维生素国际标准检测方法探究

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1、维生素国际标准检测方法探究摘要：文章以维生素为研究对象，从微生物法以及仪器法（HPLC高效液相色谱法、LC-MS-MS液质联用法）入手,绕当前技术条件支持下整个国际范围内维生素检测现状及标准检测方法这一中心进行了分析与阐述，并据此论证了做好维生素检测工作在进一步推动各种生物生长发育及新陈代谢有序进行的过程中所起到的作用。关键词：维生素；维生素检测；标准检测方法；微生物法；高效液相色谱法；叶酸；液质联用法中图分类号：TS207文献标识码：A文章编号：1009-2374(2012)14-0034-02在现代市场经济发展规律作用之下，各类

2、型食品添加剂的使用剂量如同药品一样需要在产品原配料一栏予以详细说明。诸如婴幼儿配方食品、果汁饮料以及谷类产品等通过添加食品添加剂会大大提升其营养成分。在这一过程当中我们不得不关注到这样一个问题：食品当中所添加的维生素物质应当有所控制吗？应当如何控制呢？在现代科学技术及生物研究开发技术日新月异、蓬勃发展的作用之下，食品在添加维生素物质之前就应当进行系统且科学的检测。我国针对这一问题也有一套详细且规范的标准中所涉及到的维生素检测方法可以分为微生物法以及高效液相色谱法这两类，国际标准检测方法也不外乎如此。然而，相关工作人员需要清醒的认识到

3、：传统意义上的微生物检测方法存在步骤繁琐、操作耗时以及检测周期长等诸多问题，再加之部分检测环节受外部干扰因素的影响较大，响应灵敏度不够高，始终无法确保维生素检测结果的真实性与精确性。有关维生素快速分析方法的研究成为了当前技术条件支持下相关工作人员最亟待解决的问题之一。那么，现阶段维生素的检测现状及国际标准检测方法可分为哪几类呢？笔者现结合实践工作经验，就这一问题谈谈自己的看法与体会。1微生物法检测维生素分析微生物法一直以来都是依照维生素为细菌生长的必要条件这一基本规律站考，将整个检测当中所统计到的细菌的繁殖能力或是新城代谢的产物总量

4、定义为被检测物质当中维生素的含量。从这一角度上来说，这种微生物检测方法适用于多种衍生物总和的检测。就我国而言，GB5413号标准规范当中明确支持：在当前技术条件支持之下，对于维生素B12、叶酸、泛酸、烟酸、烟酰胺、肌醇以及生物素当中维生素含量的测定均在同等测定条件之下选取微生物法予以确定。从世界范围上来说，采用微生物方法对叶酸进行检测是当前技术条件支持下国际相关官方机构所唯一认同的检测方法。大量的实践研究证实：虽然微生物法在维生素检测过程当中反映出了较高的灵敏度以及较为精确的检测结果，但其在检测过程当中所表现出的局限性（包括批次检测

5、作用下检测结果的重复性差比较大、检测周期耗时长等特点）都使其在应用过程中存在一定的制约与限制，亟待改进。笔者认为,最有效也是最简便的改进方法在于将96孔酶标板以及实验室常规配备的酶标仪引入微生物检测方法当中，在充分遵循国际微生物一般性检测原理的基础之上，采用ELISA微孔板方式对维生素进行测定，在确保各种特异性微生物微孔板储备充分的基础之上合理控制试剂消耗，节约加样以及人工读取检测结果所需耗费的时间。实验证明：此种改进方式使得维生素的检测较传统意义上的微生物检测时间节约了4〜5d以上，检测步骤及流程缩短了1/3左右，且整个检测过程当

6、中检测标样的有效回收率达到了95%〜105%左右，将其作为检测营养食品当中维生素添加含量的检测方法尤为合适。2仪器法检测维生素分析从理论上来说，在但当前技术条件支持下国际范围内应用较为普遍的维生素仪器检测方法基本可以分为以下两种——HPLC高效液相色谱法和LC-MS-MS液质联用法。首先，对于高效液相色谱法而言，其从本质上来说是一种依照被分离组分在流动相和固定相中溶解度的差异性表现而呈现出分离行为的检测方式。这种分离行为实质上就是一个确保分配平衡的过程。应用这种检测方法对维生素进行检测最大的优势在于被检测样品的前期准备工作非常简单，

7、对于待测物无硬性衍生化要求，且维生素特异性比较强，检测响应灵敏度比较高。高效液相色谱检测法对于检测仪器的需求也比较简单：电化学检测器、荧光检测器以及紫外吸收检测器均能够较为充分的满足维生素的检测需求。且这部分仪器具有较好的检测分离效果，在一般情况下能够确保10〜30min之内完成整个分离动作，针对那部分同分异构体或是多组分物质的维生素检测尤为适用，且其能够一次性持续分析多种水溶性维生素含量，在当前维生素检测领域中有着极为深远的研究意义与价值。其次，对于液质联用法而言，其针对维生素展开检测的关键在于质谱分析。待检测物质经由离子化处理之

8、后会按照离子所呈现出的质荷比参数进行分离，进而对各种离子所表现出谱峰强度予以测定，进而达到测定样品中维生素含量的检测目的。基于以上两种仪器检测方法，笔者提出一种优化措施：结合高效液相色谱法与液质联用法的检测技术，在ISO质量体系研发规