dixdc1与disc1在匹罗卡品致痫小鼠模型海马结构中的动态表达变化

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1、中南大学博士学位论文DIXDC1与DISC1在匹罗卡品致痫小鼠模型海马结构中的动态表达变化姓名:向田申请学位级别:博士专业:神经病学指导教师:肖波201205』∑生剑堂僮途塞虫塞擅噩摘要目的研究DIXDC1(Dishevelled—Axindomain—containing1)与DISCl(Disrupted—in-Schizophrenia1)在匹罗卡品致痫小鼠模型海马结构中的动态表达改变,探讨其在颞叶癫痫发病中的作用。方法制备匹罗卡品致痫C57BL/6成年小鼠模型67只,对照组小鼠56只,取其脑海马

2、结构为研究对象。采用免疫组化观察DIXDCl在癫痫模型小鼠SE后3天、7天、14天及28天海马结构中的表达分布、通过Westemblot、Real.timePCR方法半定量检测DIXDC1、DISCl蛋白和Dixdcl、Mcm2mRNA在海马结构中各时间点的表达变化。通过SPSSl6.0软件对癫痫模型小鼠海马结构中DIXDCl和DISCl的蛋白表达改变、Dixdcl和Mcm2mRNA的转录水平进行相关性分析。结果1.免疫组化显示DIXDCl表达于海马齿状回颗粒细胞层神经元胞浆内。癫痫模型小鼠SE后各时间

3、点海马结构中DIXDCl阳性表达与对照组相比显著下降(P

4、DIXDCl的蛋白表达、Dixdcl与Mcm2mRNA的表达改变均呈正相关性。结论DIXDCl和DISCl在匹罗卡品癫痫小鼠模型中均参与了癫痫的发生,两者在癫痫发生过程中可能存在关联。关键词癫痫,海马,DISCl,DIXDCl,神经干细胞ABSTRACTObjectToinvestigatetheexpressiontrendsofDIXDC1(Dishevelled-Axindomain—containing1)andDISC1(Disrupted—in—Schizophrenia1)inthehip

5、pocampusformationofpilocarpine—inducedepilepticmiceandexploretheirpotentialrolesinepileptogenesis.Methods67epilepticC57BL/6miceand56controlmicewererecruitedinthepresentstudy.IntraperitonealInjectionofpilocarpinewasappliedtogetepilepticmodels.Immunohistoc

6、hemistrywasperformedin3days,7days,14daysand28daysafterSEtoobservethelocationofDIXDC1intheNppocampusformationofpilocarpine—inducedepilepticmice,WestemblotandReal-timePCRwereperformedatdifferenttimepointstoexaminetheexpressionofDIXDC1andDISC1proteinandtran

7、scriptionofDixdclandMcm2mRNAineachgroup.CorrelationAnalysiswasperformedbySPSS16.0toexaminecorrelationbetweentheexpressionofDISC1andDIXDC1,transcriptionofDixdclandMcm2mRNA.Results1.TheimmunohistochemistystudyshowedthatDIXDC1wasmainlylocatedinthecytoplasmo

8、fneuronsinpyramidalcellsofgranularcellsofdentategyrus.SignificantdecreaseofexpressionofDIXDC1proteinin3days,7days,14daysand28daysaRerSEwasfoundinepilepticmicecomparedwithcontrols(P<0.05).IlI2∑生剑堂僮途塞墓塞翅墨2.Westernblotanalyse

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