论文-实验部分实验论文部分论文实验部分论文部分

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1、同时测定三种氨基酸的同步荧光光谱法研究实验步骤1、缓冲溶液最佳pH的测定rti于同一条件卜•苯丙氨酸荧光强度明显低于酪氨酸和色氨酸，故取具荧光强度最大时的酸度作为待测休系的酸度是合理的。配制苯丙氨酸的标准溶液：1）分别称取10.0098gNaOH、34.0220gKH2PO4于250mL烧杯中，加入适量二次蒸镭水，将烧杯放在超声波清洗器屮震荡溶解，溶解后转移至500mL容量瓶屮，再川二次蒸僻水定容、摇匀，配制成0.5moL/L的溶液，待用。2）MJ0.5moL/LNaOH和0.5moL/LKH2PO4配制pH为6.0、6.8、7.0、7.2、7.5、8.5、10的

2、缓冲液。3）MJImL吸量管从C2（3）中各吸取ImL苯丙氨酸的标准液分别加入到7个10mL容量瓶中，然后分别用步骤4小的7个标准缓冲溶液定容、摇匀，待测定。4）取pH=7.0的一组进行荧光测定，寻找苯丙氨酸的激发波长和发射波长，然后测定七组苯丙氨酸在对应激发波长卜-的荧光强度。5）绘制pH—Fr荧光强度

3、11

4、线，确定缓冲溶液的最佳pH值。2、三种氨基酸荧光光谱的测定设置荧光光谱的测定参数激发和发射狭缝均为5nm,光电倍增管电压为700mV,首先在预设的荧光波长下测定激发光谱，由此获得最大荧光波长，以此波长测定激发光谱，从而获得授大激发波长，最后验证获得的最大激

5、发波长和最大荧光发射波长是否吻合。3、色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸溶液的配制1）色氨酸（简写Trp）用电子犬平准确称取0.05105色氨酸50mL烧杯屮，加入20mL二次蒸饰水，将烧杯放在超声波清洗器屮震荡溶解，溶解完全后，将溶液转移至50mL容量瓶屮用二次蒸馅水定容、摇匀，作为母液A】，并置于冰箱冷藏。用ImL吸量管从A】中移取l.OmL溶液于10mL容量瓶中，用二次蒸谓水定容、摇匀,作为标准液A2,并置于冰箱冷藏。用ImL吸量管从A?中移取l.OmL溶液于50mL容量瓶中，用二次蒸谓水定容、摇匀,作为标准液A3,并置于冰箱冷藏。用ImL吸量管从A3中移取l.OmL

6、溶液于10mL容量瓶中，用pH=7.2的缓冲液定容、摇匀，作为待测溶液。2）酪氨酸（简写Tyr）用电子犬平准确称取0.0452g酪氨酸于250mL烧杯屮，加入1OOmL二次蒸饰水，将烧杯放在超声波清洗器屮震荡溶解，溶解完全后，将溶液转移至250mL容量瓶屮川二次蒸饰水定容、摇匀，作为母液B】，并置于冰箱冷藏。用ImL吸量管从B］中移取l.OniL溶液于100mL容量瓶中，川二次蒸憎水定容、摇匀,作为标准液B?,并置于冰箱冷藏。用ImL吸量管从B2中移取l.OmL溶液于10mL容量瓶中，用pH=7.2的缓冲液定容、摇匀，作为待测溶液。3）苯丙氨酸（简写Phe）用电子

7、犬平准确称取0.0434g苯丙氨酸于50mL烧杯中，加入20mL二次蒸饰水，将烧同时测定三种氨基酸的同步荧光光谱法研究实验步骤1、缓冲溶液最佳pH的测定rti于同一条件卜•苯丙氨酸荧光强度明显低于酪氨酸和色氨酸，故取具荧光强度最大时的酸度作为待测休系的酸度是合理的。配制苯丙氨酸的标准溶液：1）分别称取10.0098gNaOH、34.0220gKH2PO4于250mL烧杯中，加入适量二次蒸镭水，将烧杯放在超声波清洗器屮震荡溶解，溶解后转移至500mL容量瓶屮，再川二次蒸僻水定容、摇匀，配制成0.5moL/L的溶液，待用。2）MJ0.5moL/LNaOH和0.5moL

8、/LKH2PO4配制pH为6.0、6.8、7.0、7.2、7.5、8.5、10的缓冲液。3）MJImL吸量管从C2（3）中各吸取ImL苯丙氨酸的标准液分别加入到7个10mL容量瓶中，然后分别用步骤4小的7个标准缓冲溶液定容、摇匀，待测定。4）取pH=7.0的一组进行荧光测定，寻找苯丙氨酸的激发波长和发射波长，然后测定七组苯丙氨酸在对应激发波长卜-的荧光强度。5）绘制pH—Fr荧光强度

9、11

10、线，确定缓冲溶液的最佳pH值。2、三种氨基酸荧光光谱的测定设置荧光光谱的测定参数激发和发射狭缝均为5nm,光电倍增管电压为700mV,首先在预设的荧光波长下测定激发光谱，由此获

11、得最大荧光波长，以此波长测定激发光谱，从而获得授大激发波长，最后验证获得的最大激发波长和最大荧光发射波长是否吻合。3、色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸溶液的配制1）色氨酸（简写Trp）用电子犬平准确称取0.05105色氨酸50mL烧杯屮，加入20mL二次蒸饰水，将烧杯放在超声波清洗器屮震荡溶解，溶解完全后，将溶液转移至50mL容量瓶屮用二次蒸馅水定容、摇匀，作为母液A】，并置于冰箱冷藏。用ImL吸量管从A】中移取l.OmL溶液于10mL容量瓶中，用二次蒸谓水定容、摇匀,作为标准液A2,并置于冰箱冷藏。用ImL吸量管从A?中移取l.OmL溶液于50mL容量瓶中，用二次蒸谓水

12、定容、摇匀