孕马尿中结合雌激素含量测定及其随孕期变化趋势分析

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1、孕马尿中结合雌激素含量测定及其随孕期变化趋势研究研究生:木拉塔力•克力木导师:高晓黎教授摘要目的:建立孕马尿(PregnantMareUrine,PMU)屮结合雌激素(ConjugatedEstrogen,CE)成分的HPLC(HighPerformanceLiquidChromatography)含量测定方法,指导CE原料药质量控制;定期测定孕马不同孕期尿液中CE含量,掌握孕马尿雌激素分泌规律,比较不同品种,不同年龄,不同地区孕马尿中CE含量,为孕马尿采集管理规范提供科学依据。方法:1)采用HPLC同时测定孕马尿中雌酮硫酸钠(Sodi

2、umEstroneSulfate,ESS)、马烯雌酮硫酸钠(SodiumEquilinSulfate,EQS)和17a■双氢马烯雌酮硫酸钠(Sodium17a-DihydroequilinSulfate,17a-DHEQS)的含量。2)孕马怀孕5月至产驹连续采集40兀个体孕马尿和1500匹孕马混合尿,分析尿液中CE含量与孕马孕期、年龄、品种、生长环境等因素的关系。结果:1)经方法学验证,所确定的孕马尿中CE含量测定方法专属性强,准确可靠,可有效控制孕马尿的质量。2)孕马怀孕22周左右尿液中CE含量最高,此后逐渐下降,到产驹前后降至最低值

3、;孕马怀孕20周尿液中17a-DHEQS和EQS含量较低,随着怀孕延长逐渐升高,32周左右达到最高水平,怀孕后期逐渐下降。怀孕22周左右尿液中ESS含量较高,此后逐渐降低。哈萨克马与伊犁马在怀孕5-10月尿液屮CE含量没有差异(P>0.05);不同年龄孕马尿中CE含量差异没有统计学意义(P>0.05);新源县不同地区孕马尿中CE含量差异有统计学意义(PV0.05),其中南部地区孕马尿中CE含量比东、四部地区孕马尿CE含量高;群体与个体孕马尿中CE含量变化趋势一致。结论:本课题所建立的孕马尿中CE含量HPLC检测方法准确、可靠,重现性好,

4、可作为结合雌激素原料药质量控制标准;2)怀孕早期尿液中CE含量较低,怀孕中期达到最高值,然后逐渐下降。关键词:孕马尿;结合雌激素;高效液相色谱;不同怀孕期StudiesonquantitativedeterminationandchangingtrendofconjugatedestrogensinpregnantmareurinePostgraduate:MuLaTaLi-KeLiMuSupervisor:Prof.GaoXiaoliAbstractObjectives:ToestablishaHPLCmethodfordetermi

5、nationofconjugatedestrogens(CE)inthepregnantmare'surine(PMU)forqualitycontrolofCErawmaterials;periodicallymeasuringtheCEinpregnantmareurinewithvariousstageofpregnancy,commendthesecretingregulationofCEinPMU,comparethecontentofCEinDifferentlocations,differentage,differentb

6、reedsmareurine,toprovidescientificevidenceforPMUcollectioncriterion.Methods:1)Sodiumestronesulfate(ESS),sodiumequilinsulfate(EQS)andsodium17a-dihydroequilinsulfate(17a-DHEQS)inPMUweredetectedbyHPLC-2)Urinecollectionsweremadefromfortyindividualpregnantmaresand1500groupedp

7、regnantmaresfromthe20weekofpregnancyuntilparturition,estrogensweredetectedbyHPLC,adefinitivecomparisonwasmadetherelationshipbetweenurinaryestrogensandmare'spregnancy,age,breedandenvironment.Results:1)ThemethodofanalyzingCEinPMUisaccurateandhighlyspecific,whichcancontrolt

8、hePMUqualityeffectively.2)ValuesfortotalestrogensinPMUreachedapeakaround22weeksanddeclinegraduallytowar

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