论虎杖白藜芦醇的提取工艺及检测方法

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1、论虎杖白藜芦醇的提取工艺及检测方法摘要:介绍了虎杖中白藜芦醇的提取以及检测方法的研究进展，为进一步开发利用提供了依据。关键词:虎杖白藜芦醇提取工艺检测方法Abstract:Inthispaper，theadvancesintheresearchofextractiontechnologyanddeterminationofresveratrolfromPolygonumcuspidatumoreexploitationinthefuture.Keycuspidatum;Resveratrol;Extractiontechno

2、logy;Determination　　白藜芦醇(3,4,5,-三羟基二苯乙烯；trans-resveratrol)是一种活性多酚物质，在虎杖、葡萄、花生、毛穗藜芦、毛脉酸模等植物中存在。白藜芦醇被认为是一种植物抗毒素，在植物受到病原性进攻和环境恶化时产生的。其药理作用为：抗菌、抗氧化、预防心脏病、抗癌、抗血小板凝聚、保护肝脏、雌激素作用、防辐射、免疫调节、抗艾滋病活性等［1～3］。白藜芦醇已被喻为继紫杉醇之后又一新的绿色抗癌药物，它在食品、医药等方面应用也越来越广。在日本，已将含白藜芦醇植物提取物作为食品添加剂使用；在我国

3、，也有将白藜芦醇植物提取物制成降脂、美容、减肥和抗癌天然保健食品及胶囊［4］。本文回顾了近年来虎杖白藜芦醇的提取工艺以及检测方法的研究进展。1提取方法　　1.1酶提取法虎杖中除了含有白藜芦醇外，还含有白藜芦醇苷、蒽醌类、二苯乙烯类、多糖、氨基酸等物质，白藜芦醇苷在一定的条件下可以通过酶解脱去葡萄糖基而转化为白藜芦醇，酶解可以通过加入生物酶或利用植物内微生物进行，采用酶法从虎杖中提取白藜芦醇已有专利报道［5～8］，向海艳等［9］用纤维素酶酶解后提取，虎杖中白藜芦醇苷在纤维素酶作用下，转化成白藜芦醇，使白藜芦醇得率大大提高。其白

4、藜芦醇得率比直接醇提法提高近5倍。但这些方法存在转化率不高、成本较高、需时较长等不足。　　1.2微波提取法李核等［10］用微波辅助萃取法，研究了溶剂类型及萃取时间和温度、微波功率、虎杖颗粒大小和水分等主要操作参数对虎杖中白藜芦醇产率的影响，得到最佳萃取条件为：甲醇和丙酮为最佳萃取剂，温度80℃，时间15min，微波功率800～900Pa，萃取时间90min，萃取物中白藜芦醇的含量高达33％；曹庸等［17］采用超临界CO2流体技术对虎杖中白藜芦醇进行萃取，获得初步萃取条件：萃取釜压力25MPa，温度50℃；解析釜压力5.7MP

5、a，温度46℃，用无水乙醇及CY(自制)作为改性剂，同时用HPLC对萃取物进行白藜芦醇含量测定。超临界二氧化碳具有性质稳定、不易燃、无毒、不污染环境等优点，但有一定的局限性：它主要适用低极性物质萃取，压力温度选择也较小，在生产应用上存在设备一次性投资大，维护费用高［18］等不足。2检测分析　　2.1HPLC周建军等［19］采用色谱柱为EclipseXDBC8柱，流动相为乙腈-水，流速为1ml/min，检测波长为303nm。测出汉中地区虎杖中白藜芦醇的含量；周春山等［20］选用自填装ODS-C18色谱柱(200mm×4.6mm

6、,5μm)，以甲醇-水(41:59)为流动相，流速为0.6ml·min-1，紫外检测波长为303nm。白藜芦醇在0.06～0.30μg范围内呈良好的线性关系。朱鸿津［21］采用HPLC法测定虎杖中白藜芦醇含量，其间以聚酰胺柱对样品进行预处理，获得较好分离度和高回收率。测定条件:ODS-C18柱，流动相为甲醇-水(35∶65)，检测波长为300nm。白藜芦醇在0.420μg范围内具良好的线性关系，曹庸等［22］采用色谱柱:岛津Shim-parkCLC-ODS(150mm×4.6mm,5μm)，以乙腈-水(体积比为41∶59)溶

7、液为流动相，流速1.0ml/min，检测波长306nm。在此条件下，样品溶液进样质量浓度范围在500～1000μg/ml时，白藜芦醇含量与峰面积呈良好的线性关系。朱立贤等［23］测定虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量。色谱柱为LichrospherC18，流动相为甲醇-水-醋酸，梯度洗脱，流速0.3ml·min-1，柱温30℃，检测波长305nm，线性范围为：0.0396～0.3564μg。该法准确、简便，重现性好，适用于虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的定量分析。　　2.2TLC周国海等［24］用薄层扫描分析测定虎杖白藜芦醇含量:

8、以硅胶G为薄层吸附剂，氯仿∶丙酮∶醋酸∶水(4∶4∶0.5∶0.2)为展开剂，在紫外灯(365nm)下观察荧光斑点，在365nm处并进行扫描测定，并对虎杖茎、根、叶进行了含量测定，虎杖鲜根茎中含量达0.548%。傅红等［25］建立一种虎杖中白藜芦醇的含量测定方法，以石油醚-醋酸丁酯-甲醇-