虎杖中白黎芦醇提取工艺研究

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1、虎杖中白黎芦醇提取工艺研究虎杖(Polygonumcuspidtumsieb)为蓼科葛属多年生草本植物的干燥根茎，主要含有恵酿类、罠类、水溶性多糖和棘质等成份【»白藜芦醇在植物中分布广,目前至少己经在21个科、31个屈、70余种植物中发现了白藜芦醇.足虎杖的主要功效成分。研究表明：它对心肌细胞、血管平滑肌细胞、对改善微循环等有显苦作用；此外白藜芦醇能减轻多种因素造成的组织器官损伤，JI有保护胛脏、抑制血小板聚集、镇咳平喘、抗菌、抗病秦、降血脂及抗脂质过氧化等作用HL生物酶法越来越多的应用于中药有效成分提取.它具有提取效率高，不

2、易造成有限资源浪费和污染的特点,成为现代提取方法的研究热点『＞叭冃前捉取白藜芦醇主要以虎杖为原料，常用的捉取方法是溶剂捉取法、碱提取法、酶提取法、微波提取以及超声波提取。本实验通过比较酶法提取和溶剂提取两种方法，选出白藜芦醇制备的最优方法，提髙白按芦醉的得率，为白藜芦酹的进一步工业化生产提供依据。1材料与方法1.1材料与仪器1.L1材料与试剂白藜芦醇对照品纯度99%,国家药品生物制品鉴定所；虎杖块茎，湖南桑植县八大公山，粉碎后过筛;纤维素酶，上海们奥生物科技有限公司；乙醉为分析纯，广州化学试剂厂。I.L2仪器与设备TU-180

3、紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；旋转蒸发器，上海虹析电了仪器仪表光度注值,x为浓度Mg/mL）,R2-0.9995,线性范倒:°°0204060Fig.1Sundirdcuneofresveratrol溶剂法提取工艺的优化2.22.2?!0.50r3025仃限公司；SHZ-I1I循环水真空泵，上海钿华层析设笛厂；便携式pH计，pHB-5上海伟业仪器厂；电热恒温水浴锅，北京ifj长风仪器仪农公司；分析天平，上海天平仪器厂。1.2方法1.2.1原料处理将虎杖块茎粉碎，并筛分为一定粒径（60目）的粉末。1.2.2溶

4、剂法提取白鑿芦醉准确称取粒径60H虎杖粉末L00g,置尸100mL容虽瓶中，按一定的料液比加入60%乙皤溶液，调节样品溶液pH后邂封，称重。放到一定温度水浴锅中水浴-定时间.放置冷却、补車、过滤，柿释后，以提取溶剂为参比，在紫外分光光度计上测定濾液在波长331nm、333nm的吸光度，计算提取得率。1.2.3酹解法提取白藜芦醇准确称取粒径60目虎杖粉末l.OOg.g于100mL容量瓶屮，按一定的料液比加入60%乙醉溶液.加入不同蜀的纤维素购，调节样品溶液pH后密封，称瓦放到一定温度水浴锅中酶解-定时间。放置冷却、补龜、过滤，稀

5、释后，以提取溶剂为参比，在紫外分光光度计上测定滤液在波长331nm.333nm的吸光度,计算捉取得率。124白藜芦醇的测定与含量计算1.2.4.1白藜芦卿标准曲线的绘制精确称取白藜芦醇对照品5.0mg,用乙醇溶解于50汕容量瓶中.稀释刻度、摇匀.分别吸取此液0mL、0.1mL、0.3mL、0.5mL、0.7mL于10mL容粗瓶中，加乙醉稀释到刻度、摇匀，所得浓度为0.0Hg/mLx1.0pg/mLs3.0pg/'mL,5.0pg/mLs7.0

6、ig/mL的溶液，以乙醉为参比，在紫外分光光度计上测定各溶液在波长331nm、333

7、nm的吸光度.以△A（As”AM对浓度作标准曲线及回归方程。1.2.4.2提取得率的计算在波长331nnx333rnn处进行比色测定其吸光度后作差值AA（AwrAB3）»由回归方程计算口藜芦醉浓度，再由稀释倍数计算出提取液中白藜芦醇的含量。白藜芦醇的提取得率计算公式如下：门藜芦醇得率/%2结果与分析2.1白藜芦醇标准曲线的绘制对实验数据进行相关分析，白藜芦醇浓度和吸光度差值的线性回归方程为：y=0.0072x+0.0002（y为吸80100料渡比图2料液比对白葉芦薛提取得军的形响FlgJInfluenceofsottd-liq

8、uidratioontheextractionyieldofresveratrolpH图3pH对白燥芦薛提取得率的影响Fig3InfluenceofpHontheextnetionyiddofresveratrol准确称取粒径60目虎杖粉末1.00g,置干100mL容星瓶中，加入60%乙肿，提取温度50匸、提取时间2h,确定适宜的料液比（实验设计料液比为1:20、1:35、1:50、1:65、1:80进行比较）.由图2可确定料液比为1:50,然后分别进行pH、提取温度、捉取时间单因素试验（图3~图5）,试验结果表明，料液比、p

9、H.提取温度、提取时间对白藜芦醇提取得率有显苦影响，所以确定这四个因素进行正交试验。050rO.O.O.O.O.020111'020406080100120wt/r图4温度対白魏芦酹捉取得率的影晌Fig.4Influenceofbathtemperatureontheextr