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1、《食品质量与安全实验技术》（实验指导）实验一食品中多糖的测定一、实验目的掌握多糖的测定方法。二、实验原理苯酚-硫酸试剂町与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应，己糖在490nm下冇最大吸收，吸收值与含糖量呈线性关系。三、实验试剂浓硫酸、80%苯酚：80g苯酚加20g水使Z溶解，町置冰箱中避光长期保存。6%苯酚：临用前用80%苯酚配制、分析纯葡萄糖、苹果、大白菜、山药。四、实验步骤1、制作标准曲线准确称取分析纯葡萄糖20mg于500mL容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4mL、0.6汕、0.8mL、1.0mL>1.2mL>1.4ml八1.6mL、1.8mL、,
2、各以水补至2.OmL,然后加入6%苯酚1.0及浓硫酸5.OmL,静置lOmin,摇匀,室温放置20min以后,于490nni测定其吸光值,以横朋标为多糖微克数，纵处标为吸光值，得到标准曲线。2、样品含量的测定分别准确称取苹果、大白菜、山谿各10.00&,捣碎后，加水研磨，滤纸过滤，滤液定容至100M1,备用。样品测定：吸取样液1.OmL,按上述步骤操作，测490nm下的吸光值，以标准曲线计算新鲜苹果、大口菜中多糖含量。四、思考题1.多糖对人体有何作用？2.结合测定的数据，讨论苹呆中的多糖和大口菜中的多糖能否起相应的作用？实验二食品中蛋白质含量的测定-一考马斯亮蓝法一
3、、实验目的学习利用考马斯亮蓝比色法测定食站中蛋口质的含量二、实验原理根据考马斯亮蓝试剂与蛋口质以范德华力结合为红色或蓝色溶液,颜色的深浅与蛋口的含量成正比，在595nm有最大吸收。三、试剂与器材1、考马斯亮蓝试剂考马斯亮蓝G-250lOOmg溶于50讥95%乙醇中，加入100mL85%磷酸,用蒸饰水稀释至lOOmL,滤纸过滤,最终试剂中含有0.01%(W/V)考马斯亮蓝G-250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)磷酸。2、蛋白质溶液结晶牛血清蛋片，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白质含量，根据其纯度用0.15mol/LNaCl配成lmg/mL蛋白溶液。3、样品：
4、绿茶、果汁饮料四、标准曲线的绘制(1)标准蛋白液:牛血清蛋白(0.Img/mL),准确称量牛血清蛋白0.lg,用0.9%的NaCl溶液溶解并稀禅至1000mLo(2)染液：考马斯亮兰G250(0.01%),称量0.lg考马斯亮兰G250溶于50iiil的乙醇中，加入100汕浓磷酸，再加蒸憎水定溶到1000汕。分别取0ml,0.1ml,0.2ml,0.3ml,0.4ml,0.5ml,0.6ml,0.7ml,0.8ml,0.9ml,1.0ml于试管中,均用水补足至1.0ml,各)J]4ml考马斯亮兰染液，然后混匀，室温静止3min,以第一管为空口，于波长595rw处比
5、色，测得吸光值。五、样品制备1.茶汤样品制备:准确称取绿茶3.00g,加入沸腾的蒸憾水150mL,浸泡30min,期间不断搅拌,滤纸过滤,滤液定容至150mL,备用。2.果汁饮料制备：摇匀后肓接取样。六、样品测定取0.1讥茶汤或饮料，加5mL考马斯亮蓝试剂，其余操作同标准曲线的绘制，从标准曲线算得蛋白质的含量。每个样品重复测定三次，每次做三个平行。标准曲线的绘制：(1)标准蛋白液：牛血清蛋白(0.lmg/mL),准确称取牛血清蛋白0.lg,用0.9%的NaCl溶液溶解并稀释至lOOOmL(2)染液：考马斯亮兰G250(0.01%),称取0.lg考马斯亮兰G250溶于
6、50mL的乙醇中,加入100mL磷酸,加蒸镭水定溶到lOOOmL分别取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、l.OmL于试管中,均用水补足至1.OmL,各加4mL考马斯亮兰染液,然后混匀，室温静止3min,以笫一管为空白，于波长595nm处比色。如图1,标准曲线Y=6.09X0.001(Y为吸光值，X为标准蛋白浓度，单位为mg/mL),R2=0.996o图1蛋白质标准曲线实验三、市售饮料中维生素C的测定(碘滴定法)一、实验原理碘测定维生素C的方法是以碘作氧化剂，当被维生素C还原直至原样品液中维生素C完全氧化后，过量的碘遇淀粉指示
7、剂呈蓝色。二、材料、仪器用具、试剂1•材料鲜橙多果汁2.仪器用具烧杯、三如瓶、lOOmL容量瓶、lOniL移液管、微量滴定管、漏斗、脱脂棉屁、分析天平。3.试剂0.0005mol/L碘液、1%草酸溶液、1%淀粉溶液、标准抗坏血酸溶液(溶解lOOmg纯抗坏血酸于lOOmLl%草酸中,配成lmg/lmL的浓度)。二、碘液标定吸取标准抗坏血酸溶液加L,加1%草酸溶液5mL,淀粉指示剂2mL,用碘液滴至微蓝色,lmin不褪为终点。计算出每毫升碘液相当的抗坏血酸的毫克数。四、实验步1.样品液的制备：取样品液鲜橙多10mL,移入lOOmL容量瓶中,用1%草酸冲洗2—3次,加
