叶绿素皂化实验的改进研究

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1、叶绿素皂化实验的改进研究张鸿燕（四川省江油中学,四川江油6321701）摘要：叶绿素皂化实验是验证叶绿素皂化性质的重要实验，是植物生理实验课程的重要内容。本实验在操作屮易在试管底部出现口色混浊，不利于实验现象的观察。本文针对此现象进行改进，以接骨草为植物材料，主要讨论不同用量的试剂对皂化反M屮白色混浊的影响。结果发现，使用20%K0H甲醇溶液2.0ml,蒸馆水0.5ml,苯2.5ml,可以使叶绿素皂化反应获得最佳的分层效果，试管底部白色混浊量最少。关键词：叶绿素；皂化AImprovementResearchInSap

2、oniHcationOfChlorophyllBy：ZhangHongyan（jiangyoumiddleschool,jiangyou637002tchina）Abstract:Chlorophyllsaponificationexperimentisanimportantworktovalidatethecharacterofchlorophyllsaponification,anditisanimportantsectioninthecourseofplantphysiologicalexperimenttoo

3、.Inthisexperiment,thereisalwayswhitecloudinessinthebottomofthetest-tube,anditisnotconducivetooberservetheexperimentresult.Inthisexperiment,weusesambucusthunbergianatooberservetheeffectintheconditionofdifferentdosagereagent.Finally,wefindthatitisthebestwayforthe

4、chlorophyllsaponificationexperimentwithusing20%KOHmethanolsolution2・0ml,distilledwater0.5ml,benzene2.5ml,andthereistheleastwhitecloudinessinthebottomofthetest-tube.Keyword:Chlorophyll；saponification1前言叶绿素是一种极不稳定的化合物。它是一种二竣酸一叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的双竣酸酯，故可与碱发生皂化反应，生成醇（甲醇和叶

5、绿醇）和叶绿酸的盐，产生的盐能溶于水中，可用此法将叶绿索与胡萝卜索分开，这称为叶绿索的皂化实验⑴。叶绿素皂化实验是研究叶绿素理化性质的重要内容，也是学生深入了解叶绿体色素性质的重要实验。叶绿素皂化性质在叶绿素盐的工业生产中也有重耍的应用，如以芥蓝叶制取叶绿素铜钠盐的工艺⑵，以水葫芦叶制取叶绿素锌钠盐的新工艺⑶。在叶绿素性质研究中，其皂化性质也是分离叶绿索的基础，如水溶性茶绿色索的提取和性质研究⑷和竹叶叶绿索的性质研究⑸中都对叶绿素皂化条件进行了精确的优化。叶绿素皂化实验在中学课程和实验中是非常重要的教学安排。大部分中

6、学依据叶绿素是二竣酸一叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的一种极不稳定的化合物复杂酯，故可与碱起皂化反应而生成醇（甲醇和叶绿醇）和叶绿酸的盐，产生的盐能溶于水中，将叶绿素与胡萝卜素分开。利用菠菜叶片，20%K0H-甲醇溶液、苯、蒸憾水、试管架、滴管、亥帔试管和刻度吸量管。通过以下方法进行皂化实验：（1）在做过荧光现象观察的叶绿体色素乙醇提取液试管中加入1.5ml20%KOH-甲醇溶液，充分摇匀；（2）片刻后，加入5ml苯，摇匀，再沿试管壁慢慢加入1-1。5ml蒸憎水，轻轻泯匀（勿激烈摇荡），于试管架上静置分层。若溶液不分层，则

7、用滴管吸取蒸憎水，沿试管滴加，边滴加边摇动，直到溶液开始分层时，静置。可以看到溶液逐渐分为两层，下层是稀的乙醇溶液，其中溶有皂化的叶绿索a和b（还有少量的叶黄索）,上层是苯溶液，其屮溶有黄色的胡萝卜素和叶黄素。闾本实验小选用的实验材料是菠菜叶片，实验试剂为20%的KOH-甲醇溶液、苯，实验时间和温度并未提出要求。在此实验中常出现的问题是皂化反应之后加入苯，其分离效果并不明显或根本不分层，溶液底部出现完全相似的片色浑浊。常世明以《植物生理学》（实验教材名称）的叶绿素皂化实验⑺为基础，对叶绿素的皂化反应进行了改进，指出皂

8、化反应部分常出现一种“异常”现象：滴加蒸憾水分层后的溶液，下层的皂化叶绿素的乙醇溶液小常出现乳白色絮状浑浊，其位置多在底部•该浑浊物虽然与皂化反应基本无关，也叮以在长时间静置后自动消退，但影响实验现象美观，所以应尽量避免此类无意义的伴生现象发生。常世明主耍从蒸镭水考虑，提出对蒸憾水进行改进，以避免乳白色絮状浑浊在试管底部产生，如：用1%〜3%的