用于乳酸菌分离鉴定的几种培养基的筛选及应用

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1、3742007,Vol.28,No.09食品科学※生物工程用于乳酸菌分离鉴定的几种培养基的筛选及应用王友湘，陈庆森*，阎亚丽(天津市食品生物技术重点实验室，天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津300134)摘要：发酵乳产品中益生菌活菌数的正确评价，对保障发酵乳制品的质量和功效具有重大意义。本研究通过对三种不同的益生菌在五种不同的培养基上的生长状况进行了评价和观察，结果发现嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌在改良TJA培养基上生长状况很好，瑞士乳杆菌在溴甲酚绿指示剂培养基上长势良好。研究结果为以这些菌种研究开发新型发酵乳产品提供了技术和品质的保证，也为益生菌及益生菌制品深入研究打下

2、了基础。关键词：益生菌；培养基；生物量；活菌数ScreenandApplicationofAFewCultureMediainIsolationandIdentificationLactobacillusWANGYou-xiang，CHENQing-sen*，YANYa-li(TianjinKeyLaboratoryofFoodBiotechnology,CollegeofBiotechnologyandFoodScience,TianjinUniversityofCommerce,Tianjin300134,China)Abstract：Anaccurateestima

3、teaboutthenumberoflivebacteriainfermentedproductsissignificanttotheproductsquality※生物工程食品科学2007,Vol.28,No.09375改良TJA培养基(1号)：番茄汁50ml；酵母浸粉以及细菌个体形的观察，对几种细菌的生长状况进行5g；牛肉浸膏10g；乳糖20g；葡萄糖2g；Tween80描述。1ml；CH3COONa5g；琼脂15g；蒸馏水1000ml；1.2.3数据处理pH6.8±0.2；121℃，20min灭菌。实验取得的数据采用SPSS11.5分析软件处理，数值M17培养基(2

4、号)：大豆胨5g；蛋白胨2.5g；酪均以X±SD表示。蛋白胨2.5g；酵母浸粉2.5g；牛肉粉5g；乳糖5g；抗坏血酸钠0.5g；β-甘油磷酸钠19g；MgSO40.25g；琼2结果与分析脂12.75g；蒸馏水1000ml，pH7.0～7.4；121℃，15min2.1三种乳酸菌在不同培养基上形成的菌落数比较灭菌。通过十倍稀释法对三种菌在五种培养基上分别培溴甲酚绿指示剂培养基(3号)：①酵母浸膏10g，养，然后计算在各种培养基上的菌落数，换算成相应的琼脂30g；16ml溴甲酚绿指示剂；蒸馏水1000ml；浓度，然后用SPSS11.5进行分析处理，得到表1所示的pH7.4；

5、pH7.4；②乳清粉100g；蒸馏水1000ml；结果。115℃，30min灭菌。3号培养基的制备是①②灭菌后在由表1可以看出，嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌在改良无菌状态下混匀后倒平板。TJA培养基上菌落数最多，瑞士乳杆菌TS206在溴甲酚绿MRS培养基(4号)：蛋白胨10g；牛肉浸粉8g；酵指示剂培养基上菌落数较多。LBS培养基对瑞士乳杆菌生母浸粉4g；葡萄糖20g；KH2PO42g；柠檬酸氢二铵长而言也是一个较好的培养基，但从鉴定菌落形成单位考2g；CH3COONa5g；MgSO40.2g；MnSO40.04g；虑，溴甲酚绿指示剂培养基要好于LBS培养基。因此后Tween8

6、01ml；琼脂14g；蒸馏水1000ml，pH5.7±续研究采用的培养基为：嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌为改良0.2；118℃，15min灭菌。TJA培养基，瑞士乳杆菌为溴甲酚绿指示剂培养基。LBS培养基(5号)：酵母浸粉5g；胰酪蛋白胨10g；2.2三种乳酸菌在选择培养基上菌落形态的特征葡萄糖20g；柠檬酸铵2g；KH2PO46g；FeSO40.034g；根据实验方法中所建立的培养方法和伯杰鉴定手MgSO40.575g；CH3COONa25g；MnSO40.12g；册，实验对三种乳酸菌在不同培养基上生长的状态进行冰乙酸蒸馏水±3762007,Vol.28,No.09食品科学※

7、生物工程表2微生物在各培养基上的生长状况Table2Developmentofbacteriainvariousculturemedia培养基菌种改良TJAM17培养基指示剂培养基MRS培养基LBS培养基菌落白色，圆形菌落白色，圆形菌落黄色，长菌的扁平，边缘光滑，扁平，边缘光滑，地方培养基由蓝变长在培养基中间的长在培养基中间的黄且菌落中间颜色菌落直径0.8mm且菌落直径0.9mm较周围深并呈微透－－嗜热链球菌有的垂直生长，在且有的垂直生长，明状，直径0.3mm平皿底部的菌直径在平皿底部的菌边缘模糊。有的也1.1mm，培养基由直