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《血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、I血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与鉴定査智辉％施慧2,谢建军2,许文军（1浙江省海样水产研究所，浙江海洋学院海洋与渔业研究所，浙江舟山316KX）2浙江海洋学院海洋科学学院，浙江舟山316000）摘要：冃的制备抗血卵涡鞭虫的单克隆抗体（MeAb）并研究其初步应用。方法用血卵涡鞭虫可溶性抗原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠，经常规融合，以间接ELISA方法筛选出分泌高滴度、高特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并使用所得单抗检测血卵涡鞭虫样木，最终建立双抗体夹心ELISA法检测感染血卵涡鞭虫的三疣梭子蠻。结果获得3株分泌高滴度抗血卵涡鞭虫可溶性抗原的单克隆抗体杂交瘤
2、细胞株（2B2、3G4、4G7）,分泌抗体经鉴定均为IgGo双抗体夹心ELISA法和间接荧光抗体试验结果表明，三株单抗都与血卵涡鞭虫可溶性抗原呈强阳性反应，而不与三疣梭子蟹其它病原他子虫、溶藻弧菌及三疣梭子蠻血淋巴等发生交叉反应。双抗体夹心ELISA检测血卵涡鞭虫可溶性蛋白抗原灵敏度为100pg/mlo结论制备的抗血卵涡鞭虫可溶性抗原的杂交瘤细胞株能分泌高滴度、高特异性的单克隆抗体，且在病原的临床检测方而有应用前景。关键词：血卵涡鞭虫；可溶性抗原；单克隆抗体；夹心ELISA法屮图分类号：文献标识码：PreparationandPreliminaryApp
3、licationofMonoclonalAntibodiesAgainstHematodiniumsp.inPortunustrituberculatus.ZHAZhi-hui12,SHIHui2,XIEJian-jun2,XUWen-jun1'2（1.MarineandFisheryResearchInstituteofZhejiangOceanUniversity,MarineandFisheriesResearchInstituteofZhejiangProvince,Zhoushiin,Zhejiang316100,China：2.Miirine
4、ScienceSchoolofZhejiangOceanUniversity,Zhoushan,Zhejiang316100,China）Abstract：ObjectiveTodevelopandidentifymonoclonalantibodies（McAbs）againstHematodiniumsp.inPortunustrituberculatus.iindobserveitsapplicability.Methods8-week-oldfemaleBALB/cmicewereimmunizedwithsolubleantigenofHema
5、todiniumsp..Thespleencellsofimmunizedmicewere收稿日期：基金项目:浙江省自然科学基金项目（Y3080317.Y3080181）；浙江省大学生科技创新项目（新苗计划）共同资助。作者简介:査智辉（1977-）甘肃临泽人，硕士研究生,研究方向:海洋生物病害学,Tel:13957233215,E-mail：zzh1229@126.com通讯作者:许文军，Tel:0580-3055554>E-mail：xwcnjun@sina.comfusedwithmyelomacell,andthehybridomasecretin
6、ghightiterofMcAbswithhighspecificitywasscreened・ByusingtheMcAbs,Hematodiniumsp.wasdetectedbyindirectELISA・Doubleantibodysandwichenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)respectively.ResultsThreeMcAbswereestablished(2B2,3G4,4G7),whichallbelongedtotheIgGsubtype.Threeclonesallshowednoc
7、rossreactionwithantigensofNoserna^V.alginolyticusandthehaemolymphofPortunustrituberculatus.ThesensitivityofthedoubleantibodysandwichELISAtodetectHematodiniumsp.antigenwas1OOpg/ml.ConclusionThreehybridomacelllinesagainstHematodiniumsp.inPortunustrituberculatushavebeenestablishedwh
8、ichsecrethightiterofMcAbswithhighspecifi
