《探究叶绿体中色素的提取和分离》

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1、探究叶绿体中色素的提取和分离九江县第一中学陶伟华332100一、教学目标1•基木知识与技能：比了解叶绿体中的色素组成、颜色。b.了解纸层析法的原理。2.方法与过程：通过实验掌握叶绿体屮色素的捉取和分离的基本操作方法。3•情感与态度培养学生严谨的科学态度，学会根据实验的现象和结果，进行分析，推出结论。实验结束完成整理工作。二、实验重点与难点重点：初步掌握提取和分离叶绿素中色素的方法、探索叶绿素色素在滤纸上层析的情况。难点：分离叶绿体色素屮绿叶细线的画法。三、教学用具新鲜绿色叶片、滤纸、研钵、漏斗、脱脂棉、毛细管、剪刀、试管、量筒、层析液、无水乙醇、石英沙、碳酸钙四、教学方法师生合作（以学生操作为

2、主、教师讲解为辅）五、课时安排：2课时六、教学过程：1.课题引入教师由光合作用引入叶绿体。根据板图逐一复习显微镜的各部分结构名称。2.复习叶绿体的结构提问：与光合作用有关的色素在哪？教师讲述叶绿体中的四种色索名称、颜色。在滤纸上扩散情况由学生实验探究。引入叶绿体中色素的提取和分离的方法——纸层析法。3.实验原理和目的教师简明讲述实验原理和目的：a.叶绿体的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以可用无水乙醇提取叶绿素屮的色索。b.叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快。溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢4.叶绿体中色素的提取和分离的具体操作步骤a.提取绿色叶片小的

3、色素：告诉学生称多少叶子、放些什么试剂、研磨的方法、过滤注意：①去除主叶脉%1石英砂一一充分研磨%1碳酸钙一一保护叶绿素%1分步加无水酒精——减少挥发，充分提取叶绿素%1过滤后的滤液要避光保存。b.分离叶绿体中的色素：⑴制备滤纸条：取干燥滤纸，将滤纸剪成如教材67页图4-16所示的滤纸条。在距滤纸条底端1.5cm处用铅笔轻轻画一根横线。⑵画滤液细线（难点）：用毛细管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画一条细而直的滤液细线。划线是不能太慢、不能停顿。待滤液干后，在反复多次。⑶分离色素：注意：不能让滤液细线触到层析液。因此最好用长滴管注入大试管。在层析前要先测量挂钩的滤纸长度，以免放入到试管后，使其卜•

4、端谋入层析液中，使色素溶解于层析液造成实验失败。四氯化碳是易挥发性溶剂，因此实验时要用木塞塞紧管口。5•观察实验结果、总结知识点学生观察实验结果、探究叶绿体色素扩散情况。6.问题研究比四种色索在滤纸上扩散速度，从快到慢的顺序、颜色？请一名同学上黑板画出。b.四种色索中含量最多的是c.四种色素中含量最少的是d・滤纸上距离最近的两条色素带7.结束课堂提醍学生整理实验桌、清洗自己的手、完成实验报告。七、对实验的改进1.实验材料的改进用韭菜，萝卜叶，蒿菜，天竺葵代替菠菜。（所得到的实验效果很好，又可以克服菠菜因季节原因，难于取材。）2•捉取液的改进除丙酮外，也可用酒精（无水乙醇）替代，用量相同，结果大

5、致相同。和酒精相比，丙酮有一定毒性，因而不妨换一下。2.层析液的改进通过多次实验，我发现石油醸：丙酗（10:1）配制而成的层析液分离色素的时间短于课木耍求的，且省去了有毒的苯试剂，是取代课木耍求的一种较好的层析液。3.过滤制滤液的改进取消漏斗基部放脱脂棉这一步，而用3〜4层纱布包裹充分研磨过的菜叶，通过漏斗将汁液挤于试管屮，得滤液。因研磨过的菜叶自然过滤很难得到滤液。实验证明，改进后较改进前实验效果明显。4.划滤液细线的改进a.用较薄且干净的盖玻片或議料胶片，沾取色素提取液印在滤纸条上的方法，色素液晾干后再重复几次，印出的色素液线（最佳宽度为1〜2mm）又细又齐又匀，比用毛细吸管省时省力，层析

6、分离后的效果很好。b.改用牙签划滤液细线替代毛细吸管，克服毛细细管易断的缺陷。5.分离色素实验方法的改进取平而培养皿1只，将一干燥的圆形定性滤纸盖在培养皿屮，在圆形滤纸（直径为11cm）中央滴上2-3滴色索提取液，静置约lmin,在滤纸的屮央点成圆形的色素斑。然后依次滴3〜5滴层析液，每滴中间间隔30s左右，然后盖上培养1UL盖，几分钟后，观察结杲会得到近似同心圆的4个色素环，由内而外分别是黄绿色、蓝绿色、黄色和橙黄色，实验效果非常明显。此实验方法关键冇两点需注意:一是几次滴液体要在同一点上，否则不能形成圆环;二是要掌握好滴层析液的量和时间，否则会影响效果，甚至失败。2.实验方法的改进（设立对

7、照实验）设立一个空白对照组，在其他条件完全相同的情况下，一个画滤液细线，而另外一个不画，结果进行对照，消除“不同色带是层析液在滤纸上扩散后留下的颜色”的怀疑。这样同时也培养严谨的实验作风，体现生物学科研的基本原则。为了强调不要使层析液浸没滤液细线的意义，也可以设立这样一个浸没滤液细线的对照组，结果会发现色素被溶解下来，而无法分离