2019-2020年高考生物一轮复习 专题三 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取

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1、2019-2020年高考生物一轮复习专题三DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取1.现代生物学已向两个方面发展，宏观研究的水平为生态系统水平，微观研究的水平为分子水平。对于分子的研究，其物质的提取和分离显得尤为重要。下面是物质提取和分离的相关问题，请回答：(一)DNA分子的提取和分离(1)在提取菜花细胞中的DNA时，采用的是研磨法，为什么不能像用鸡血那样，用蒸馏水使其破裂？(2)在提取实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液，说明其作用：①2mol/LNaCl溶液：____________________；②0.14mol/LNaCl溶液：________________

2、。(3)在整个操作过程中，每100mL血液中加入3g柠檬酸钠的作用是__________。(4)鉴定DNA所用的试剂是__________。(二)血红蛋白的提取和分离(1)在血红蛋白的提取和分离过程中：粗分离、纯化和纯度鉴定时，都会用到缓冲溶液，其作用是__________。(2)在洗脱过程中，对洗脱液的流速要求稳定的目的是__________。(三)不同的化学物质，其理化特性不同，提取方法也有所差异，如胡萝卜素不溶于水，易溶于__________，因此可以用__________方法进行提取。答案：(一)(1)植物细胞具有细胞壁，不会吸水涨破，只有通过研磨，才能释放出

3、DNA。(2)①溶解DNA分子，过滤并除去不溶于NaCl溶液的杂质　②使DNA分子析出，过滤并除去溶于NaCl溶液中的杂质　(3)防止出现凝血　(4)二苯胺(二)(1)维持血红蛋白环境中pH的稳定(2)维持操作压的稳定(三)有机溶剂　有机溶剂萃取解析：(一)(1)DNA分子提取中理想的材料为富含DNA的细胞，动物中鸡血红细胞具有细胞核，放入蒸馏水中会使细胞涨破释放出DNA，而植物细胞中含有细胞壁不能因吸水而涨破。(2)实验过程中两次用到NaCl溶液，初次为2mol/L的NaCl溶液，用于溶解DNA，而0.14mol/L的NaCl溶液会使DNA析出。(3)为了防止凝血现

4、象的发生应加入柠檬酸钠。(4)鉴定DNA所用的试剂为二苯胺试剂。(二)(1)为保持蛋白质的生理活性，防止变性从而用缓冲液保持pH的恒定。(2)洗脱液的流速变化过快，易使操作压变化过大，从而使洗脱物质的下降速率变化过大，导致分离纯化不充分。(三)胡萝卜素的化学性质比较稳定，不溶于水，易溶于有机溶剂。因此可以用有机溶剂作萃取剂，以萃取的方法来提取。2．在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析。PCR技术能快速扩增DNA片段，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝，有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题：　　　　　　　　　

5、　(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ，并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记，请分析循环一次后生成的DNA分子的特点：__________，循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为__________。(4)PCR反应过程的前提条件是__________，PCR技术利用了DNA的__________原理解决了这个问题。(5)在对样品DNA分析过程中发现，DNA掺杂着一些组蛋白，要去除这些组蛋白可加入的物质是__________。答案：(1)5′—G—A

6、—OHHO—A—G—5′5′—G—G…T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′　　　　　　72℃(2)3′—C—C……A—G—5′　5′—G—G……T—C—3′　5′—G—G……T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′(3)每个DNA分子各有一条链含32P　1/2n(4)DNA解旋　热变性(5)蛋白酶解析：(1)DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链，所以引物就提供了5′端，子链延伸方向为5′→3′，引物Ⅰ与b链部分碱基互补，引物Ⅱ则与a链部分碱基互补，且连接到a链的3′端，故引物Ⅱ的结构为5′—G—A—OH，复性结果为：5′—G—G……T—

7、C—3′HO—A—G—5′(2)经过一次循环后，产生的两个DNA分子分别含有引物Ⅰ和引物Ⅱ。(3)由于作为原料的四种脱氧核苷酸被32P标记，所以新合成的子链均含有放射性，一次循环后的两个DNA各有一条链含32P。若复制n次，产生子链共2n×2，其中只有DNA母链不含32P，则其所占比例为2/(2n×2)＝1/2n。(4)DNA复制是以两条母链为模板，按照碱基互补配对原则进行的，因此，首先要解旋，使两条母链的碱基暴露出来，才能按照碱基互补配对的原则把相应的碱基一个个地连接起来。只有解旋后再以母链为模板合成一小段引物，引物才起作用。DNA分子在80～10