2.3分解纤维素的微生物的分离的拓展

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1、5、实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线（3条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析以下叙述，不正确的是A链霉素能阻止结核菌的生长B链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D链霉素可以用于治疗伤寒病人D(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落什么样的环境取样?①培养的目的?②选择培养基的特点?挑选什么样的菌落?①鉴别培养基的特点?②如何鉴别?根据：微生物对生存环境的要求，到相应环境中去找；目的：增加纤维素

2、分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物；刚果红染色法微生物培养基的氨基酸氮源，由酪蛋白水解得到，常见商品名称为水解酪素或酶解酪素。酪蛋白水解后富含21种氨基酸，氨基酸种类齐全。因此常用于制备培养基。4.酪素酵母膏实际上是膏状的酵母抽提物，酵母抽提物是国家行业标准的规定名称。   酵母抽提物以酵母为原料，采用自溶法或加酶水解法工艺，经分离、脱色（或精制浓缩、喷雾干燥）而成的，含氨基酸、肽、多肽及酵母细胞水溶性成分的产品。包含粉状、与膏状的产品。   酵母膏可以有食品调味与生物发酵培养基两大类用途。在生物发酵行业应用还有一种习惯叫法是酵母浸膏。3、酵母

3、膏问题三：“资料三”中的两种方法各有哪些优点和不足，你打算选哪一种？刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史，在本课题中我们给出了两种方法。方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降

4、解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。2．筛选过程中用到的两种培养基(1)名称：①纤维素分解菌的选择培养基；②纤维素分解菌的鉴别培养基。(2)区别①纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基，利用液体培养基能使营养成分充分消耗，以增加纤维素分解菌的浓度。②纤维素分解菌的鉴别培养基为固体培养基，因为要在培养基上形成我们肉眼可见的菌落。③在上述选择培养基中能以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；而在上述鉴别培养基中，绝大多数微生物都可以正常生长。2．与分解尿素细菌的流程区别(1)分离分

5、解尿素的细菌的取样流程图是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为惟一氮源的选择培养基上，直接分离得到菌落。(2)分离分解纤维素的微生物的实验流程通过选择培养基，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本相同。方法一：方法二：步骤培养基经涂布培养先长出菌落→再覆盖1mg/mL的CR溶液→(10~15min后)倒去CR溶液→加入1mol/L的NaCl溶液→15min后倒掉NaCl溶液→出现透明圈配置10mg/mL的CR溶液→灭菌→按照1mLCR溶液/200mL培养基的比例混匀→倒平板→接种后培养→出现透明圈优点显示出的颜色基本上是纤维素分解菌的作用

6、操作简便，不存在菌落的混杂问题缺点操作繁琐，加入刚果红会使菌落之间发生混杂①由于产生淀粉酶的微生物也形成透明圈，所以可能产生假阳性反应。②有些微生物具有降解色素的能力，他们在培养过程中也会形成明显的透明圈，与纤维素的分解菌不易区分。两种刚果红染色法的比较：