鸡伤寒沙门氏菌与大肠杆菌的分离鉴定实验报告

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1、鸡伤寒沙门氏菌与大肠杆菌的分离鉴定支可跌201120322102【屮文摘要】肠埃希氏菌(E.coli)通常称为人肠杆菌，一些特殊血清型的人肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜(禽)，常引起严重腹泻和败血症，它是一种普通的原核生物，根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类：致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。大肠杆菌属于细菌。鸡伤寒(fowltyphoid)是rtl鸡沙门氏菌引起的家禽的一种败血性传染病，主要发生于鸡和火鸡。病程为急性或慢性经过。死亡率与

2、病原的毒力强弱有关。【关键词】鸡沙门氏菌大肠杆菌分离鉴定【参考文献】《动物医学进展》、《中国环境科学》、《微牛物学杂，忐》【询言】大肠杆菌是肠杆菌科中埃希氏菌种的代表种。鸡人肠杆菌病是山大肠埃希氏菌的某些血清型引起的-•类疾病的总称。近年來随着集约化养鸡的迅速发展，该病的流行FI趋严重，使患病的鸡群生长发育受阻，饲料转化率下降、死淘率及屠宰废弃率增加，种鸡及产蛋鸡的蛋品质量下降和孵化率降低，以及治疗费用的增加等等，给养鸡户造成了极人的经济损失，引起了广大养鸡者的髙度重视。随着集约化养鸡业的发展，人肠杆菌病的发病率和亡率也随之增加，严重影响了家禽牛产性能的发挥，给养禽业造成

3、了一定的经济损失。鸡伤寒沙门氏菌：沙门氏菌病是公共卫生学上具冇重要意义的人畜共患病Z—,其病原沙门氏菌属肠道细菌科，包括那些引起食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。本病除发牛于鸡和火鸡外，还可见于鸭、珍珠鸡、孔雀、鹤鹑、松鸡、雉鸡等。各种FI龄的鸡均可感染。主要发牛:于成年鸡或青年鸡，带菌鸡的粪便内含人量病菌，可污染土壤，饲料。木菌主要通过消化道和结膜炎而传播感染。症状为饲料消耗量突然下降、鸡精神萎靡、羽毛松乱头部苍口，鸡冠萎缩在感染后的2-3天内体温上升并持续到死前数小吋，四天内死亡出发本病时死亡严重。火鸡群暴发鸡伤寒吋，表现为渴欲增加、食欲不振、粕神萎顿、离群、

4、排出绿色或黄色稀粪。体温升高，可达44-45°CO据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。中国内陆地区也以沙门氏菌为首位。【正文】一、目的与要求：(1)了解大肠杆菌与沙门氏菌的形态与染色特性(2)熟悉大肠杆菌与沙门氏菌的主要培养特性(3)掌握大肠杆菌与沙门氏菌的常规检查方法二、实验材料菌种：大肠杆菌，鸡伤寒沙门氏菌，对大肠杆菌与沙门氏菌的混合菌液增菌液：亚砂酸盐亮绿增菌液，四碱酸钠增菌液普通培养基：肉汤，普通琼脂，半固体培养基鉴别培养基：SS琼脂，麦康凯琼脂，三糖铁琼脂生化培养棊：糖发酵管(葡•萄糖乳糖麦芽糖廿霧醇蔗糖)，蛋白丿冻水，衙糖糖

5、蛋白腺水，尿素琼脂，枸缘酸盐琼脂。生化试剂：MR试剂，VP试剂，眄際试剂，乙瞇，血清：大肠杆菌多价0血清革兰氏染液，显微镜，吸管等三、主要仪器：接种环，接种针，酒精灯，记号笔，注射器，针头，温箱，显微镜，高压锅，平皿，试管，锥形瓶，无菌操作台，离心机，天平，量筒，电炉，报纸，皮筋等。四、实验步骤：1,培养：分离培养：将混合菌液用常规划线方法接种麦康凯琼脂平板和SS琼脂平板上，置37°C恒温箱内培养24h。增菌培养：用无菌5ml吸管吸取混合菌液lml,加入增菌液屮10ml,接种后轻轻摇匀，置37°c恒温箱内培养24h。纯培养：从经过24h培养的麦康凯琼脂平板和SS琼脂平板上

6、，分别选出不同细菌的单个菌落，无菌接种环轻挑少许，移植至营养琼脂。置37°c恒温箱内培养24h。2,观察镜检：生化实验前，对其纯度检测。将以上单个菌落，在载玻片上涂片，自然干燥后，火焰固定，进行革兰氏染色法，镜检。凡杂菌污染者，不可用。3,生化实验：(1)糖发酵实验：培养物分别接种葡萄糖，麦芽糖，乳糖，甘露醇，蔗糖的半固体培养基。置37°c恒温箱内培养24h。若培养基变为黃色，表示该菌发酵此糖产酸“+”表示。若培养基变黃并含气泡，则为产酸产气用“O+”表示，，若培养基不变色，则表示该菌不发酵此糖表示。(2)MR实验:取每种培养物接种一管,置37°c恒温箱内培养24h。取出

7、后加甲基红试剂。若液体成红色则为阳性“+”，成黄色为阴性“-”(3)VP实验：取每种培养物接种一管，置37°c恒温箱内培养24h。取出后先加VP试剂甲液600ml再加VP试剂乙液200ml充分摇匀，若数分钟内出现液体成红色则为阳性“+”，不出现则继续观察lh不变色为阴性(4)口引喙实验：取每种培养物接种一管，置37°c恒温箱内培养24h。取出后,沿壁先后加入网味试剂和二甲苯2-3滴红色着为阳性。不变色者为阴性。(1)枸缘酸盐实验：取每种培养物接种一管，置37。c恒温箱内培养24h。取出后观察是否冇细菌生长，和其颜色变化，若冇细