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时间:2019-10-18
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1、临床医学论文■血小板抗原基因的分型与配型临床疗效作者:林国连高发平陈雅雯【关键词】血小板摘要:廿的:血小板基因分型及配型的探导,以便确定临床血小板输注的安全和疗效。方法:应用聚合酶链序列特异性引物技术(PCR-SSP),对湛江市72例患者(人血小板抗原)的HPA1-5系统等位基因进行分型,由湛江市血液中心提供相配型的血小板为其进行成份血小板输注。结果:经血小板基因配型的吻合组血小板输注后CCI1、CCI24效果明显优于对照组。结论:对血小板基因分型与配型可以提高临床输注血小板的安金性和疗效。关键词:人血小板抗原;基因分型;配型;临床疗效TheGenotypeMatched・typcan
2、dClinicalEffectofPlateletsAntigenGeneAbstract:Objective:Toresearchthegenotypeandthematchedofplateletsantigengeneformakingsuretheclinicaleffectoftheplateletsinject.Method:DivideHPA1・5systemaccedeof72patientsinZhanjiangbythetechniqueofPCR・SSP・Theinjectmatched-plateletswithprovidedbythebloodcentero
3、fZhanjiangforpatients.Result:ThegroupinjcctcdthematchedgenotypeplateletsintheeffectofCCI1.CCI24werebetterthanthecomparedone・Conclusion:Todividethegenotypeandmatchthetypeofplateletscanimprovethesafetyandcurativeeffectoftheplateletsinjection.Keywords:Plateletsantigen;Thegenotype;Matched-type;Clini
4、caleffect国外近年来经大量硏究后发现,HPA(人血小板抗原)在新牛儿血小板减少性紫瘢,输血后紫瘢,和经血”板输注后无疗效等疾病中具有重要意义〔1〜2〕。特別在临床上,许多血小板减少性紫瘢患者,因血小板输注疗效很差,并发出血等,更有甚者导致死亡等严重后果。因此,有必要对血小板抗原基因分型及配型进行深入的探导。一直以来,医学上一直用传统的血清学方法进行HPA分型,由于缺乏高质量、高效价抗血清等等多种因素的制约,始终无法对HPA进行分型。随着对HPA基因的深入硏究,国外近年来己报道〔3〜6〕将基因检测技术用于血小板分型硏究中,经临床配型输注取得较好的效果。本文应用聚合酚链-序列特异性
5、引物技术(PCR-SSP)对湛江市区72例患者的HPA1-5系统等位基因进行了分型,并提供基因型相合的血/J板成份进行输注,现报告如下。1材料与方法1・1检测标本:抽取185名湛江市区的健康军人献血者以及72例需输注血小板的患者静脉血lml(EDTA抗凝)1.2主要试剂和仪器TaqDNA聚合酶由Promcga公司捉供,HPA1・5系统等位基因特异性引物由美国C&T公司提供,DNA提取采用德国QLAmpDNAMinikit,扩增仪为澳大利亚RG公司3000型WVSR分析仪。1.3DNA捉取:采有德国QIAampDNAMiniKit从全血中捉取DNA,操作按机器说明书进行。1.4PCR-S
6、SP特异性HPA基因扩增1.4.1PCR反应体系:反应体系共10口1,包括反应混合液(含特异性HPA1a〜HPA5b基因引物,内对照引物,Dntp、PCR缓冲液等)8/zl,提取的基因组DNA1n1及含0.6UTaqDNA酶液1“1。1.4.2PCR扩增参数:首先以95°C5min变性;然后按95°C30S,60°C60S,72°C90S扩增,共45个循环。1.4.3扩增产物鉴定:PCR扩增产物在2%琼脂糖凝胶中电泳,在紫外光下观察结果。1.5临床HPA基因吻合组与末配型组输注成份血小板的疗效比较果:将需要输注血小板的患者分为基因吻合者(吻合组)及末配型者(对照组)两组,分别在输注前、
7、输注后lh和24h进行血小板计数,同时记录输入的血小板数总量及患者的体表面积。计算血小板输注后lh、24h患者纠正的血小板计数增値(CC1)〔7〕,比较两组的有效率。2结果2.1对185名湛江市区的健康军人献血者进行HPA基因分型,其ABO血型、HPA基因型分布情况见表1。2・2对72例需输注血小板的患者进行HPA基因分开型,其ABO血型、HPA基因型分布情况,见表2。2.3对湛江山区72例需输注血小板患者进行血/J板基因分型并选择,由湛江市血
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