中药防治鸡汞中毒机理研究

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1、中药防治鸡汞中毒机理研究（技术路线）1材料1.1试验动物及样品1.1.1汞矿周围采集的样品分别在汞矿区附近杨家湾，张家坪等村庄采集土壤、水；萝卜、玉米、大米和白菜等蔬菜各500g；当地农户笼养的鸡、鸭各3只，猪、牛、羊分别取一头，采集心脏、肝脏、脾脏、帅脏、肾脏、肌肉各500go1.1.2试验性汞中毒动物试验动物为200只脱温鸡苗，购于贵阳市花溪区三桥某禽苗批发公司。检疫并观察一周后投入实验。1.2主要药物与试剂中药:黄茂、甘草、茯苓、白茅根、白术、山药、蒲公英等购自贵州省贵阳市花溪区屮医院汞标准储备

2、液（100

3、ig/mL,国家标准物质屮心）硝酸（优级纯，含量65.0-68.0%,国跖集团化学试剂有限公司）30%过氧化氢（优级纯，天津市东方化工厂）氨气（青岛合利气体有限公司）二卬苯（重庆川东化工（集团）有限公司）无水乙醇（重庆川东化工（集团）有限公司）苏木素（武汉博士德生物工程公司）多聚甲醛（天津市同鑫化工厂）屮性树胶（中杉金桥生物公司）石蜡（熔点：57-6rc,上海标木模型厂）SOD超氧化物歧化酶（鳳国生物技术有限责任公司）GSH-PX谷胱LT肽过氧化物酶（鼎国生物技术有限责任公司）MDA丙二醛

4、（鼎国生物技术冇限责任公司）AST谷草传氨酶（抽国生物技术有限责任公司）1.3主要试验器材SW-CJ-2FD双人单面净化工作台（苏州净化设备冇限公司）PE-6800VET全口动血细胞分析仪（深圳市普康电了有限公司）TGL-20M台式冷冻离心机（氏沙湘仪贝克仪器仪表有限公司）Scanspeed微型台式离心机（丹麦Labogene公司）BS110S电子天平（徳国SARTORIUS）LeicaRM2125切片机（德国探卡公司）MDF-382E・80°C低温冰箱（SANYO公司）BCD-215KCF海尔冰箱（

5、青岛海尔股份有限公司）OLYMPUSCH20BIMF200显微镜（口本OLYMPUS光学有限公司）PHS-3S酸度计（上海虹益仪器仪表冇限公司）微波消解萃取仪（上海新仪微波化学科技有限公司）ECH-1型电了控温加热板（上海新仪微波化学科技有限公司）LD4-2A离心机（北京医用离心机厂）AFS-9130双道原子荧光光度计（北京吉天仪器有限公司）Sartorius电子天平（徳国赛多利斯公司）ICP-MS电感耦合等离子体质谱仪（Inductivelycoupledplasmamassspectrometry

6、）（北京吉天）2方法2.1汞矿周围环境及畜禽体内汞含量调查2丄1样品釆集与处理2.1.1.1土壤采集与处理采集：土壤采用4分法则采集，每个样品从5mx5m的正方形4个顶点和中心点共5处各采集lkg的表层土壤（0-20cm）,均匀混合后用4分法从中选取1kg土壤，代表该点的混合样品。样品用聚乙烯塑料袋编号封装保存，防止交叉污染。处理：样品带回实验室后，除去所采样品屮石子，植物及其它杂质，充分风干后取部分样品，研钵捣碎研磨，过100目尼龙筛，在40°C烘箱中干燥24h后干燥器皿屮保存备用；将土壤样品l.O

7、g置于250ml锥形瓶中，用少量蒸憎水润湿，加入硫酸•硝酸混合液lO.OmL,待剧烈反应停止后，加入去离了水15mL,在瓶口插一玻璃漏斗，置于水浴锅中加热至80°C,保持60min,同时做空白对照。待加热完成后，降至室温，将试液（含残渣）全部移入100mL容量瓶屮，用去离子水洗涤锥形瓶3・5次，洗涤液并入容量瓶，加去离子水至标线，摇匀，待测。2.1.1.2水体采集与处理采集：采用孔径为0.04um醋酸纤微滤膜现场对水样进行过滤，过滤水样装入500mL经预先处理的超净聚乙烯瓶保存。在采集样品2而所使用的

8、所有器皿必须先用样品水洗涤，润洗，至少3次后再将样品水装入瓶中。采样操作过程中均使用一次性聚乙烯手套，尽可能减少操作过程中带入的人为汞污染。处理：带回实验室后加5.0mL12mol/LHC1,置于0・4°C保存，待测。2.1.1.3动物样品及农作物的采集与处理采集：选择矿区附近农田中水稻（去壳，取其中大米）、玉米（去外包叶和玉米棒，取其屮玉米粒）和蔬菜（带冋实验室后先用高纯水冲洗表面，在100级洁净工作台里室温下进行干燥），然后密封于3层聚乙烯样品袋屮，编号，冷冻保存直到分析；鸡、鸭、猪、牛、羊分别采

9、集肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏和肌肉等分装入预先处理的聚乙烯袋中，分别标记，・2o°c保存。处理:将己标记的动物样品及农作物分别磨碎，称取约0.2g（准确至O.OOOlg）经磨碎的样品，置于耐高温压力消解罐底部，加入5mL浓硝酸（分析纯），3mL过氧化氢（分析纯），摇匀，将消解罐密封后置于高温高压微波消解仪中消解。消解结束后，移出消解仪，待消解罐完全冷却后再开启。将消解罐屮的消解液全部移至50mL的容量瓶屮，用蒸诸水仔细冲洗罐盖及罐壁，将洗液混入容量瓶里