兔坐骨神经电损伤后背根神经节血管内皮细胞生长因子表达变化的分析

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1、2.1实验动物及环境412.2实验动物分组412.3激光共聚焦及Western-blotting检测VEGF表达412.4兔坐骨神经血流量的测定：422.5兔坐骨神经传导速度的测定:422.6坐骨神经切片HE染色：4227统计学処理:424950参考文献个人简历和研究成果62致谢63缩略语表缩略词英文全称中文全称PNPeripheralnerve周围神经VEGFVascularendothelialgrowthfactor血管内皮细胞生长因子BSABovineserumalbumin牛血清白蛋白CGRPCalcitoningene-relatedpeptide降钙素基因相尖肽DRGDo

2、rsalrootganglion背根神经节IHCImmunohistochemistry免疫组织化学NRPNeuropilin神经纤毛蛋白NavVoltage-gatedsodiumchannel电压门控钠通道NGFNervegrowthfactor神经生长因子HEHematoxyline・eosin苏木精-伊红色素上皮衍生生长因PEDFPigmentepitheliumderivedfactor子PBSPhosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲溶液BDNFBrain-derivedneurotrophicfactor脑源性神经营养因子MMPMetalloprotei

3、nase基质金属蛋白酶IGFInsulin-likegrowthfactor胰岛素样生长因子兔坐骨神经电损伤后背根神经节血管内皮细胞生长因子表达变化的研究硕士研究生：张洪辉导师：李学拥教授第四军医大学唐都医院整形科，西安710038中文摘要背景伴随着电力的应用和发展，也产生了更多的电损伤患者。虽然防护意识及防护措施不断加强，但是电损伤患者的数量仍在逐年增加。资料报道•电损伤占烧伤病人总数的9%•并且比例仍在增大，仅北美洲每年大约就有20000例急诊电损伤病例，且在职业相尖死亡的致病因中电损伤高居第五位⑴。电损伤患者周围神经损伤的发生率高达30%，且部分患者需要截肢及伴有神经损伤后遗症。

4、故周围神经电损伤的治疗已成为目前电损伤治疗研究的一个趋势。周围神经要保持正常的生理功能・除要保持与中枢神经系统的连续性外•还必须接受持续而充足的氧气和营养供应。而神经电损伤的特点是神经连续性多数存在但是神经内结构容易受损•故各种损伤引起的神经微循环障碍会导致神经的结构及功能发生一定的改变。背根神经节(dorsalrootganglia-DRG)作为周围神经传入的第一级神经元•不仅将周围神经与中枢神经系统相连接，而且DRG神经元的轴突运输系统，在神经递质、神经营养因子及靶器官内环境变化相尖的信息传导方面起重要作用。神经营养因子自从被发现以来一直是神经治疗研究的热点，伴随着生物化学以及分子

5、生物学的发展，对神经因子的作用机制及生物学效应研究更加深入，也发现了一些新的神经营养因子。近年来•国外文献报道・血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)不仅具有促进血管再生的作用•而且具有神经保护、营养及促进神经生长分化的作用。故本课题通过周围神经电损伤后观察背根神经节内VEGF表达变化规律，并进一步应用前列地尔改善微循环后观察DRG内VEGF变化以及受损神经恢复情况•以探讨周围神经电损伤的病理生理改变以及进一步探讨周围神经电损伤后的治疗方法及机理。实验一兔坐骨神经实验性电损伤后背根神经节内血管内皮细胞生长因子表达变化的研究目的：

6、观察兔坐骨神经电损伤后背根神经节内神经细胞VEGF的表达及变化。方法：36只健康成年兔随机分为阴性对照组以及50V和110V2个电损伤组-按电损伤组标本获取时间分为12h组、24h组、3d组及7d组，用激光共聚焦显微镜和Western-blotting方法分析DRG内VEGF的表达变化，并进行比较。结果：3组动物背根神经节(DRG)神经元细胞均有VEGF的表达•2电损伤组损伤后12小时即可见VEGF表达增加，3天时表达最为显著，7天时逐渐回落；3天时，50V组及简0V组均较对照组VEGF表达有增加(P<0.05和PvO.01),110V较50V组VEGF表达量亦增加(P<0.05)。结

7、论：兔坐骨神经电损伤后背根神经节(DRG)神经元细胞内VEGF表达量与时间和电压相尖。DRG内VEGF表达增加可能是周围神经电损伤后机体自身的保护与修复机制之一。实验二兔坐骨神经电损伤后应用前列地尔治疗的效果及背根神经节的VEGF表达变化的研究目的：了解应用前列地尔治疗治疗周围神经电损伤的疗效•并进一步观察VEGF在背根神经节的表达变化。方法：随机将家兔分成3组：正常组、模型对照组和前列地尔治疗组。模型对照组为110伏组兔坐骨神经电损伤动物模型