皮肤肿瘤治疗论文

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1、皮肤肿瘤治疗论文皮肤肿瘤治疗论文预读：摘要:1材料和方法1.1材料石蜡包埋组织标本选自西安交通大学第二附属医院199901/200605病理确诊手术患者.SCC45例，年龄45〜95（平均68.8）岁,男27例，女18例.Bowen病19例，年龄45〜87（平均65.2）岁，男12例，女7例.正常人皮肤10例对照，年龄46〜78（平均62.5）岁，男5例，女5例作鼠抗人MMP9mAb（MAB0245）和CD34mAb（（MAB0034）,免疫组化SP试剂盒（KIT9710）及DAB试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司.1.2方法所有组织均经40g/L甲醛液固定，常规石蜡包埋切片，连

2、续切片5张，厚约4屮n.采用SP法，免疫组化染色程序按试剂盒说明书进行.阳性对照采用自身对照，用PBS代替一抗和二抗进行阴性对照.MMP9和CD34均采用高温高压抗原修复.MMP9结果判定:在不知任何背景资料的情形下，采用双盲法进行判定，以肿瘤细胞膜和/或细胞质出现淡棕黄色颗粒为阳性，并按着色强弱分级:无色为0,浅黄色为1,深黄色为2,棕黄色为3；着色范围以在10x40高倍镜下随机选区5个视野（每个视野记数100个细胞）计数阳性细胞所占的百分数均值:<25%为1,25%〜49%为2,50%为3.上述两项相加为MMP9的表达强度积分:<2为阴性,V3为弱阳性（+）,3〜4为阳性（），

3、>4为强阳性（）.MVD计数参照文献［3-4］方法进行微血管计数,先在低倍镜（MOO）下观察确定血管密度最高处，在&200）视野下选择3个高血管密度区,计算单位视野（x200）平均血管数.单个内皮细胞或内皮细胞簇，均作为一个血管计数,而直径大于约8个红细胞的血管,有较厚肌层的血管以及硬化区的血管不在计数范围内.统计学处理:釆用SPSS10.0统计软件包进行处理，根据资料类型组间比较分别采用方差分析和%2检验,P<0.05为有统计学意义.2结果2」MMP9MMP9阳性改变为细胞质或细胞膜呈棕黄色，偶尔可见细胞核着色,阳性颗粒多呈团块状.正常人皮肤组织中MMP9呈弱阳性表达，主要

4、表达于颗粒层和棘细胞层，真皮层中纤维样细胞、单一核细胞等见阳性染色.BD组织中表皮全层均冇MMP9均匀弥漫表达.SCC中MMP9在癌巢组织弥漫分布，以肿瘤周边表达强烈（图1）MMP9表达在•正常皮肤组、Bowen病组、SCC组依次增高（表1）.MMP9在SCC组中高于Bowen病组织（%2=6.667,P<0.05）,Bowen病组中MMP9高于正常皮肤组（P=0.028,P&It;0.05）.在SCC组中MMP9的表达与患者的年龄、性别、肿瘤组织的病理分级均无关（P>0.05）.表1MMP9在正常皮扶组、Bowen病组和SCC表达（略）2.2MVD计数CD34标记的微血管呈

5、点状分布,血管内皮细胞膜被染成褐色.在SCC组织中微血管形态不规则，部分•血管呈现发芽状，血管分布不均匀，在SCC的边缘区域最为密集，呈簇状（图2）.Bowcn病组织中微血管形态较规则，但分布不均，血管簇偶见.正常皮肤组织内的微血管形态规则，分布均匀.Bowen病组中和SCC组中MVD明显升高（表3）・图1SCC组织MMP9表达SPx400（略）表2SCC组织MMP9表达与患者年龄、性别及鳞癌分期的关系（略）图2SCC组织MVD计数SPxlOO（略）表3CD34和MVD在Bowen病和SCC中表达（略）aP<0.05vs正常皮肤.3讨论本研究结果显示,MMP9在SCC组中高于

6、Bowen病组织（P<0.05）,Bowen病组中MMP9高于止常皮肤组（P<0.05）.Bowen病MMP9在增生表皮细胞质或细胞核表达；在SCC组织中MMP9在肿瘤细胞，增生上皮细胞和间质细胞均有阳性表达，在表达的强度、阳性细胞的种类、数量上均高于Bowen病组，提示MMP9高表达可能是SCC转移、侵袭能力的分子基础.同时观察到仅有部分有肿瘤细胞能表达MMP9,且表达MMP9的肿瘤细胞多位于癌巢的外周部分和毛细血管、淋巴管管腔周围，提示MMP9表达的肿瘤细胞可能具有更强的侵袭能力.实体肿瘤的新生血管提供了更多与体循环连接的通路，这使肿瘤细胞更容易从原发灶向远隔部位转

7、移•肿瘤组织屮微血管密度越大，肿瘤细胞进入血循环及淋巴循环的机会越多,淋巴结及邻近脏器转移的机会也增大.在许多肿瘤中都发现:微血管密度与肿瘤侵袭性与肿瘤转移的发生率相关[1,5-6].近来研究表明,MMP9不仅是降解基底膜和ECM的关键酶，而且在肿瘤间质血管生成中起重要作用[1,5].Wang等[7]人的研究表明，存在于细胞外基质的VEGF能够通过存在于血管平滑肌细胞上的VEGFR1受体调节MMPs的表达.而MMPs又能降解细胞外基质释放更多的VEGF,这便建立了一个