幼鼠颞叶癫痫模型匹罗卡品致痫后潜伏期末海马的形态学以及蛋白表达谱变化

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1、，z(6)：／／www．cs啪ea-orsjh脚一-netDOI'．IO．3969／j．5ssn．1672—7347．2013．06．003http：／／xbyx．xysm．,net／xbwk／fileup／PDF／201306560．pdf幼鼠颞叶癫痫模型匹罗卡品致痫后潜伏期末海马的形态学以及蛋白表达谱变化吴丽文，尹飞，彭镜，何芳，张慈柳，邓小鹿，王国丽(中南大学湘雅医院儿科教研室，长沙410008J'[摘要】目的：研究发育期大鼠慢性内侧颞叶癫痫(mesialtemporallobeepilepsy，MTLE)模型潜伏期末海马的形态学以及蛋白表达谱变化，揭示慢性MTLE发病机制。方法：

2、建立氯化锂一匹罗卡品诱导的发育期大鼠MTLE模型，取致痫后3周末的对照组(=20)和MTLE模型组(n=20)大鼠为研究对象，尼氏及Timm染色观察海马神经元丢失和苔藓纤维出芽情况；采用二维凝胶电泳(twodimensionalgelelectrophoresis，2-DE)结合质谱分析对两组间的差异表达蛋白质进行鉴定；Western印迹对部分差异表达蛋白进行印证。结果：MTLE模型组海马内可见明显的海马神经元丢失和苔藓纤维出芽；建立了发育期大鼠慢性MTLE模型潜伏期末的海马蛋白质2-DE图谱，共鉴定了差异表达蛋白质31个，分别属于神经递质和突触发生相关的蛋白、细胞骨架蛋白、细胞连接蛋白

3、、能量代谢和线粒体功能蛋白、生物活性酶类、细胞结构相关蛋白质以及信号转导相关蛋白质等；Western印迹对部分蛋白水平检测的结果与蛋白质组学结果一致。结论：Dynamin一1，neurogranin和ubiquitin等一系列突触相关的蛋白表达异常，可导致突触重构、异常苔藓纤维增生和异常神经兴奋环路的形成，是MTLE发病机制中至关重要的环节。【关键词】内侧颞叶癫痫；海马；潜伏期；发病机制；蛋白质组学Morphologyanddifferentiallyexpressedproteinsinhippocampusofmesialtemporallobeepilepsymodelofl●mm

4、at．Urerat。S●na■UCed■D■yDl●l●oCarDi●neWULiwen，YINFei,PENGJing，HEFang，ZHANGCiliu,DENGXiaolu，WANGGuoli(DepartmentofPediatrics,XiangyaHospitaljCentralSouthUniversity,Changsha410008,China)ABSTlUTObjective：Toexaminethechangesofmorphologyanddifferentiallyexpressedproteinsinhippocampusatthelatentstageofc

5、hronicmesialtemporallobeepilepsy(MTLE)inimmaturerats，andtoexploretheglobalmechanismofchronicMTLEatanewpoint．收稿日期(Dateofreception】：2012．"09—19作者简介(Biography)：吴丽文，博士，主治医师，主要从事小儿神经系统疾病的研究。通信作者(Correspondingauthor)：尹飞，Emaihyf2323~hotmail．com基金项目(Foundationitems)：国家自然科学基金青年基金(811008461)；中南大学青年教师助推项目(2

6、011QNZT152)。IbisworkwassupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChinaYouthFundPr0ject(81100846)andYoungTeachersofCentralSouthUniversityBoosterProject，P．R．China(2011Q．NZT1S2)．幼鼠颞叶癫痫模型匹罗卡品致痫后潜伏期末海马的形态学以及蛋白表达谱变化吴丽文，等Methods：MTLEmodelsofimmatureratswereinducedbylithium—pilocarpine．Theratswered

7、ividedinto2groupsrandomly：acontrolgroup(n=20)andanMTLEmodelgroup(n=20)．Atthelatentstage,nisslandTimmstainingwereperformedtoevaluatethecelllossandmossyfibersprouting．Thediferentiallyexpressedproteinswereseparatedby2-dim