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流式细胞(FACS)多次试验数据比较

流式细胞(FACS)多次试验数据比较

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时间：2019-10-18

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1、Standardization23-13536-00Rev.01ComparingDataAcrossCytometersScenariosinclude:Corefacility:thesamecytometerisnotalwaysavailable.Clinicaltrialsdoneatmultiplesites.Researchcollaborationbetweendifferentlaboratoriesandinstitutions.223-13536-00Rev.01CytometerACytomet

2、erBSampleRunonDifferentCytometersCytometerC323-13536-00Rev.01StandardizationAcrossCytometersGOAL:Tobeabletocompareapplicationresultsacrosssitesandplatforms.NEED:Amethodtoestablishconsistentandreproducible MFItargetsacrosstimeandcytometers.ACB423-13536-00Rev.01St

3、andardizingSetupwithCS&TOneCytometer—DaytoDayUsePerformanceChecktotrackinstrumentperformance.UseApplicationSettingstopositioncellsofinterestat optimaltargetMFIs.MultipleCytometersUsePerformanceChecktotrackinstrumentperformance.UseApplicationSettingstopositioncel

4、lsofinterestat optimaltargetMFIs.ApplicationsettingsstandardizethetargetMFIsacrossmultiplecytometersbyusingareferenceparticleforeachparameter.523-13536-00Rev.01StandardizationReferenceParticlesWhenallcytometeroptical configurationsarethesame:CS&TbrightbeadsWhena

5、tleasttwocytometer opticalconfigurationsare different:BlueD:FITCBlueC:PEBlueB:PerCP-Cy5.5BlueA:PERedB:APCRedA:APC-H7VioletB:V500VioletA:AmCyanBDCompBeadsCD8FITCBDCompBeadsCD8PEBDCompBeadsCD8PerCP-Cy5.5BDCompBeadsCD8AmCyanBlueD FITCBlueC PEBlueB PerCP-Cy5.5Violet

6、A AmCyanBlueD FITCGreenD PEBlueB PerCP-Cy5.5VioletA AmCyanCytometerACytometerB623-13536-00Rev.01MFITargetValuesforStandardizationFromthecytometerbaselinereports,determine:thehighestrSDofelectronicnoiseforeachparameterthelowestLinearityMaxChannelforeachparameterS

7、electonecytometerandadjust thefluorescenceparameterPMT voltagesasneededtooptimize forthecellsofinterest.Ontheselectedcytometer,run thereferenceparticleforeach parameter.TheMFItargetvalues forstandardizationaretheMFIsofthereferenceparticles.MFItargetvaluecellsofi

8、nterestreferenceparticle723-13536-00Rev.01Ontheselectedcytometer:Rununstainedcellsandforeachfluorescenceparameter,verifythattherSDofthenegativepopulationisabout 2.5ti

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