结核病疫苗的研究进展

《结核病疫苗的研究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、结核病疫苗的研究进展力的分支杆菌中而在BCG减毒和反复传代时缺失。RD1区是所有缺失域中最具特征性的。该基因片段在所有BCG亚株和大部分环境分支杆菌中缺失，但在结核杆菌复合群的各菌株屮存在。另外，环境分支杆菌致敏也是影响BCG效力的一个重要因素。接触环境分支杆菌可获得不同水平的抗结核病感染的保护作用，但不足以控制以后毒力更强的结核杆菌的攻击,却完全阻断了由BCG正常提供的抗结核杆菌攻击的保护作用。除效力不一致外，标化不足也是其主要缺点之一。同时，BCG作为一种减毒的活疫苗，如果应用于免疫功能有缺陷

2、的患者如HIV感染者，可能会使BCG在患者体内播散而导致患者死亡。BCG的局限性推动了抗结核病新疫苗的开发。发展安全、高效的新型结核病疫苗势在必行。1997年以来，美国国立卫生研究院(NIH)Orme等建立了小剂量气溶胶攻击的原发性肺结核病小鼠和豚鼠模型，并利用这些模型对170多种候选疫苗进行了试验。该院用于结核病研究的经费，从1990年的340万美元，增加到2000年的近8000万美元。目前世界范围内正在开发的结核病疫苗包括减毒或增强的活疫苗、全菌体灭活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗、初免■加强疫

3、苗等。一、减毒或增强的活疫苗活疫苗的优点是可使机体免疫系统受到更接近口然感染途径的刺激，而不会引起病理损害。但同BCG-样，影响以PPD为抗原的结核病血清学免疫诊断结果。减毒活疫苗沿用了构建BCG的思路。一是通过基因置换和转座子诱变使单个基因位点失活來制备疫苗。使用这种方法已生产出营养缺陷型候选疫苗株。这种营养缺陷型株能导致哺乳动物宿主感染，但复制时间有限，与BCG有相同的保护作用。这预示着免疫功能抑制人群有了较为安全的活疫苗的希望。二是诱导菌体突变，导致毒力减低来构建减毒活疫苗。由TBCG传代过

4、程丢失了RD1区，导致保护力下降，因此重新改造结核杆菌，使其RD1区缺失，用结核杆菌RD1缺失株来验证它是否减毒，在人体存在的时间是否足以引起保护性免疫应答,诱导的免疫应答是否比BCG强。另一种减毒方法是前细胞凋亡法，设计用作疫苗候选株的结核杆菌或BCG突变株的超氧化物歧化酶活性减弱，感染细胞时，细胞凋亡加速，经MHC・I类抗原递呈增加，从而增强CD8+介导的杀菌作用。这些理论已得到初步验证。增强活疫苗的通常方法是，在BCG中引入传代过程中丢失的保护性抗原，或者引入哺乳动物细胞因子、荧光素酶等，以

5、增强BCG的免疫原性。在BCG中引入能够诱导宿主产生细胞免疫的结核杆菌分泌性蛋白保护抗原Ag85B,免疫结果显示，其肺和脾内的细菌数与BCG免疫组相比，显著减少。由RD1区基因编码的结核分支杆菌早期分泌性抗原性靶(ESAT-6),是从结核杆菌短期培养滤液(ST-CF)中纯化分离的一种低分子量分泌性蛋白，具有较强的细胞免疫活性，可致结核杆菌再感染小鼠的记快效应T细胞增殖及IFN-r早期大量产生，在BCG各菌株中缺乏其编码基因。把RD1区重新导入BCG,表达的蛋白质同有毒力的牛型分支杆菌和结核杆菌几乎

6、完全相同。与BCG的免疫效果相比，可产牛•更多高效价的特异性抗体和更为强烈的细胞免疫反应。因此从RD1-RD16中选择基因重新导入BCG,可能是增强现有BCG保护效力的更为有效的途径。Murray等分别构建了能分泌IL・2、IL・4、IL・6、IFN・r、GM-CSF等细胞因子的rBCG。通过免疫小鼠证明，在BCG中加入有免疫增强作用的细胞因子，可增加BCG的免疫效果。BCG虽有不足，但有使用广泛、价格低、稳定性好、便于保存等优点，所以rBCG正越来越受到研究者的重视。二、灭活的全菌体疫苗以前已对

7、灭活的全菌体疫苗的预防作用有所认识。在意大利10万名儿童中接种了全菌体分支杆菌灭活疫苗，显示有一定的预防和降低死亡率的作用。灭活疫苗的最大优点是安全。但接种后在机体内不复制，需反复接种，但用量大。目前，对耗牛分支杆菌灭活疫苗的研究表明，在动物模型中能预防结核病，并能诱导分支杆菌特异性细胞毒性应答。在健康人和感染HIV的BCG初免者中能诱导产生分支杆菌特异性抗体、淋巴细胞增殖和INF-r产生。2001年在坦桑尼亚开始评价该疫苗预防HIV感染者结核杆菌菌血症的效力。三、亚单位疫苗由于组成亚单位疫苗的蛋

8、白质或多肽，是以天然蛋白氨基酸或多肽的碱基为基础，利用基因工程方法生产的，故与天然成分具有近似的性质，且产量大、纯度高，可以进行质量控制和标化，制成“鸡尾酒”式的复合疫苗，其安全性也较高。研究表明，结核杆菌保护性抗原基因多属分泌蛋白，具有重要的细胞免疫功能，有很强的CD4+Thl和CD8+细胞毒性应答特性，能产生IFN-r,使动物产生保护性免疫。现已知亚单位疫苗中有明显作用及部分作用的分泌蛋白有Ag85、ESAT・6、MPT・32、MPT-64以及热休克蛋白HSP65、HSP70等