肝细胞肝癌中转录因子FOXM1表达的临床意义及其调控AFP表达与分泌的分子机制研究-临床

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1、英汉缩略语名词对照英文缩写英文全称中文全称ACP5tartratc-rcsistantacidphosphatase5耐酒石酸酸性磷酸酶5AFPalpha-fetoprotein甲胎蛋口Afrlalpha-fetoproteinregulator1甲胎蛋白调节因子1Afr2alpha-fetoproteinregulator2甲胎蛋白调节因子2BMEbeta-mercaptoethanolB■疏基乙醇bpbasepair碱基对BSAbovinesemmalbumin牛血清口蛋口Zbtb20ZincfingerandBTBdomaincontaining20BTB锌指蛋白20cDNAcomple

2、mentaryDNA互补DNAddH2Odoubledistilledwater双蒸水DNAdeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸DNasedeoxyribonucleaseDNA酶F0XM1ForkheadboxtranscriptionfactorM1转录因子F0XM1FBSfetalbovineserum胎牛血清FQ-PCRfluorescencequantitativePCR荧光定量PCRFTFfetoproteintranscriptionfactor胚胎蛋口转录因子GFPgreenfluorescentprotein绿色荧光蛋白HCChepatocellularcar

3、cinoma肝细胞肝癌HNF1hepatocytenuclearfactor1肝细胞核因子1HRPhorseradishperoxidase辣根过氧化物酶KDkilodalton千道尔顿Mmol/L摩尔/升MEMEagletsminimumessentialmedium最低必需培养液MMPsmatrixmetalloproteinases基质金属蛋白酶MOImultiplicityofinfection感染复数mgmilligram毫克mlmilliliter毫升minminute分钟mRNAmessengerribonucleicacid信使核糖核酸NFInuclearfactorI核因子I

4、ngnanogram纳克ODopticaldensity光密度PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳PBSphosphatebuffersaline磷酸盐缓冲液PCRpolymerasechainreaction聚合酶链反应PHpotentialofhydrogen酸碱度PSPenicillin-Streptomycin青/链霉素RafRegulatorofalpha-fetoprotein甲胎蛋白调节因子RNAribonucleicacid核糖核酸RNaseribonucleaseRNA酶ssecond秒SDSsodiumdodecylsu

5、lfute十二烷基硫酸钠Tristrishydroxymethylaminomethane三疑甲基氨基甲烷microlitre微升pMmicromol/L微摩尔/升曲microgram微克VEGFvascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长因子Zhx2Zinc-fingersandhomeoboxes2摘要锌指同源框蛋白2目的:研究人肝细胞肝癌(HCC)中转录因子F0XM1表达的临床意义及其调控AFP表达与分泌的分子机制。方法:(1)采用Westernblot技术检测52例HCC患者肝癌组织中F0XM1蛋白的表达,并分析其与HCC患者临床病理特征的关系;(2)采用

6、荧光定量PCR技术检测HCC患者肝癌组织中AFPmRNA表达水平,电化学发光法检测患者术前血清AFP分泌水平,通过Pearson相关性分析方法分析HCC患者癌组织中F0XM1蛋白表达水平和AFPmRNA表达水平及术前血清AFP分泌水平三者的相关性;(3)最佳MOI的重组F0XM1腺病毒分别感染AFP高表达的HepG2>HepG2.2.15细胞和AFP低表达的SMMC7721细胞,感染24h后通过荧光定量PCR技术验证细胞内F0XM1mRNA表达情况,感染48h后通过Westernblot技术验证细胞内F0XM1蛋白表达情况及其下游基因cyclinB1蛋白表达变化情况;(4)以最佳MOI的重组F

7、0XM1腺病毒感染HepG2、HepG2.2.15和SMMC7721细胞,感染24h后通过荧光定量PCR检测F0XM1蛋白对AFPmRNA表达的影响,感染48h通过Westernblot和电化学发光法观察F0XM1蛋白对AFP蛋白的表达及分泌的影响。结果:(1)FOXM1表达与HCC肿瘤大小和淋巴转移有关(Pi=0.039,巴=0.039),而与年龄、性别、肝硬化、HBV感染状态和肿瘤分期无关。(

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