从孕马尿中提取分离结合雌激素方法探究进展

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1、从孕马尿中提取分离结合雌激素方法探究进展【关键词】结合雌激素；孕马尿；提取分离；研究进展结合雌激素是从孕马尿中提取的一种天然混合雌激素。结合雌激素类药物主要用于激素替代疗法（HormoneReplacementTherapy，HRT），用于缓解任何雌激素不足的临床症状，治疗和预防女性生理或人工绝经后出现的更年期综合症，能够预防和治疗骨质疏松症和冠心病。孕马尿中的化学成分复杂，要从孕马尿中提取分离有效成分，即结合雌激素，必须要借助于不断发展的提取分离技术，然而提取分离技术的发展过程往往也是提取设备以及分离材料多元化、现代化的过程。从20世纪3

2、0年代至今，结合雌激素的提取分离研究一直是国内外的研究热点，已有大量的专利公开和文献报道。本文就前人所做的关于结合雌激素提取分离的研究和工作进行以下总结。1孕马结合雌激素提取与分离方法研究进展1.1液-液溶剂萃取法液-液溶剂萃取法是利用提取物中各成分在两种互不相溶的溶剂中的分配系数的不同而达到分离的方法[1]。1938年，SchachterB与Marrian7GF[2]等人采用溶剂萃取法从孕马尿中分离出了硫酸盐结合雌激素。2004年4月15日GerlingKlaus-Guenter和BanIvan[3]等人公开了一种利用液-液提取系统获得天

3、然结合雌激素并同时去除非结合态的亲脂性化合物，如：非结合态类黄酮，非结合态异黄酮以及非结合态甾体类化合物。1.2沉淀法沉淀法是在天然产物的提取物中加入某些试剂使其析出其中某种或某些成分，或析出其杂质，产生沉淀，以获得有效成分或去除杂质的方法[1]。RussellE，Marker，[4-5]等人于1937～1938年间研究了孕马尿中孕激素和尿甾激素及其衍生物。他们采用了古老而又经典的沉淀结晶法分离出除了雌激素以外的孕二醇，孕二酮，别孕二醇等尿甾激素。1.3柱分离法1.3.1大孔吸附树脂的应用大孔吸附树脂[1]是20世纪60年代初开发出的一类新

4、型高分子分离材料，它是一种高聚物吸附剂，根据其孔径、比表面积及构成类型分为许多型号。1967年H.LeonBradlow[6]等人用AmberliteXAD-2类大孔树脂从孕马尿中提取结合雌激素。但是该树脂对结合雌激素的吸附能力较低。1973年l0月30日公告的ThompsonL[7]美国专利3769401提出使用Dowex1-X2-Cl以从尿液中提取结合雌激素，Dowex1-X2-C1是一种含有季铵官能团的强碱性阴离子交换树脂，该季铵官能团附着到苯乙烯二乙烯苯共聚物上。71998年3月3日公告的Ivan，Ban[8]等人的美国专利5723

5、454，公开了一种方法，即通过混合物的固相提取，以Rohm&Haas制造的非离子半极性大孔交联聚丙烯酸酯树脂，从孕马尿液中获得含结合雌激素天然混合物的提取物的方法。2001年8月15日公告的赵文军[9]等人的中国专利CN1308083，公开了应用一种新型含有氰基的极性大孔网状吸附树脂从PMU中提取结合雌激素的方法。2002年11月27日公告的宋瓦拉帕[10]等人的中国专利CN1381240A，公开了一种利用非离子半极性的大孔树脂从孕马尿中获得结合雌激素的粗提取物的方法。2004年9月8日公告的周涛，王永利[11]等人的中国专利CN15267

6、21，公开了一种利用含亚砜基的极性吸附树脂从孕马尿中提取分离结合雌激素的方法。2005年2月15日公告的Lomans[12]等人的美国专利US6855704公开了一种方法，该方法中使用了三种大孔树脂分别提取分离孕马尿中不同的结合雌激素成分，三种树脂型号分别为：DowexXAD2，RELITEEXL04，DiaionHP20。2005年5月18日公告的J・安吉索[13]等人的中国专利CN1617734，公开了一种用于孕马尿液中的结合雌激素富集与稳定在固体载体的便携式设备，在马尿收集现场获取天然结合雌激素的混合物。71.3.2反相硅胶的应用19

7、98年9月29日公告的IvanBan[14]等人的美国专利5814624公开了一种方法，即在反相(reverse-phase)(RP)硅胶上，通过混合物的固相提取，从孕马尿液中获得含结合雌激素天然混合物提取物的方法。2讨论早期多步骤液-液提取法具有操作上的诸多不便和不足：如有些有机溶剂与马尿混合后容易发生严重的起泡或乳化现象，液-液提取法的一次提取率较低，往往需要反复萃取才能回收80%以上的结合雌激素；提取设备庞大，设备运行成本高；另外，由于液-液提取法本身的局限，所直接获得的提取物是尿内多种成分和结合雌激素的混合物，结合雌激素含量很低，还

8、残留有很多尿内杂质成分，需要经过十步以上的纯化处理才能满足使用要求；大量使用有机溶剂对环境有严重的污染等。目前正在研究发展的多种固相提取法逐渐克服了液-液提取带来的大部分不足。但