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1、不同方法炮制蒲黄之总黄酮变化探究【摘要】目的：验证蒲黄用不同方法炮制前后总黄酮含量是否发生变化。方法：采用紫外-可见分光光度法，测定蒲黄中总黄酮含量。结果与结论：生蒲黄总黄酮的含量为2.459%,炭蒲黄总黄酮的含量为1.156%,醋制蒲黄总黄酮的含量为2.318%O【关键词】蒲黄；总黄酮；紫外可见分光光度法蒲黄系香蒲科植物水烛香蒲TyphaangustifoliaL.、东方香蒲TyphaorientalisPresl或同属植物的干燥花粉。蒲黄味甘，性平。归肝、心包经。具有止血化瘀、利尿通淋等功效。用于血瘀所致经闭，痛经，产后瘀滞腹痛，跌打损伤等。生品性滑，偏于活血化瘀、利尿通淋。炒炭后性
2、涩，止血作用增强。常用于咯血、吐血、尿血、便血、崩漏及外伤出血。醋炙蒲黄入肝经，有解毒消肿，活血散结止痛之功。有文献［2］报道，生蒲黄具有延长小鼠凝血时间和较大剂量下的促纤溶性，而炭蒲黄则能明显缩短小鼠凝血时间，无促纤溶活性。可见炮制前后蒲黄的药理作用的改变，主要体现在总黄酮的含量变化。本研究采用紫外-分光光度法测定蒲黄炮制前后总黄酮的含量，以探讨蒲黄炮制的意义。1仪器与试药Sartorius10-4电子天平(BS124S),紫外分光光度计（UV-1800PC）o芦丁对照品（购自中检所，批号：100080-200306,供含量测定用），无水乙酸钠（分子量：82.03）,三氯化铝（分子量：
3、241.43）,水为蒸馆水，其它试剂均为分析纯。2试验方法与结果2.1蒲黄的炮制［3］生蒲黄：取原药材，过细筛除去残存花丝及杂质。炭蒲黄：取净蒲黄置锅内，用中火加热炒至棕褐色，喷淋水少许，灭尽火星，出锅，晾凉。醋蒲黄：取净蒲黄，喷使用醋适量，拌匀，微火炒干，出锅晾凉。每净蒲黄100kg，用醋20kgo2.2对照品溶液的制备取芦丁对照品219.6mg,精密称定，置100mL容量瓶中，加甲醇70mL,置水浴上微热使溶解,放冷，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取溶液10mL,置100mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。（每ImL中含芦T0.2196mg）o2.3供试品溶液的制备取生品蒲黄、炭蒲
4、黄、醋蒲黄各lg,精密称定，置索氏提取器中，分别加乙瞇120mL加热回流至提取液无色，放冷，弃去乙瞇液，再加甲醇95mL,加热回流至提取液无色，转移至lOOmL容量瓶中，用甲醇少量洗涤容器，洗液并入量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。2.4测定方法及检测波长的选择三氯化铝显色法精密量取各供试品溶液加L置25mL量瓶中，加0.1M三氯化铝溶液3mL及1M乙酸钠溶液5mL,加甲醇至刻度，摇匀，放置5min,以相应试剂为空白，在190-800nm范围内扫描光谱，同时依法操作得同条件下芦丁对照品光谱图。该法显示供试品与对照品在273nm处有相同的最大吸收，故选择三氯化铝相显色法。2.5精密度试验精
5、密称定蒲黄生品III供试品溶液2mL,按照前述方法进行测定，连续测定6次，结果表明，蒲黄生品III供试品溶液吸收度的RSD为4.06%,说明精密度良好。2.6稳定性试验精密量取蒲黄生品II供试品溶液2mL,按照前述方法进行测定，然后每隔lOmin测定一次吸光度。结果表明，供试品溶液在2小时内稳定性良好，在显色30min-60min之内测定，结果更为准确。2.7加样回收率试验取已知总黄酮含量的蒲黄生品(总黄酮含量2.459%)约lg,精密称定，共取6份，分别准确加入芦丁对照品溶液约10mL,按前述方法制备成供试品溶液，并按含量测定方法进行测定，计算回收率。回收率为97.52%(n=6),R
6、SD=1.44%。说明该测定方法测定结果准确。3样品含量测定按前述方法对生蒲黄、炭蒲黄、醋炒蒲黄进行含量测定,在上述分光光度法测定条件下进行测定，测定结果见表2O表2蒲黄总黄酮含量测定(mg/g)4小结与讨论4.1试验结果表明生蒲黄总黄酮含量〉醋炒蒲黄〉炭蒲黄总黄酮含量。醋炒蒲黄与生蒲黄相比，总黄酮含量减少,此外，醋炒蒲黄经过一定时间的加热，这一实验结果证明炮制时加醋对蒲黄化学成分含量产生影响。炭蒲黄总黄酮含量明显少于生蒲黄总黄酮含量，这应当与黄酮类化合物在高温下结构易发生变化或遭到破坏有关，而且温度越高，破坏性越大，含量减少越多。正常人体内血液凝固和纤维蛋白溶解这两个过程处于动态平衡，
7、即血液在生理功能上存在凝血抗凝血两个对立而统一的矛盾过程，二者相辅相成。血小板聚集性与血液凝固性紧密相关。活血化瘀药药理作用之一是明显抗血小板聚集，其终极结果是改善器官的血液循环，使血流通达。蒲黄中总黄酮具明显抗血小板聚集作用，是蒲黄活血化瘀主要有效成分之一。蒲黄经过炮制后，活血化瘀有效成分总黄酮含量减少，则止血作用相对增强。这说明蒲黄“生则能行，熟则能止”是有一定道理的。4.2本实验由于各方面原因，平行试验次数较少，无法进行统计学
