生化综合实验指导书

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1、《生物化学综合实验》实验指导书适用专业：生物技术、生物工程、食品科学与工程生物与食品工程学院生物科学系生物化学综合实验基本情况—'实验题目1.不同植物总DNA的提取及亲缘关系的研究2.植物不同组织可溶性蛋白提取和多肽组分差异研究二'选题要求1.每小组（4人组成一个小组）选一个实验题目；2.实验中所需生物材料自选，可选用多种生物材料；3.实验内容的安排要有一定工作量，必须包括指导书中要求运用的实验技术。三、学生准备的要求学生选定实验内容后，要写出实验方案，包括：实验目的和意义；实验方法及操作过程（至少准备两种方案）；各种方法所需仪

2、器（包括设备和玻璃器皿）、药品及其数量。实验方案必须在综合实验开始前完成，并做成电子版，交于指导教师审阅。、实验时间安排学牛于周一进入实验室开始实验，周四结束实验。周五撰写并提交实验报告。五、综合实验的评分标准学生综合实验成绩由指导教师评定，分为优秀、良好、中等、及格和不及格几类。评定依据是学生的态度、出勤率、实验准备情况、实验动手能力、实验结果、以及实验的创新性上进行评分（具体见附表）。六、实验报告要求综合实验完成后，必须提供一份每日的实验记录和一份实验报告。实验报告形式附后。综合实验目的及基本步骤实验1.不同植物总DNA的提

3、取及亲缘关系的研究实验目的核酸的分离纯化是核酸制备及分析的前提和基础，通过本实验将学会和掌握核酸制备的一些基本操作和方法，并通过分光光度法和电泳等实验技术研究核酸的性质，同时掌握用限制性内切酶酶解技术分析不同材料之间亲缘关系的方法。实验仪器与试剂主要仪器器材：研钵、纱布、高速离心机、紫外分光光度计、涡旋仪、水浴锅、微量加样器、电泳仪、紫外透射反射分析仪、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱等。主要试剂：液氮、SDS、CTAB、Tris、乙醇、疏基乙醇、EDTA、氯仿、异丙醇、HCk蔗糖、NaCl、苯酚、限制性内切酶试剂盒等。基本步骤1.DN

4、A提取：一定量的样品一液氮研磨-＞提取一沉淀一TE缓冲液溶解2.DNA浓度（纯度）测定:用紫外分光光度计于260nm、280nm、230nm波长测定1.DNA的限制性内切酶酶解性质研究：按照限制性内切酶试剂盒说明书，对提取的不同材料DNA作酶解处理。2.DNA电泳：安装电泳仪一制备凝胶一点样（包括总DNA和酶解后的DNA片段）一电泳3—5小时一用紫外透射反射仪观察要求运用的实验技术紫外分光光度技术、琼脂糖凝胶电泳技术、高速离心技术、限制性内切酶酶解技术等。参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志）1.分子生物学实验指导，刘进元等

5、编著，清华大学出版社2.生物化学与分子生物学实验技术，杨安钢等编，高等教育出版社3.生物化学实验原理和方法，李建武等编，北京大学出版社实验2.植物不同组织可溶性蛋白提取和多肽组分差异研实验目的蛋白质的性质、结构和功能的研究，以及生物体内蛋白质构象的变化都是建立在蛋白质分离纯化基础上的。在蛋白质的分离过程中，必须通过分子量大小测定来获得所提蛋白质的大小，并通过SDS-PAGE电泳比较分析有差异的条带。本实验通过对植物不同组织可溶性蛋白的提取，含量测定，差异条带研究，从而掌握蛋白质的系列研究方法和操作。实验仪器与试剂主要仪器：研钵、

6、离心机、紫外分光光度计、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱、等。主要试剂:pH试纸、PVP、B-毓基乙醇、Tris、考马斯亮蓝、Acr、Bis等实验步骤1.提取与分离：称取一定量材料一用组织捣碎机捣碎一提取一二次抽提2.含量测定：用考马斯亮蓝G250测定蛋白质分子量大小并绘制标准曲线3.多肽测定：聚丙烯凝胶电泳分离可溶性蛋白，分析找到有差异的蛋白质条带要求运用的实验技术离心技术、紫外分光光度技术、聚丙烯酰胺凝胶电泳技术等。参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志）1.生物化学实验，陈曾燮等编，中国科学技术大学出版社2.生化实验方法和技巧（

7、第二版），张龙翔等主编，高等教育出版社3.蛋白质电泳实验技术，郭尧君编，科学出版社4.牛物化学实验指导，余冰宾主编，清华大学出版社5.现代酶学，袁勤生主编，华东理工大学出版社生物化学综合实验评分标准备注30z(度态验>矢分天实半合蜒综故天无半分三O勤1缺分若。满；格••分及勤5不曲减验O0洁整艮月验着艮月5F1nMn实复反有探于勇。中确验准熱力探验F1n宀只分O隹占小许L，键验关实现习发页匕匕XL厶冃UM朴nO11O录记血度程ffl>的象现验5O序有及洁清持保中程过验5面台作工*器药归后及束洁结清验的实上MnO考田"生发启及路

8、田"验体具5宀I分O整完的告报验O0实的告报验实O11HI议建及获收验实5实验报告形式题目：姓名学号班级摘要：关键词：Abstract:Keywords:前言：简要介绍本实验研究的意义与目的。材料与方法：详细说明实验使用的材料及实验方法，注明各方法的出处。结果：