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1、胆囊癌对化疗药物敏感性探究作者：周程，胡思安，龚昭，阮剑【摘要】目的研究化疗药物对胆囊细胞的敏感性。方法应用MTT法及流式细胞仪，选择6种化疗药物作用于胆囊癌细胞株，进行化疗药物敏感性的检测。结果MTT法及流式细胞法测定6种化疗药物对胆囊癌细胞的敏感性，由高至低依次为顺铠(DDP)34.77±3.53、丝裂霉素(MMC)33.25±3.40、卡钳(CDB)15・73±4.50、阿霉素(ADM)15.52±3・56、甲氨蝶吟(MTX)14.5±2・13、长春新碱(VCR)8.5±1.95o结论6种化疗药物以DDP、MMC较敏感
2、，CDB、ADM、MTX次之，VCR最差。【关键词】胆囊癌；化疗；流式细胞仪[Abstract】ObjectiveTostudythesensitivityoftheprimarygallbladdercarcinomatochemotherapeuticdrugs.MethodsAnalyzedbyMTTmethodsandcytofluorometry,thesensitivitydetectionof6kindsofchemotherapeuticdrugstogallbladdercarcinomacellstrai
3、n.ResuItsAllofthesixantitumordrugswasevaluatedbyMTTmethodsandcytofluorometry,theywere(fromhightolow):cisplatin(DDP)34.77土3.53,mitomycinC(MMC)33.25±3.40,carboplatin(CDB)15.73±4.50,adriamycin(ADM)15.25±3・56,methotrexate(MTX)14.5±2.13,vincristine(VCR)8.5土1.95.Conclusi
4、onDDPandMMCaremorechemosensitivethanCDB,ADMandMTXespeciallythanVCR.[Keywords]gallbladdercarcinoma；chemotherapy；cytofluorometry原发性胆囊癌是一种恶性程度高且预后较差的胆系恶性肿瘤，占消化系统恶性肿瘤的第五位，近年来的统计结果表明，其发病有增高趋势[1]。虽然在诊断技术，及治疗方法上有所发展，但治疗5年生存率仅有5%〜10%的水平。手术治疗仍然是目前胆囊癌治疗的首选方法，但手术切除率低依然是困扰胆囊癌治
5、疗方法的主要原因，因此，药物化疗就显得至关重要。但目前针对胆囊癌的化疗效果欠佳，且国内外尚无统一、公认显效的联合用药方案。我们选择了5种化疗药物，采用MTT及流式细胞仪(FCM)方法检测其药物敏感性,以期找到临床合理运用化疗方案的科学依据，从而使化疗个体化。本实验研究的结果报告如下。1材料与方法1.1材料1.1.1细胞来源胆囊癌细胞系（山东医科大学外科陈博教授提供）。1.1.2药物顺钳、阿霉素、丝裂霉素、卡钳、长春新碱、甲氨蝶吟。1.1.3试剂及仪器RPMI1640培养基及小牛血清由北京中山公司提供，四甲基偶氮p坐盐（MTT
6、）及二甲基亚飙（DMS0）由Sigma公司提供，自动酶标读数仪（国产DG-3022）,流式细胞仪FACScort（BectonDickinson）o1.2方法（1）胆囊癌细胞在含100%小牛血清的1640培养基，37°C,5%C02培养箱中生长。取对数生长期的细胞以每孔5X104个细胞接种于96孔细胞培养板中，37°C,5%C02条件下培养48ho把所有细胞分为6个实验组和1个对照组，6种不同浓度的化疗药物浓度为[药物浓度计算公式为:药物浓度（Ug/ml）=60XD/50004-50%X103,D为临床用药剂量（mg/kg•
7、d）,60为平均成人体重（kg）,50%为红细胞压积，乘103后将mg换算成ug]DDP40ug/mg、MMC2ug/ml、ADM40ug/ml、CDB300ug/ml、MTX5ug/ml、VCR1ug/ml。分别加入6个实验组中，使每孔最终体积为200U1,每个浓度设3个复孔。以无化疗药物的细胞液为空白对照，作用48h后,每孔加lmg/ml的MTT0.1ml；继续培养4h后加DMSO溶液0.1ml,温育30min；在自动酶标读数仪上比色，波长570nm,测出每孔0D值（吸光度值），结果以高度敏感（抑制率＞70%）,中度敏感
8、（抑制率50%〜70%）,不敏感（抑制率<；50%）判定。抗肿瘤药物对肿瘤细胞抑制率=（1-实验组吸光度值/肿瘤细胞对照组吸光度值）X100%o（2）流式细胞仪药敏检测法按（1）所计算浓度分别温育6组胆囊癌细胞48h,并以不加药物的RPMI1640细胞培养液作阴性对照，收集胆囊癌细胞，
