毕业论文（设计）-人参药材DNA条形码鉴定研究

《毕业论文（设计）-人参药材DNA条形码鉴定研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、学号：2008032035学位论文人参药材DNA条形码鉴定研究指导教师姓名：申请学位级别：学士专业：生物技术论文答辩口期：2012年5月30口牡丹江师范学院1引言12实验材料与方法22.1样品采集22.2试验方法3221基因组DNA提取32.2.2PCR扩增和测序42.2.3方法学考察53.结果与分析53.1数据处理53.1.1序列拼接53.1.2ITS2序列峰图53.1.3序列比对63.2ITS2条形码consensus序列63.3不同产地人参种内序列比对及特征描述6参考文献10致谢11人参药材DNA条形码鉴定研究摘要：应用ITS2序列建立了人参药材的DNA条形码鉴定方

2、法，比较了人参根、叶、花和粉未的ITS2序列，同时分析了来自全国主产区及上海和香港药店的人参样品，结果表明该方法能简便、快速地鉴别人参约材。关键词:ITS2；人参;鉴定StudyofIdentificationofPanaxginsengbyDNABarcodeAbstract：TheITS2sequencewasusedtoestablishtheDNAbarcodeidentificationofPanaxginseng・TheITS2sequencesoftheroot,leaves,flowersandpollenofPanaxginseng,andthePana

3、xginsengsamplesfromthemainproducingareasandthepharmacyinShanghaiandHongKonghasbeenanalysisedsimultaneously.TheresultsshowthatthemethodcaneasilyandquicklyidentifyPanaxginseng.Keywords：ITS2;Panaxginseng;identification1引言人参（Pqmxginseng）为五加科人参属植物和干燥根，人参具补气、固脱、生津、益智、安神的功效叫系名贵中药材，因补虚治病效果显著，临床应用

4、日趋广泛⑵。已发现的人参活性成分主耍有人参皂昔、人参多糖、挥发汕、氨基酸和多肤等儿大类。植株高达60cm,主根肥大，肉质，圜柱状，常分枝；须根长，有多数小虎状物，根茎上有茎痕，有时生数条不定根；茎直立，绿色，细圆柱形，光滑无毛。叶轮生于茎端，数目依生长年限而不同；总花梗由茎端叶柄中央抽出，长约7-20cm,顶生伞形花序；浆果状核果，肾形，成熟时鲜红色，每室含种子1枚。种子白色，扁平圆卵形，一侧平截。花期6-7月，果期7-9月。人参性喜阴凉，多长于海拔数百米的茂密针叶阔叶混交林或杂木林下，主要分布于黑龙江、吉林、辽宁等省和河北省的北部深山屮。现多为人工栽培，播种期分春播（4

5、月下旬至5月上旬）、夏播（7月屮旬至8月下旬）和秋播（9月下旬至11月下旬），采集是在每年的9月份，采挖生长5-6年以上的人参，用镐细心的刨起，防止断根和伤根，去掉泥土，再行加工，即为商品人参⑶。药材市场中混伪品较多⑷，这就需要寻找到一种稳定可靠的方法鉴定人参药材。小药鉴定是研究小药品种、质量，制定中药标准，寻找和扩大药源的前提和基础。中药四大传统鉴定方法为基原鉴定、性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定。传统鉴定方法的理论基础建立于分类群的性状特征分析，这些性状特征是与环境紧密相关的表现型。从分了遗传学角度来看，物种表现型的茅异归根结底应追溯到基因型的差异，即在DNA序列上的差异

6、。因此，对基因组序列差异的比较研究无疑为植物分类和鉴定提供了本质依据。随着生命科学不断取得重大突破，分子生物学鉴定方法应运而生，该方法应用DNA分子标记技术鉴定中药原植物及其药材和饮片，取得了快速发展。2010年版《中华人民共和国药典》亦将PCR技术作为乌梢蛇和薪蛇的标准鉴定方法。常用的植物DNA分子标记技术有RFLP,RAPD,SSR,ISSR,AFLP等⑸。DNA分子标记可以弥补和克服传统鉴定方法的一些缺陷和难题。然而，每一种分子标记技术都有其自身的特点和应用范围，存在通用性低、没有国际应用平台、不适于推广等缺点。DNA条形码（DNAbarcoding)技术是分子鉴定

7、的最新发展，即通过比较一段通用DNA片段，对物种进行快速、准确的识别和鉴定，是近年来生物分类和鉴定的研究热点，在物种鉴定方面显示了广阔的应用前景。DNA条形码鉴定技术具有几大优势：(1)只需选用一个或少数几个基因片段即可对某个属、科甚至几十个科的绝大部分物种进行准确鉴定；(2)鉴定过程更加快速，可以在短时间内鉴定大量样本；(3)重复性和稳定性高；(4)实验过程标准、操作简单，更易实现物种鉴定口动化；(5)可有效缓解分类鉴定人才缺乏的现状；(6)可通过互联网和信息平台对现有物种序列信息进行集中统一管理，并可实现共享⑹。近年来，D