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1、XX大学毕业论文Id1在肝细胞癌中的表达及其临床意义2014年6月25日作者：刘豫瑞，方明霞，曾达武【摘要】目的研究DNA结合/分化抑制蛋白1(Id1)在肝细胞癌(HCC)屮的表达及其临床意义。方法HCC手术切除标本40例，癌旁肝组织23例(离癌灶3cm),并以15例正常肝组织为对照，用链酶抗生物素蛋口过氧化物酶免疫组织化学(SP)方法检测Id1、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因了1受体(IGF1R)和Bel2的表达，并分析Id1与其他各指标的关系。结果Id1、VEGF、IGF1R和Bel2在HCC中的阳性表达率(分
2、别为85%、77.5%、85%、40%)及表达强度均明显高于对照组。Id1的表达与HCC的分化程度呈正相关，即癌细胞分化越高Id1表达越强;Id1在转移的或5cm的HCC屮的表达低于无传移的或5cm的HCC；VEGF的表达与HCC的分化程度呈止相关，而IGF1R的表达与HCC的分化程度呈负相关；Bel2的表达与HCC的分化程度无关；Id1的表达与Bel2无相关性，而与VEGF呈正相关(r=0.601,P0.001),与IGF1R呈负相关(r=-0.377,P=0.016)o结论Id1在HCC中参与了肿瘤血管形成和细胞增殖调控，但
3、可能不直接参与抑制细胞凋亡的调控。【关键词】抑制因子,免疫；癌，肝细胞；肝肿瘤；血管内皮生长因子类;原癌基因蛋白质cbcl2；受体，IGF1型；免疫组织化学肝细胞癌(HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一，其预后较差，死广率仅次于胃癌和食管癌，全球死于HCC的人数中，我国约占40%。寻找早期诊断、治疗及预后评价的有效生物学指标是目前HCC研究的重要内容。DNA结合/分化抑制蛋白1(inhibitorofdiffferentiation/DNAbinding1,Id1)是1990年代发现的一种分化抑制因子，其通过抑制环螺旋环转录因子对
4、细胞增殖与肿瘤发生起到关键的作用。冇研究表明Id1可促进细胞增殖，参与肿瘤的血管形成，促进肿瘤的生长及转移［13］。笔者通过检测Id1在HCC中的表达情况，分析其与血管内皮生长因了（VEGF）、胰岛素样生长因了1受体（IGF1R）及Bel2表达的相关性，初步探讨Id1在HCC中的作用。1资料与方法1」一般资料40例癌组织标木为木院2004年1月・2005年12月的手术标本，其中男性29例，女性11例，年龄中位数52岁（31〜75岁）。术前均未行化疗、放疗和其他治疗，术后病理证实为HCC,其'P5cm的17例，三5cm的23例。组
5、织按癌细胞分化程度分级，转移情况以有无淋巴结转移及门静脉癌栓为准。标本经10%甲醛溶液固定，常规右蜡包埋，4pm连续切片。取癌旁肝组织23例（离癌灶3cm）以及因外伤切除或肝脓肿手术切除的止常肝组织15例为对照。1.2免疫组织化学采用链酶抗生物素蛋口过氧化物酶免疫组织化学（SP）法，操作按说明书进行。以磷酸盐缓冲生理盐水（PBS）置换一抗作为阴性对照。所用一抗包括Id1兔抗人多克隆抗体1:100（SantaCruzC20,USA）、小鼠抗人VEGF单克隆抗体（克隆号JH121）、小鼠抗人IGF1R单克隆抗体（2431）和小鼠抗人
6、Bel2单克隆抗体（克隆号100/D5）,均购自美国Neomarkers公司。1.3结果判断根据阳性细胞染色程度（A）判断，阳性反应为胞膜或胞质内出现棕黄色颗粒状染色，无染色为0分、较多淡黄色颗粒为1分、较多棕黄色颗粒为2分、大量深棕黄色颗粒为3分；每片观察5个高倍镜视野（x400）,计数癌细胞总数和阳性细胞个数，得出阳性细胞百分率（B）,阳性细胞数＜30%为1分、31%〜75%为2分＞＞76%为3分。AxB得0者为（一），1〜4分为（+）,4分为（人为低表达，””为高表达。1.4统计学处理数据采用SPSS13.0软件包进行%2
7、检验及Spearman等级相关分析，以P0.05为差别有统计学意义。2」Id1、VEGF、IGF1R及Bel2在HCC和癌旁组织屮的表达Id1阳性染色主要位于胞质，部分表达于胞膜；VEGF及Bel2阳性染色主要位于胞质；IGF1R阳性染色主要位于胞膜。Id1、VEGF、IGF1R及Bel2在HCC和癌旁组织中的表达情况见表U2.2Id1、VEGF、IGF1R及Bel2在HCC中的表达与其组织分化程度相关性HCC中Id1的表达与HCC分化程度呈正相关(r=0.589,P0.01),与HCC大小、冇否转移具冇相关性；而VEGF与HC
8、C的分化程度呈正相关(r=0.369,P0.05)；IGF1R与HCC的分化程度呈负相关(r=-0.569,P0.01)；Bel2则与HCC分化程度无关(r=-0.115,P0.05),具体见表1,2。2.3HCC中Id1、VEGF、IGF1R及Bel2表达的相
