毕业设计-一株海洋琼胶酶产生菌的分离、筛选和初步鉴定

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1、一株海洋琼胶酶产生菌的分离、筛选和初步鉴定刘美英,梅建风,应国注T,王鸿(浙江工业大学药学院,浙江杭州310014)摘要:目的从海水中分离活性较高的琼胶酶产生菌,以制备琼胶酶川于琼胶寡糖的生产,琼胶寡糖具有多种生物活性,在食品、化妆、医药等行业有广阔的应川前景。方法以琼胶为唯一碳源,用稀释涂布平板法进行分离,平板透明圈法进行初筛,摇瓶培养法进行复筛,改进的DNS比色法进行酶活力的测定。结果从海水中分离筛选到18株琼胶降解菌株,经复筛得到一株产酶活力较高的海洋细菌HS0326-601,并对该菌株进行了初步鉴定,结

2、果表明其为革兰氏阴性细菌,菌体呈短杆状。结论鉴于该菌株牛长速度快,通过对其进一步的诱变和发酵条件优化,有望成为高产琼胶酶产生菌,从而为琼胶酶、琼胶寡糖的深入研究和开发应用奠定基础。关键词:琼胶降解菌;琼胶酶;分离;筛选中国分类号:文献标识码:A文章编号:0000-0000(2008)00-0000-00Isolation,ScreeningandIdentificationofAgarase-ProducingBacteriafromtheSeawaterLIUMei-ying,MEIJian-feng,YIN

3、GGuo-qing*,WANGHong(Collegeofpharmaceuticalscience,ZhejiangUniversityofTechnology,Hangzhou310014,China)ABSTRACT:OBJECTIVETodegradeagarintoagaro-oligosaccharidebytheagarasewithahigheractivity,thestrainswereseparatedfromseawater.Theagaro-oligosaccharidehavesho

4、wnwideapplicationvaluesinfoodindustry,cosmeticindustry,pharmaceuticalindustryandothersectors・METHODSTheagarase・pi・oducingbaceriawereisolatedbythespreadplatemethod,first-screeningbyclearhalosonagarplatecontainingagarasthesole-carbonsource,second-screeningofsh

5、akingculture.TheenzymaticactivitiesweredeterminedbyimprovedDNScolorimetrymethod.RESULTS18agar-degradingstrainswereisolatedfromtheseawater,andamorepowerfulagarase-producingmarinebacteriumwasobtained・ThestrainwasdesignatedasstrainHS0326-60Iandidentifiedprelimi

6、narilyasGramnegative,rod-shaped.CONCLUSIONWithregardtoitshighgrowthspeed,iffurthertreatedwithmutagens,thestrainmightbeonewith基金项目:浙江省科技计划项H(2007C33068)作者简介:刘美英,女,硕士研究生水通讯作者:应国消,男,教授,硕士生导师Tel:(0571)88871029E-mail:gqying@zjut.edu.cnahighenzymicactivityafterfer

7、mentationoptimization,anditcouldbeusedtothefurtherstudyandappliedtothepreparationofagaraseforagaro-oligosaccharideproductioninindustry.KEYWORDS:agarase-producingbacteria;agarase;isolation;screening琼胶(agar)是一种从海洋红藻屮提取得到的多糖,其在食品、医药卫生等行业已有悠久的应用历史,但由于琼胶黏度高,水溶性低,

8、不易被吸收,因此在应用方面受到很人的限制。而琼胶寡糖(agaiooligosaccharide),即琼胶多糖经水解后聚合度为2〜10的低聚糖,又称琼胶低聚糖,主要由琼二糖的重复单位连接而成,水溶性好,有利于人体吸收,大大提高了其应用价值,琼胶寡糖具有较强的抗癌[习、抗氧化84】、抗炎25】及抗病毒H’S等活性,是一种极具开发潜力的低聚糖。琼胶酶能降解琼胶生成琼胶寡糖,与琼胶的化学降解和

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