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1、原发性肝癌中肝细胞生长因子mRNA的定量表达及其临床意义论文浦涧，汪建初，韦忠恒，李良波，韦建宝，严浩然，覃志坚【摘要】目的对原发性肝癌组织、癌旁组织以及正常肝脏组织肝细胞生长因子(HGF)mRNA进行定量测定，分析其表达与临床特征的关系.freelRNA的表达量，分析其表达量与性别、年龄、血清HBsAg、AFP、分化程度、肿瘤大小、临床分期、转移状态以及是否合并肝硬化等临床特征的关系。结果HGFmRNA在原发性肝癌组织、癌旁组织中的表达与正常肝脏组织差异无显著性（P0.05）。HGFmRNA在肝癌合并肝硬化组中的表达明显高于未合并肝硬化组（P0.0
2、5），但与其它临床特征无关。结论HGFmRNA在肝癌合并肝硬化组织中呈高表达，提示可能与肝癌发生发展有关。【关键词】肝肿瘤聚合酶链反应肝细胞生长因子原癌基因蛋白质c-metAclinicalstudyonhumanHGFmessengerRNAexpressionanditsclinicalimplicationsinprimaryhepatocellularcarcinomaPUJian,edicalCollegeforNationalities,Baise,Guangxi533000,ChinaAbstract:ObjectiveToinvest
3、igatetheexpressionofhepatocytegroRNAandanalyzeRNAexpressionlevelscorrelatearyhepatocellularcarcinoma(HCC).MethodsTissuesamples,including59cancerous,adjacentnon-canceroustissuesand17normallivertissuespatientsRNAePCR.Moreover,therelationshipbetRNAexpressionandclinicopathologiccha
4、racters(suchassex,.freel,HBsAg,AFP,differentiationdegree,tumorsize,clinicalstaging,metastasis,plicatedinedbystatisticalanalysis.ResultsTheexpressionofHGFmRNAinHCCpatientsplicatedongHCCtissues,adjacentnon-cancerousandnormallivertissues(P0.05).ThereRNAandotherclinicopathologiccha
5、ractersasRNAexpressionincreasedsignificantlyinHCCpatientsplicatedaybecorrelatedentofHCC.Keys;polymerasechainreaction;hepatocytegroet肝细胞生长因子(hepatocytegroRNA在肝癌诱变不同时期表达存在差异［6］。然而，HGFmRNA在原发性肝癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）中的表达以及与其临床特征的关系未见文献报道，本研究采用实时荧光定量PCR检测HGFmRNA在原发性肝癌中的表达，初步
6、探讨其与原发性肝癌的发生、发展、浸润转移的关系以及临床应用的意义。1材料与方法1.1标本来源所有59例标本均来自2002～2006年右江民族医学院附属医院手术切除标本，手术切除组织立即液氮冻存，肿瘤组织均经病理检查证实，为原发性肝细胞癌。其中男43例，女16例，年龄（48.6±12.4）岁。癌旁组织取自距上述肝癌病变边缘2.0cm的肝组织共59份。另取肝外伤病人的正常肝脏17份作为正常对照，其中男10例，女7例，年龄（46.9±11.2）岁。1.2仪器与试剂TrizolReagent、SuperScriptⅡ逆转录试剂盒、DNaseⅠ购自美国Invi
7、trogen公司，PCR试剂购自上海申能博彩生物公司。SYBRGreenI实时荧光定量PCR扩增采用TaKaRa（宝生物工程大连有限公司）试剂盒。HGF引物：上游：5’-TGCTCCCCATCGCCATCCCCTATG-3’；下游：5’-TATAGCACCATGGCCTCGGCTGG-3’，产物长度为：756bp。GAPDH：上游引物：5’-CCAATATGATTCCACCCATG-3’；下游引物：5’-GAGAAGGCTGGGGCTCATTT-3’，产物长度为:195bp，引物由上海英俊生物有限公司合成。ABI7500荧光定量PCR仪为美国ABI公
8、司产品。1.3总RNA抽提及反转录取冻存组织100mg，加入TrizolReagent1ml，匀浆后加入0.
