杂种细胞植物观甲昱屍质体甲植物细驰乙亀甦鹼乙（2）诱导融合的方法：物理法包扌舌离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（3）意义:克服

3、了远缘杂交不亲和的障碍。（二）动物细胞工程1.动物细胞培养概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组级，将它分散成单个细胞,养基中,让这些细胞生长和繁殖。杂种植株(1)然后放在适宜的培动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）一剪碎-用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞一制成细胞悬液一转入培养瓶中进行戟培养一贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续錘培养。细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数冃不断增多,当贴壁细胞分裂生长

4、到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制°动物细胞培养需要满足以下条件(2)(3)（4）①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生窒，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养:合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度:适宜温度：哺乳动物多是36・5°C+0・5°C；pH：7・2〜7.4。④气体环境:95%空气+5%C02。@是细胞代谢所必需的，C02

5、的主要作用是维持培养液的pH,（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。2•动物组织培养（苏教版）:动物细胞培养与动物组织培养方法类似，主要区別是动物细胞培养过程中需要川胰蛋白酶等使组织块屮的细胞离散，而动物组织培养过程屮不需要使用整自蹩等。1.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易操作;卵（母）细胞细胞质多，营养丰富。（3）体细

6、胞核移植的大致过程是：雄In细jjfe供体母牛受体障牛1I岡期发悄处理罚级排卵洪体公牛质量栓査.焰將—轻胎移拉.I（4）体细胞核移植技术的应用:①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育③生产珍贵的医用蛋白；⑤用于组织器官的移植等。（5）体细胞核移植技术存在的问题:分统（胚暗够粮的辕牛）②保护濒危物种，增大存活数量；④作为异种移植的供体；奴嶽枪査克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。4.动物细胞融合（1）动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细

7、胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。（2）动物细胞融合-与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二.灭活的病毒.电刺激等。（3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传.细胞免疫.肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。（4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动，聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交的不亲和性，获得

8、杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，再加灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一5•单克隆抗体（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低.纯度低.特异性差。（2）单克隆抗体的制备过程:（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖,又能产生专一的抗体。（4）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制