叶绿体中色素的提取和分离

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1、叶绿体中色素的提取和分离2005-3-201．实验目的(1)初步掌握提取和分离高等植物叶绿体色素的方法。(2)了解叶绿体结构，验证叶绿体色素的种类和各种色素的颜色。2．实验原理叶绿体中的色素分为两大类，一类为叶绿素，包括叶绿素a(呈蓝绿色)和叶绿素b(呈黄绿色)，主要吸收太阳光中的红光和蓝紫光，另一类是类胡萝卜素，包括胡萝卜素(呈橙黄色)和叶黄素(呈黄色)，主要吸收蓝紫光。色素吸收的光能用于光合作用。因为光合色素位于叶绿体的片层结构中，因此需要破坏叶绿体的结构，才能将色素释放出来。需要剪碎绿叶，并用二氧化硅研磨，用丙酮将色素溶解，来提取各种色素，同时加入碳酸钙，调节液体的pH，以防叶绿体

2、色素被破坏。叶绿体色素溶于有机溶剂形成叶绿素液，利用四种色素在层析液中溶解度不同，因而随层析液在滤纸上扩散速度不同，使四种色素分离开来。其中，胡萝卜素在丙酮中溶解度最高，速度最快，叶黄素和叶绿素a次之．叶绿素b溶解度最低．扩散得最慢。3．实验步骤及方法（1）．将5g新鲜的绿色菠菜叶片剪碎，放入研钵中，并加少量二氧化硅和碳酸钙，再加丙酮2mL，快速充分地进行研磨。(2)将研磨液倒入小玻璃漏斗中进行过滤(漏斗基部塞有少许脱脂棉)，将滤液收集到一个小试管中，用棉塞将试管口塞紧。(3)将一块预先进行过干燥处理的定性滤纸剪成10厘米长、1厘米宽的滤纸条。将滤纸条一端剪去两角。并在距这端1厘米处用铅

3、笔画一横线。(4)用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔处小心均匀地划出一条滤液细线(越细，效果越好)。待滤线干燥后，再重复划2—3次。(；)将3mL层析液倒人烧杯中，将滤纸条』：画有滤液细线的一端朝下，微斜地靠着烧杯内壁轻轻插入到层析液中，注意不要使层析液没过滤纸上的滤液细线，然后用培养皿盖上烧杯。(6)几分钟后，会观察到滤纸条上从上到下依次出现四条色素带：胡萝卜素(橙黄色)；叶黄素<黄色)；叶绿素a(蓝绿色)叶绿素b(黄绿色)。4．注意事项(1)层析时，滤液细线不能浸入层析液中。(2)色素见光易分解，实验后滤纸条应避光保存。5．思维拓展(1)层析法是利用不同物质的溶解性分离物质的方法。(2)

4、利用纸层析法，将物质分离的同时。还可确定不同物质成分的比例、颜色。含量越多，层析带越宽；物质在层析液中的溶解度越大，溶解速度越快，在滤纸上的扩散速度越快，层析带位置越高。例1．做色素提取和分离实验的正确装置是图中()答案——D例2．在圆形滤纸的中央，滴上叶绿体的色素滤液进行色素分离，可看到近似同心环状的四个色素圈，排列在最外的一个呈<)A。蓝绿色B。黄绿色C．黄色D．橙黄色答案——D例3．在做植物实验暗室内，为了尽可能地降低植物的光合作用的强度，最好用()A。红光灯B。绿光灯C。白炽灯D。蓝光灯答案——B例4．下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是()A。提取高

5、等植物叶绿体中的色素B。用纸层析法分离色素C。验证叶绿体中所含色素的种类D。了解各种色素的吸收光谱答案一一D例5。“叶绿体中色素的提取和分离实验”(1)在“叶绿体色素的提取和分离实验”中，将叶绿体色素进行分离的方法名称是：。(2)某学生在实验过程中将划有滤液细线的滤纸条(已重复几下划线)插入层析液，几分钟后取出观察，发现在滤纸条上无色素分带现象，而其他用同一滤液做实验的同学的滤纸条上却色素分带明显，其实验失败的原因最可能是·(3)观察叶绿体色素的荧光现象，可将盛有叶绿体色素溶液的试管，让光线照射。如果置叶绿体色素溶液于光下，则呈绿色；如置于光下，则溶液呈现红色。答：．(1)纸层析法(2)

6、滤液细线浸入层析液，被层析液溶解(3)透射反射练习：D1．下列不属于叶绿素功能的是A.吸收太阳光能B.利用光能使水分解C.利用光能合成ATPD．固定和还原二氧化碳C2．在进行叶绿素提取和分离的实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是A.滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响结果B.滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散C.色素会溶解在层析液中而使结果不明显D.滤纸条上的几种色素会混合起来D3．下列哪组色素是叶绿体和有色体都含有的A.叶绿素和类胡萝卜素B.叶绿素和叶黄素C．叶绿素和胡萝卜素D．叶黄素和胡萝卜素(D)这里考的是关于质体的知识点。质体是存在于真核细胞内的一种细胞器。质体由两层薄膜包围

7、，可以随细胞的生长而增大，是植物细胞合成代谢中最主要的细胞器。根据质体内所含的色素和功能的不同，质体可分为白色体、有色体和叶绿体。白色体不含色素，分布在植物体内不见光的部位，可以贮藏淀粉、蛋白质和脂肪。有色体中含有叶黄素、胡萝卜素和花青素，分布在果实和花瓣的细胞里，使果实和花瓣呈现黄色或黄橙色。叶绿体中含有叶绿素a、叶绿素b、叶黄素和胡萝卜素。因此，有色体和叶绿体共有的是叶黄素和胡萝卜素。）4．把下列药物选人相应的作用项内①保护叶绿